評価する<em> in vivoで</em筋肉の疾患の治療的介入の>効果、方法、治療筋肉の力発生や易疲労性を定量するために必要とされる。我々は詳細植したマウスの後肢筋のミオ – 機械的性質を評価するアプローチを。この分析では、筋機能に関する遺伝子改変の影響だけでなく、筋肉の疾患のマウスモデルにおける治療法の比較を定量に強力なアプローチを提供します。
筋肉の疾患1,2,3の治療のための治療的介入の in vivo効果を評価するために、定量的な方法が必要とされているその治療を受けた筋肉の力発生や易疲労性を測定する。我々は、マウスから新鮮な植後肢筋のミオ – 機械的特性を評価するための詳細なアプローチについて説明します。使用して、、そして最大の痙攣と強直性緊張、収縮時間、およびハーフ緩和時間の測定、我々は、筋肉ストリップミオグラフ(デンマークミオテクノロジーモデル820MS)の筋肉を取り付け、マウス指伸筋の筋筋の非外傷性収穫を記述方形パルス刺激(モデルS48、グラス技術)。これらの測定値を使用して、我々は特定のけいれんや筋肉の断面積で正規化強直性張力の計算、筋間の強縮張力の比、力周波数の関係の曲線と低周波の疲労曲線4を示しています。この分析は、筋肉の病気1,2,3,5だけでなく、筋肉の機能6,7,8,9の遺伝的改変の効果の比較のマウスモデルにおいて治療的介入の間に定量的に比較する方法を提供する。
我々は、マウスからの外植後肢筋のミオ – 機械的特性を評価するための詳細なアプローチについて説明します。 EDLは、ために前脛骨筋の後ろに、その後方の位置から解剖することはより困難ながら、その顕著な腱の添付ファイルのために足首と膝の関節に脛骨の前方より評価することが容易です。これらの腱は筋肉のストリップミオグラフで取り付け容易。対照的に、より簡単にアクセスする前脛骨は 、両方の筋肉を損なうことなく解剖し、そしてミオグラフでしっかりとマウントすることは非常に困難に、膝関節で広い、ほとんどatendinous添付ファイルを持っています。我々はまた、急速に生理的緩衝液と温度で酸素浴で筋肉をマウントすることを指摘して筋肉の機械的性質を保持することが不可欠です。我々はこれらの条件の下で筋肉の応答が大幅に変更することなく、最大30分間この分析を繰り返すことができることを見出した。最後に、これが筋機能に悪影響を与える、とミオ機械的な力を過小評価する結果となることができるように筋線維は、解剖や取り付け手順中に触れられないことが不可欠である。これらの手順に従うことにより、この分析は、筋肉の機能6,7,8,9の遺伝的改変の影響だけでなく、筋肉の病気1,2,3,5のマウスモデルにおいて治療的介入との比較を評価するために堅牢な定量的なアプローチを提供。
The authors have nothing to disclose.
この作品は、NHLBIからPEOへの公衆衛生サービスグラント(HL086513)、および再生医療(RC1 – 00104)のためのカリフォルニア工科大学、NHLBIから公衆衛生サービスグラント(HL085377)、およびギフトから包括的な研究助成金によってサポートされていましたポリン財団からHSBへ
SCは、サンフランシスコ州立大学への細胞の研究賞(TB1 – 01194)を食い止めるために再生医療の橋のためにカリフォルニア工科大学によってサポートされていました。
Material Name | Tipo | Company | Catalogue Number | Comment |
5-0 silk sutures | Oasis | MV682 | General surgery | |
Dupont #5 forceps | WPI | 500233 | General surgery | |
Hemostat, straight | WPI | 501241 | General surgery | |
Iris forceps | WPI | 15914 | General surgery | |
Lab Chart software | ADInstruments | Version 7 | Data analysis | |
Muscle Strip Myograph | DMT | 820MS | Tension transduction | |
Operating scissors | WPI | 501754 | General surgery | |
Oscilloscope | EZ | OS-5020 | Tension stimulation | |
Pentobarbital, sodium salt | Sigma | P3761 | Euthanasia | |
PowerLab | ADInstruments | 8/30 | Data acquisition | |
Square Pulse Stimulator | Grass Tech. | S48 | Tension stimulation | |
Vannas spring scissors | WPI | 14003 | General surgery |
Solutions and Media
Lactated Ringer’s solution
Krebs Henseleit solution
Pentobarbital