Ex vivo Carga mecánica del tendón

Summary

Un nuevo sistema in vitro para la carga al mismo tiempo cuatro tendones en la cultura se describe.

Abstract

Las lesiones en el tendón (por ejemplo, tendinitis de muñeca, epicondyltis) debido al uso excesivo son comunes en las actividades deportivas y lugares de trabajo. La mayoría están asociadas con actividades repetitivas, de alta fuerza de la mano. Los mecanismos de daño celular y estructural debido a una carga cíclica no se conocen bien. El propósito de este video es para presentar un nuevo sistema que a la vez puede cargar cuatro tendones en cultivo de tejidos. El video describe los métodos de cosecha de tejido estéril y cómo los tendones se cargan en un sistema de sujeción que posteriormente se sumerge en los medios de comunicación y se mantiene a 37 ° C. Una pinza es fijo, mientras que el otro se mueve con un actuador lineal. Fuerza de tracción del tendón se controla con una célula de carga en serie con la pinza móvil. Los accionadores están controlados con un programa de LabVIEW. Los cuatro tendones puede ser repetitiva cargados con diferentes patrones de carga, frecuencia de repetición, la velocidad de carga y duración. Carga puede continuar durante unos minutos a 48 horas. Al final de la carga, los tendones se eliminan y la mitad de sustancia extraída de los análisis bioquímicos. Este sistema permite la investigación de los efectos de la carga de los patrones de expresión génica y cambios estructurales en el tendón. En última instancia, los mecanismos de lesión debido al uso excesivo puede ser estudios con los hallazgos se aplican al tratamiento y prevención.

Protocol

Suplemento media de CO 2-medios de comunicación independientes con suero fetal bovino, L-glutamina, antibióticos, y el ácido ascórbico Alícuota de 40 ml en tubos de 50 ml centrífuga (1 por cada tendón) Alícuota de 10 ml en tubos de 15 ml centrífuga (1 por cada tendón) Esterilizar instrumentos quirúrgicos, las hojas de autoclave, pinzas y una llave de par en autoclave Esterilizar pinzas y puntas de fuerza micrómetro por inmersión en etanol al 70% durante la noche …

Discussion

El video presenta un nuevo sistema para la carga simultánea de hasta cuatro tendones en vivo en cultivo de tejidos. Duración típica de carga es de 2 a 48 horas. Después de cargar, los tendones se retiran y se procesaron para la expresión génica. El sistema permite la investigación del efecto de los patrones de carga sobre los cambios en los genes asociados con cambios degenerativos en el tendón. Estos experimentos pueden proporcionar alguna información sobre los mecanismos de lesión asociados con cargas repetitivas. Ellos ofrecen …

Materials

Custom 4 Linear Actuator loading system Warm water bath 50 ml tubes tendons (rabbit) Sterile media