Soft Agar Colony Formation Assay: En metode for å teste effekter av nye forbindelser på kreftcelleproliferasjon
Published: April 30, 2023
Abstract
Kilde: Horibata A. et. al., Utnyttelse av Soft Agar Colony Formation Assay for å identifisere hemmere av tumorigenicitet i brystkreftceller. J. Vis. Exp. (2015).
Denne videoen beskriver en myk agar koloni formasjon analyse for å teste effekten av en PADI enzymhemmer og BB-Cl-amidine på brystkreft tumorigenicity in vitro. Denne analysen muliggjør også kvantitativ vurdering av celletransformasjonspotensial innenfor konteksten av genetiske perturbasjoner.
Protocol
1. Tilberedning av 3% 2-Hydroksyetyl Agarose I en ren, tørr 100 ml glassflaske, tilsett 0,9 g 2-hydroksyetyl agarose (Agarose VII) etterfulgt av 30 ml destillert vann. Mikrobølgeovn blandingen i 15 sek og virvle forsiktig. Gjenta dette trinnet minst tre ganger til agarosepulveret helt oppløses. Autoklaver den løsningsholdige flasken i 15 min. La agaroseløsningen avkjøles til RT før videre bruk. Oppbevar løsningen hos RT. 2. Forberedelse av bu…
Declarações
The authors have nothing to disclose.
Materials
| Zeiss Axiopot | Carl Zeiss Microscopy | 1021859251 | |
| Inverted Microscope | Olympus | CKX41 | |
| DMEM/F-12 | Lonza BioWhittaker | 12-719F | |
| HyClone Donor Equine Serum | Fisher Scientific | SH30074.03 | |
| Penicillin Streptomycin | Life Technologies | 15140-122 | |
| 2-Hydroxyethylagarose: Type VII, low gelling temperature | Sigma-Aldrich | 39346-81-1 |
Citar este artigo
Soft Agar Colony Formation Assay: A Method to Test Effects of Novel Compounds on Cancer Cell Proliferation. J. Vis. Exp. (Pending Publication), e20226, doi: (2023).