Ex vivo mechanische belasting van Tendon

Summary

Een nieuwe in vitro systeem voor het gelijktijdig laden van vier pezen in de cultuur wordt beschreven.

Abstract

Verwondingen aan de pees (bijv., pols tendinitis, epicondyltis) als gevolg van overbelasting komen vaak voor bij sportactiviteiten en de werkplek. De meeste worden geassocieerd met repetitieve, grote kracht de hand activiteiten. De mechanismen van cellulaire en structurele schade als gevolg van cyclische belasting zijn niet goed bekend. Het doel van deze video is te presenteren een nieuw systeem dat tegelijkertijd kan vier pezen belasting in weefselkweek. De video beschrijft de methoden van steriele oogst en hoe de pezen worden geladen op een klemsysteem, dat vervolgens wordt ondergedompeld in de media en gehandhaafd op 37 ° C. Een klem vast terwijl de andere wordt verplaatst met een lineaire actuator. Pees trekkracht is gecontroleerd met een load cell in serie met de mobiele klem. De aandrijvingen worden aangestuurd met een LabView programma. De vier pezen kan herhaaldelijk worden geladen met verschillende patronen van laden, herhalingsfrequentie, snelheid van het laden en duur. Het laden kan blijven voor een paar minuten tot 48 uur. Aan het einde van het laden, worden de pezen verwijderd en het midden van de stof gewonnen voor biochemische analyses. Dit systeem maakt voor het onderzoek van de effecten van laad-patronen op genexpressie en structurele veranderingen in de pees. Uiteindelijk kunnen de mechanismen van letsel als gevolg van overmatig gebruik zijn studies met de bevindingen toegepast op de behandeling en preventie.

Protocol

Supplement media CO 2-onafhankelijke media met Fetal Bovine serum, l-glutamine, antibiotica, en ascorbinezuur Aliquot 40 ml in 50 ml centrifugebuis (een voor elke pees) Aliquot 10 ml in 15 ml centrifugebuis (een voor elke pees) Steriliseren chirurgische instrumenten, autoclaaf lakens, pincet en momentsleutel in autoclaaf Steriliseren klemmen en kracht micrometer tips door het weken in 70% ethanol 's nachts Oogst pezen aan de achterzijde poten van het konijn. Konijn moeten…

Discussion

De video presenteert een nieuw systeem voor het gelijktijdig laden van maximaal vier wonen pezen in weefselkweek. Typische laden duur zijn 2 tot 48 uur. Na het laden worden de pezen verwijderd en verwerkt voor genexpressie. Het systeem maakt het mogelijk voor het onderzoek naar het effect van de laad-patroon op veranderingen in de genen geassocieerd met degeneratieve veranderingen in de pees. Deze experimenten kunnen enig inzicht verschaffen in de mechanismen van letsel in verband met repetitieve laden. Ze bieden ook inzicht in de belasting…

Materials

Custom 4 Linear Actuator loading system Warm water bath 50 ml tubes tendons (rabbit) Sterile media