Summary

Cutane leishmaniasis in het dorsale huid van Hamsters: een bruikbaar model voor de screening van antileishmaniale Drugs

Published: April 21, 2012
doi:

Summary

Optimalisatie van de experimentele hamster model voor cutane leishmaniasis door intradermale injectie van<em> Leishmania</em> Promastigoten aan de dorsale huid. Deze aanpak is nuttig tijdens inenting, follow-up, karakterisering van de laesies, toepassing van behandelingen en het verkrijgen van klinische monsters. Locomotion, op zoek naar voedsel en water, zijn spel en sociale activiteiten behouden.

Abstract

Traditioneel worden hamsters experimenteel geïnfecteerd in de snuit of de voetzool. Maar in deze sites niet een zweer altijd optreedt, meting van de laesie grootte is een harde procedure en dieren tonen moeite om te eten, ademen en bewegen vanwege de laesie. Om de hamster model cutane leishmaniasis, jonge volwassen mannelijke en vrouwelijke goudhamsters optimaliseren (Mesocricetus auratus) werden geïnjecteerd aan de dorsale huid met 1 tot 1,5 x l0 7 promastigoten van Leishmania soorten en progressie latere lesies werden geëvalueerd tot 16 weken na infectie. De gouden hamster is gekozen omdat het wordt beschouwd als een adequate bio-model om geneesmiddelen te evalueren tegen Leishmania zoals ze zijn gevoelig voor infectie door verschillende soorten. Cutane infectie van hamsters resulteert in een chronische, maar gecontroleerde laesies, en een klinische evolutie met borden vergelijkbaar met die waargenomen bij de mens. Daarom is de oprichting of de mate van infectie door het meten van de laesie volgens het gebied van verharding en zweren mogelijk is. Deze aanpak heeft zijn veelzijdigheid en eenvoudig beheer bewezen tijdens de inoculatie, follow-up en karakterisering van typische laesies (ulcera), toepassing van behandelingen door middel van verschillende manieren en het verkrijgen van klinische monsters na verschillende behandelingen. Door het gebruik van deze methode de kwaliteit van het dierlijk leven ten aanzien van bewegen, op zoek naar voedsel en water, spel en sociale activiteiten isalso behouden.

Protocol

1. Infectie van hamsters 1. Dieren Inbred vrouwelijke en mannelijke gouden hamsters (Mesocricetus auratus), 6-8 weken, met een gewicht van 140-160 g worden gebruikt. Ze bevinden zich op Dierenverblijf, in geconditioneerd accommodatie toegevoerd standaard knaagdier brokjes en voorzien van water ad libitum. Alle procedures waarbij dieren worden goedgekeurd door de institutionele Ethische Commissie voor experimentele dierproeven. Voor experimentele infe…

Discussion

Cutane leishmaniasis is endemisch in de tropen en Neotropen. Het wordt vaak genoemd als een groep van ziekten als gevolg van de gevarieerde spectrum van klinische verschijnselen, die variëren van kleine cutane noduli en het bruto slijmvliesweefsel vernietiging. De meeste beschikbare geneesmiddelen duur zijn, vereisen lange behandelingen en worden steeds effectief is, noopt de ontdekking van nieuwe geneesmiddelen.

De muismodel wordt algemeen gebruikt, maar heeft enkele nadelen. Zo bijvoorbee…

Declarações

The authors have nothing to disclose.

Acknowledgements

Deze studie werd ondersteund door subsidies van het Comite voor Onderzoek van de Universiteit van Antioquia (Codi), De Colombiaanse Instituut voor de Ontwikkeling van Wetenschap en Technologie – COLCIENCIAS en het Centrum voor de Ontwikkeling van producten tegen tropische ziekten – CIDEPRO.

Materials

Name of the reagent Tipo Company Catalogue number
Ketamine Reagent Holliday –Scott S.A  
Xilacine Reagent Synthesis  
PBS Reagent GIBCO 14190-136
Digital caliper Equipment Fisher 15-077-958
Giemsa Reagent SIGMA GS1L-1L
Formalin Reagent Nova lab 11273
Paraffin Reagent Pechiney Plastic Packaging PM-996
Haemotoxilin Reagent Nova lab 10870103
Eosin   Nova lab 10870203
Kodak Ektachem dry chemistry Equipment Kodak Ektachem DT-60
meglumine antimoniate Reagent Aventis  
Microscopy Equipment Nikon YS2-T

Referências

  1. WHO. Control of the leishmaniasis. Report of a Meeting of the WHO Expert Committee on the Control of Leishmaniasis WHO. 949, (2010).
  2. Titus, R. G., Marchand, M., Boon, T., Louis, J. A. A limiting dilution assay for quantifying Leishmania major in tissues of infected mice. Parasite Immunol. 7, 545-555 (1985).
  3. Reynolds, K. M. The Kodak Ektachem dry layer technology for clinical chemistry. Upsala. J. Med. Sci. 91, 143-146 (1986).
  4. Handman, E., Ceredig, R., Mitchell, G. F. Murine cutaneous leishmaniasis: disease patterns in intact and nude mice of various genotypes and examination of some differences between normal and infected macrophages. Australian J. Exp. Biol. Med. Sci. 57, 9-29 (1979).
  5. Hanson, W., Chapman, W., Waits, V., Lovelace, J. Development of Leishmania (Viannia) panamensis lesions and relationship of numbers of amastigotes to lesion area antimony-treated and untreated hamsters. J. Parasitol. 77, 780-783 (1991).
  6. Henao, H. H., Osorio, Y., Saravia, N. G., Gómez, A., Travi, B. Efficacy and toxicity of pentavalentantimonials (Glucantime and Pentostam) in an American cutaneous leishmaniasis animal model: luminometry application. Biomédica. 24, 393-402 (2004).
  7. Travi, B. L., Martinez, J. E., Zea, A. Antimonial treatment of hamsters infected with Leishmania (Viannia) panamensis: assessment of parasitological cure with different therapeutic schedules. Trans. R. Soc. Trop. Med. Hyg. 87, 567-569 (1993).
  8. Hommel, M., jaffe, C. L., Travi, B., Milon, G. Experimental models for leishmaniasis and for testing anti-leishmanial vaccines. Ann. Trop. Med. Parasitol. 89, 55-73 (1995).
  9. Travi, B. L., Osorio, Y., Saravia, N. G. The inflammatory response promotes cutaneous metastasis in hamsters infected with Leishmania (Viannia) panamensis. J. Parasitol. 82, 454-457 (1996).
  10. Travi, B. L., Osorio, Y. Failure of Albendazole as an alternative treatment of cutaneous Leishmaniasis in the hamster model. Memorias Instituto Oswaldo. 93, 515 (1998).
  11. Travi, B. L., Osorio, Y., Melby, P. C., Chandrasekar, B., Arteaga, L., Saravia, N. G. Gender is a major determinant of the clinical evolution and immune response in hamsters infected with Leishmania spp. Infect Immun. 70, 2288-2296 (2002).
  12. Osorio, Y., Melby, P. C., Pirmez, C., Chandrasekar, B., Guarín, N., Travi, B. L. The site of cutaneous infection influences the immunological response and clinical outcome of hamsters infected with Leishmania panamensis. Parasite Immunol. 25, 139-148 (2003).
  13. Osorio, Y., Bonilla, D. L., Peniche, A. G., Melby, P. C., Travi, B. L. Pregnancy enhances the innate immune response in experimental cutaneous leishmaniasis through hormone-modulated nitric oxide production. J. Leukoc. Biol. 83, 1413-1422 (2008).
  14. Espitia, C. M., Zhao, W., Saldarriaga, O., Osorio, Y., Harrison, L. M., Cappello, M., Travi, B. L., Melby, P. C. Duplex real-time reverse transcriptase PCR to determine cytokine mRNA expression in a hamster model of New World cutaneous leishmaniasis. BMC Immunol. 22, 11-31 (2010).
check_url/pt/3533?article_type=t

Play Video

Citar este artigo
Robledo, S. M., Carrillo, L. M., Daza, A., Restrepo, A. M., Muñoz, D. L., Tobón, J., Murillo, J. D., López, A., Ríos, C., Mesa, C. V., Upegui, Y. A., Valencia-Tobón, A., Mondragón-Shem, K., RodrÍguez, B., Vélez, I. D. Cutaneous Leishmaniasis in the Dorsal Skin of Hamsters: a Useful Model for the Screening of Antileishmanial Drugs. J. Vis. Exp. (62), e3533, doi:10.3791/3533 (2012).

View Video