Fabricación de micro-tejidos, utilizando los módulos de gel de colágeno las células que contienen
Summary
Creación de micro-tejidos, utilizando geles de colágeno cilíndricos, llamados módulos, que contienen células incluidas y que la superficie está recubierta de células endoteliales.
Abstract
Este protocolo describe la fabricación de un tipo de micro-tejidos llamados módulos. El concepto de módulo genera tejidos uniforme, escalable y vascularizado. Los módulos pueden ser hechos de colágeno, así como otros materiales gelable o reticulables. Son aproximadamente 2 mm de longitud y 0,7 mm de diámetro en la fabricación, pero disminuye de tamaño con las células incrustado o cuando los módulos están cubiertos con las células endoteliales. Los módulos individuales son tan pequeñas que las células están incrustadas dentro del límite de la difusión de oxígeno y otros nutrientes, pero los módulos se pueden agruparse para formar los tejidos que son más grandes perfusable. Estos tejidos son modulares en la construcción debido a los diferentes tipos de células pueden ser integrados en cubierta o en los módulos antes de que se empaquetan para formar tejidos complejos. Existen tres pasos principales para hacer los módulos de: (1) neutralizar el colágeno y la incrustación de células en el mismo, (2) gelificantes el colágeno en el tubo y corte de los módulos y (3) revestimiento de los módulos con las células endoteliales.
Protocol
Discussion
Hemos fabricado varias diferentes micro-tejidos con módulos integrados con diferentes tipos de células 1.11. Hemos incorporado con éxito los cardiomiocitos primarios, islotes, las células adiposas madre mesenquimales y las células del estroma, así como varias líneas celulares HepG2 incluyendo, NIH 3T3 y clonar las células del hígado 9. Hemos revestido los módulos con varios tipos de células incluyendo las células endoteliales de aorta de rata endoteliales, las células endoteliales de vena umbilic…
Declarações
The authors have nothing to disclose.
Acknowledgements
Materials
| Material Name | Tipo | Company | Catalogue Number | Comment |
|---|---|---|---|---|
| Intramedic tubing PE60 | Becton Dickson | 427416 | Different diameter of tubing can be used to change the diameter of the modules | |
| Phosphate-buffered saline (PBS) | Gibco | 20012-027 | ||
| Trypsin-EDTA | Gibco | 25200-072 | ||
| Purcol acidificed collagen, 3 mg/mL | Cedarlane | 5005-B | ||
| Sodium bicarbonate | Sigma-Aldrich | S5761 | ||
| 20G needle | Becton Dickson | 305175 | Diameter of the needle needs to be similar to the diameter of the tubing | |
| 3 mL syringe | BD Biosciences | 309585 | ||
| 15 mL tube | BD Biosciences | 352096 | ||
| 50 mL tube | BD Biosciences | 352070 | ||
| Convertors Self-Seal Pouch 7 1/2” x 13” | Cardinal Health | 92713 | ||
| 10 ml Wide Tip serological pipet | BD Falcon | 357504 | ||
| 10 ml serological pipet | BD Falcon | 357551 | ||
| 5 ml serological pipet | BD Falcon | 357543 |
Referências
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