Summary

Solida piastra a base di restrizioni alimentari, Caenorhabditis elegans</em

Published: May 28, 2011
doi:

Summary

Qui vi presentiamo un protocollo per l'esecuzione di solido piatto a base di restrizioni alimentari,<em> C. elegans</em> Con batteri uccisi.

Abstract

Riduzione del consumo di cibo, senza fame o malnutrizione è conosciuto per aumentare la durata della vita e ritardare l'insorgenza di varie malattie legate a una vasta gamma di specie, tra i mammiferi. Essa provoca anche una diminuzione del peso corporeo e fertilità, così come bassi livelli di glicemia, insulina e IGF-1 in questi animali. Questo trattamento è spesso definito come restrizione dietetica (CD) o restrizione calorica (CR). Il nematode Caenorhabditis elegans è emerso come un organismo importante modello per lo studio della biologia dell'invecchiamento. Entrambe le manipolazioni ambientali e genetici sono stati utilizzati per modellare DR e hanno dimostrato di prolungare la durata della vita in C. elegans. Tuttavia, molti degli studi DR riportato in C. elegans sono stati fatti da animali di propagazione in mezzi liquidi, mentre la maggior parte degli studi genetici nel campo dell'invecchiamento sono stati fatti su l'agar standard di solido in piastre di Petri. Qui vi presentiamo un protocollo DR utilizzando le normali solido NGM agar a base di piastra con batteri uccisi.

Protocol

1. Stabilire una curva di calibrazione per la stima delle concentrazioni di batteri Questa sezione descrive un metodo per la stima della concentrazione di batteri per ogni ceppo dato batteri (ad esempio, OP50, HT115) che verrà utilizzato come fonte di cibo per esperimenti di restrizione dietetica in C. elegans. Curve di calibrazione separati dovrebbero essere stabiliti per ciascun batteri ceppo usato. Inoculare una singola colonia di E. coli OP50 batteri s…

Discussion

Restrizione dietetica (DR) è noto per aumentare la durata della vita e ritardare l'insorgenza di varie malattie legate a una vasta gamma di specie, tra cui i mammiferi 5-7. Entrambe le manipolazioni ambientali e genetici sono stati utilizzati per modellare DR in C. elegans, tra cui vermi coltura in un semi-definita liquido 8,9, diluizione della fonte di cibo batterica in terreno liquido 10-12, e l'uso di mutanti comportamenti che alimentano ad un ritmo più lento 1…

Declarações

The authors have nothing to disclose.

Acknowledgements

Questo lavoro è stato sostenuto da un premio pilota dal Centro Shock Nathan (P30 AG13283) e una borsa di R01 (R01 AG028516) dal National Institute on Aging (NIA) di A.-LH

Materials

Name of the reagent Company Catalogue number Comments
Carbenicillin Duchefa Biochemie C0109.25 Dissolved in water.
Kanamycin Roche 10106801001 Dissolved in water.
Bacto-peptone Becton, Dickinson and company DF0118072  
Bacto-tryptone Becton, Dickinson and company DF0123075  
Bacto-yeast extract Becton, Dickinson and company DF0127071  
Agar Becton, Dickinson and company DF00145170  
Sterile culture tube USA Scientific 1485-0810  
Spectrophotometer Amersham Biosciences Gene Quant pro Amersham is now part of GE Healthcare.
Dissecting Microscope Zeiss Stemi 2000  
Centrifuge Beckman Coulter Accuspin FR  

Referências

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Citar este artigo
Ching, T., Hsu, A. Solid Plate-based Dietary Restriction in Caenorhabditis elegans. J. Vis. Exp. (51), e2701, doi:10.3791/2701 (2011).

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