Solid פלייט מבוססי הגבלת תזונתיים ב Caenorhabditis elegans</em
Summary
כאן אנו מציגים פרוטוקול לביצוע הגבלה מוצק צלחת מבוססי תזונתיים<em> ג elegans</em> עם חיידקים נהרג.
Abstract
הפחתת צריכת המזון ללא רעב או תת תזונה ידוע להגדיל את תוחלת החיים ואת לעכב את התחלתה של מחלות הקשורות לגיל שונים במגוון רחב של מינים, כולל יונקים. זה גם גורם לירידה במשקל הגוף, פוריות, כמו גם רמות נמוכות של גלוקוז בדם, אינסולין, IGF-1 אצל בעלי חיים אלה. טיפול זה המכונה לעתים קרובות מגבלה תזונתיים (DR) או הגבלה קלורית (CR). Caenorhabditis elegans נמטודות התפתחה אורגניזם מודל חשוב עבור מחקר על הביולוגיה של ההזדקנות. מניפולציות הן סביבתיים וגנטיים שימשו מודל DR ו הראו כדי להאריך את תוחלת החיים ב C. elegans. עם זאת, רבים דיווחו DR מחקרים ב C. elegans נעשו על ידי הפצת חיות בתקשורת נוזלי, בעוד רוב המחקרים הגנטיים בתחום הזדקנות נעשו על אגר מוצק רגיל צלחות פטרי. כאן אנו מציגים פרוטוקול DR באמצעות תקן NGM אגר מוצק מבוססי צלחת עם חיידקים נהרג.
Protocol
Discussion
הגבלה תזונתיים (DR) ידוע להגדיל את תוחלת החיים ואת לעכב את התחלתה של מחלות הקשורות לגיל שונים במגוון רחב של מינים, כולל יונקים 5-7. מניפולציות הן סביבתיים וגנטיים שימשו מודל DR ב C. elegans, כולל תולעים culturing במדיום למחצה מוגדרים נוזל 8,9, דילול של מקור מזון חייד…
Declarações
The authors have nothing to disclose.
Acknowledgements
עבודה זו נתמכה על ידי פרס טייס ממרכז הלם נתן (P30 AG13283) ומענק R01 (R01 AG028516) מן המכון הלאומי להזדקנות (NIA) ל-A-LH
Materials
| Name of the reagent | Company | Catalogue number | Comments |
| Carbenicillin | Duchefa Biochemie | C0109.25 | Dissolved in water. |
| Kanamycin | Roche | 10106801001 | Dissolved in water. |
| Bacto-peptone | Becton, Dickinson and company | DF0118072 | |
| Bacto-tryptone | Becton, Dickinson and company | DF0123075 | |
| Bacto-yeast extract | Becton, Dickinson and company | DF0127071 | |
| Agar | Becton, Dickinson and company | DF00145170 | |
| Sterile culture tube | USA Scientific | 1485-0810 | |
| Spectrophotometer | Amersham Biosciences | Gene Quant pro | Amersham is now part of GE Healthcare. |
| Dissecting Microscope | Zeiss | Stemi 2000 | |
| Centrifuge | Beckman Coulter | Accuspin FR |
Referências
- Hsu, A. L., Murphy, C. T., Kenyon, C. Regulation of aging and age-related disease by DAF-16 and heat-shock factor. Science. 300, 1142-1145 (2003).
- Kenyon, C., Chang, J., Gensch, E., Rudner, A., Tabtiang, R. A C. elegans mutant that lives twice as long as wild type. Nature. 366, 461-464 (1993).
- Apfeld, J., Kenyon, C. Regulation of lifespan by sensory perception in Caenorhabditis elegans. Nature. 402, 804-809 (1999).
- Ching, T. T., Paal, A. B., Mehta, A., Zhong, L., Hsu, A. L. drr-2 encodes an eIF4H that acts downstream of TOR in diet-restriction-induced longevity of C. elegans. Aging Cell. 9, 545-557 (2010).
- Weindruch, R., Walford, R. . The Retardation of Aging and Disease by Dietary Restriction. , (1988).
- Masoro, E. J. Subfield history: caloric restriction, slowing aging, and extending life. Sci Aging Knowledge Environ. , RE2-RE2 (2003).
- Masoro, E. J. Overview of caloric restriction and ageing. Mech Ageing Dev. 126, 913-922 (2005).
- Houthoofd, K. Axenic growth up-regulates mass-specific metabolic rate, stress resistance, and extends life span in Caenorhabditis elegans. Exp Gerontol. 37, 1371-1378 (2002).
- Houthoofd, K. No reduction of metabolic rate in food restricted Caenorhabditis elegans. Exp Gerontol. 37, 1359-1369 (2002).
- Klass, M. R. Aging in the nematode Caenorhabditis elegans: major biological and environmental factors influencing life span. Mech Ageing Dev. 6, 413-429 (1977).
- Bishop, N. A., Guarente, L. Two neurons mediate diet-restriction-induced longevity in C. elegans. Nature. 447, 545-549 (2007).
- Panowski, S. H., Wolff, S., Aguilaniu, H., Durieux, J., Dillin, A. PHA-4/Foxa mediates diet-restriction-induced longevity of C. elegans. Nature. 447, 550-555 (2007).
- Lakowski, B., Hekimi, S. The genetics of caloric restriction in Caenorhabditis elegans. Proc Natl Acad Sci U S A. 95, 13091-13096 (1998).
- Kaeberlein, T. L. Lifespan extension in Caenorhabditis elegans by complete removal of food. Aging Cell. 5, 487-494 (2006).
- Greer, E. L. An AMPK-FOXO pathway mediates longevity induced by a novel method of dietary restriction in C. elegans. Curr Biol. 17, 1646-1656 (2007).
