Drosophila ( Drosophila ) Optogénétique : une méthode pour manipuler les circuits neuronaux
Published: April 30, 2023
Abstract
Source: de Vries, S. E., Clandinin, T. Optogenetic Stimulation of Escape Behavior in Drosophila melanogaster. J. Vis. Exp. (2013).
L’optogénétique permet l’utilisation de la lumière pour manipuler les neurones génétiquement modifiés pour exprimer des protéines spécifiques sensibles à la lumière dont l’activation de la lumière déclenche un changement dans l’état du neurone. Ici nous décrivons une approche optogénétique dans Drosophila utilisant l’opsin Channelrhodopsin2. Le protocole d’exemple comporte un essai optogénétique réglé pour étudier les circuits neuronaux derrière le comportement d’évasion de la mouche.
Protocol
Ce protocole est un extrait de de Vries et Clandinin, Optogenetic Stimulation of Escape Behavior in Drosophila melanogaster, J. Vis. Exp. (2013). 1. Générer des mouches channelrhodopsin Cross UAS-ChR2 vole avec le pilote Gal4 de votre choix, nous utilisons G105-Gal4, qui est exprimé en neurones Foma-1 dans le lobe optique. Pour éliminer la possibilité d’une réponse visuelle à la stimulation de la lumière bleue, les deux lignes de mouche sont dan…
Representative Results
Figure 1 : Installation expérimentale montrant la plate-forme avec le support vertical et les quatre bras de refroidissement qui retiennent les puits de chaleur avec des tableaux LED qui leur sont apposés. (A) La mise en place sous éclairage ambiant. (B) La mise en place lorsque les LED sont éclairées. (C) Une vue rapprochée vers le haut d’une LED de Tri-Star sur …
Materials
| Reagent | |||
| All-trans Retinal | Advance Scientific Chemical Inc | R3041 | |
| Equipment | |||
| Heat Sink 9.2 C/W | Luxeonstar | LPD30-30B | 30 mm square X 30 mm high |
| Carclo 18° Tri-Lens | Luxeonstar | 10507 | |
| Blue Rebel LED on Tri-Star Base | Luxeonstar | MR-B0030-20T | 470 nm, 174 lm @ 700 mA. |
| 700 mA BuckPuck DC Driver | Luxeonstar | 3021-D-E-700 | |
| Wiring Harness for BuckPuck Driver | Luxeonstar | 3021-HE | |
| Pre-cut thermal adhesive tape | Luxeonstar | LXT-S-12 | 20 mm Hex Base |
| Snap-Loc Coolant Hose, ¼" ID | McMaster-Carr | 5307K49 | |
| Snap-Loc Coolant Hose Connector | McMaster-Carr | 5307K39 | ¼" NPT Male |
| Laboratory Grade Switching Mode Programmable DC Power Supply | BK Precision | 1698 | |
| Exilim camera | Casio | EX-FH20 |
Citar este artigo
Drosophila Optogenetics: A Method to Manipulate Neuronal Circuits. J. Vis. Exp. (Pending Publication), e20149, doi: (2023).