Drosophila melanogaster testículos puede ser rápida y eficazmente aisladas de los machos adultos el uso de agujas de disección. Con la práctica, uno puede fácilmente aislado en uno o dos días una cantidad de testículos suficiente para el análisis de ADN o ARN mediante la secuenciación de alto rendimiento o los métodos moleculares más tradicionales de biología o de la proteína para los ensayos de anticuerpos o enzimas base.
Los testículos de Drosophila melanogaster proporcionar un importante modelo para el estudio de mantenimiento de las células madre y la diferenciación, la meiosis, y las interacciones soma-la línea germinal. Los testículos están generalmente aisladas de los machos adultos 0-3 días después de la eclosión de la envoltura pupal. Los testículos de moscas de tipo silvestre se distinguen fácilmente de otros tejidos, ya que son de color amarillo, pero los testículos de los blancos moscas mutantes, un fondo genético común para los experimentos de laboratorio son similares en forma y color a la tripa volar. Realizar la disección en un portaobjetos de vidrio con un fondo negro hace que la identificación de los testículos mucho más fácil. Los testículos son removidos de las moscas usando agujas de disección. En comparación con los protocolos que utilizan pinzas de disección de los testículos, nuestro método es mucho más rápido, permitiendo que una persona bien practicado para diseccionar testículos 200 a 300 de tipo salvaje moscas por hora, produciendo 400-600 testículos. Los testículos de la mosca blanca o de mutantes que reducir el tamaño de los testículos son más difíciles de diseccionar y generalmente producen los testículos 200-400 por hora.
Ofrecemos un protocolo para aislar a los testículos de hombres adultos Drosophila melanogaster. Debido a que la técnica requiere la coordinación de una de las dos manos, la habilidad sólo se logra con la práctica.
The authors have nothing to disclose.
Los autores agradecen a Vasia Vagin para la introducción de esta técnica en nuestro laboratorio.
Material Name | Tipo | Company | Catalogue Number | Comment |
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Dissecting needle | Tool | Fisher Scientific | S17346 | |
Micro Slides, Plain | Tool | Fisher Scientific | 12-553 | |
Microscope Light | Tool | Schott-Fostec | KO-1500 | |
CO2 pad | Tool | Genesee Scientific | 59-172 | |
Benchtop Flowbuddy Complete System | Tool | Genesee Scientific | 59-122WCU | |
Bubble Humidifier | Tool | Salter Labs | 7100 | |
Ball filler needle | Tool | Genesee Scientific | 54-119 | |
¾” Label Tape | Supply | Fisher Scientific | 15-901-5B |