솔리드 플레이트 기반식이 제한에 Caenorhabditis 엘레간스</em
Summary
여기에 단단한 판 기반식이 제한을 수행하는 프로토콜을 제시<em> C. 엘레간스</em> 죽은 박테리아와 함께.
Abstract
영양 부족이나 기아없이 음식 섭취의 감소가 수명을 증가시키고 포유 동물을 포함한 동물의 광범위한 다양한 연령과 관련된 질병의 발병을 지연하는 것으로 알려져 있습니다. 그것은 또한 체중과 불임의 감소뿐만 아니라 플라즈마 혈당, 인슐린, 이러한 동물의 IGF – 1의 낮은 수준을 초래합니다. 이 치료는 종종식이 제한 (DR) 또는 열량 제한 (CR)이라고합니다. 선충류의 Caenorhabditis의 엘레간스은 노화의 생물학을 공부에 대한 중요한 모델 생물로 등장했다. 환경과 유전 모두 조작이 모델 DR에 사용되고 있으며 C로 수명을 연장 보였습니다 엘레간스. 그러나, C로 보고된 DR 연구의 많은 엘레간스은 노화 분야에서 유전자 연구의 대부분은 배양 접시에서 표준 고체 한천에서 수행하는 동안, 액체 미디어 동물 전파에 의해 수행되었다. 여기 우리는 죽은 박테리아 표준 고체 NGM 한천 기반 판을 사용하여 DR 프로토콜을 제시한다.
Protocol
1. 세균 농도의 추정을위한 보정 곡선을 수립 이 섹션에서는 C로식이 제한 실험을위한 식품 소스로 사용되며 특정 박테리아 스트레인 (예 : OP50, HT115)의 세균 농도의 추정을위한 방법을 설명합니다 엘레간스. 별도의 교정 곡선은 응력이 사용 각각의 세균에 대해 설립해야합니다. E.의 단일 식민지의 예방 대장균 박테리아 OP50 3 ML 액체 LB?…
Discussion
식이 제한 (DR)는 수명을 증가시키고 5-7 포유 동물을 포함한 동물의 다양한 다양한 연령과 관련된 질병의 발병을 지연하는 것으로 알려져 있습니다. 환경과 유전 모두 조작은 C로 모델 DR에 사용되었습니다 세미 정의 액체 매질 8,9, 액체 배지에서 세균성 10-12 음식 소스의 희석하고, 느린 속도 13 행동 돌연변이 해당 피드의 사용 culturing 웜을 포함한 엘레간?…
Declarações
The authors have nothing to disclose.
Acknowledgements
이 작품은 A. – LH에 네이슨 쇼크 센터 (P30 AG13283)과 노화에있는 국립 연구소 (NIA)에서 R01 그랜트 (R01 AG028516)에서 파일럿 수상에 의해 지원되었다
Materials
| Name of the reagent | Company | Catalogue number | Comments |
| Carbenicillin | Duchefa Biochemie | C0109.25 | Dissolved in water. |
| Kanamycin | Roche | 10106801001 | Dissolved in water. |
| Bacto-peptone | Becton, Dickinson and company | DF0118072 | |
| Bacto-tryptone | Becton, Dickinson and company | DF0123075 | |
| Bacto-yeast extract | Becton, Dickinson and company | DF0127071 | |
| Agar | Becton, Dickinson and company | DF00145170 | |
| Sterile culture tube | USA Scientific | 1485-0810 | |
| Spectrophotometer | Amersham Biosciences | Gene Quant pro | Amersham is now part of GE Healthcare. |
| Dissecting Microscope | Zeiss | Stemi 2000 | |
| Centrifuge | Beckman Coulter | Accuspin FR |
Referências
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Citar este artigo
Ching, T., Hsu, A. Solid Plate-based Dietary Restriction in Caenorhabditis elegans. J. Vis. Exp. (51), e2701, doi:10.3791/2701 (2011).