Kutan Leishmaniasis i Dorsal Skin av Hamstere: en Nyttig Modell for Screening av Antileishmanial narkotika
Summary
Optimalisering av den eksperimentelle hamster modell for kutan leishmaniasis av intradermal injeksjon av<em> Leishmania</em> Promastigotes på dorsal huden. Denne tilnærmingen er nyttig under inokulasjon, oppfølging, karakterisering av lesjoner, anvendelse av behandlinger og innhenting av kliniske prøver. Bevegelse, søker etter mat og vann, er lek og sosiale aktiviteter bevart.
Abstract
Tradisjonelt er hamstere eksperimentelt inokulert i trynet eller footpad. Men i disse områdene en sår ikke alltid skjer, er måling av lesjon størrelse en hard prosedyre og dyr viser problemer med å spise, puste og bevege på grunn av lesjon. For å optimalisere hamster modell for kutan leishmaniasis, ung voksen mann og kvinnelige gylne hamstere (Mesocricetus auratus) ble injisert intradermalt på dorsal huden med 1 til 1,5 x l0 7 promastigotes av Leishmania arter og progresjon av påfølgende lesjonene ble evaluert for inntil 16 uker etter smitte. Den gylne hamster ble valgt fordi det anses tilstrekkelig bio-modell for å evaluere legemidler mot Leishmania som de er utsatt for smitte av ulike arter. Kutan infeksjon av hamstere resulterer i kroniske men kontrollert lesjoner, og en klinisk utvikling med symptomer som ligner på de som er observert hos mennesker. Derfor, etablering of omfanget av smitte ved å måle størrelsen på lesjonen i henhold til området av indurasjon og sår er gjennomførbart. Denne tilnærmingen har vist sin allsidighet og enkel administrasjon under inokulasjon, oppfølging og karakterisering av typiske lesjoner (magesår), anvendelse av behandlinger gjennom ulike måter og innhenting av kliniske prøver etter ulike behandlinger. Ved å bruke denne metoden kvaliteten på dyrelivet om bevegelse, søker etter mat og vann, lek og sosiale aktiviteter isalso bevart.
Protocol
Discussion
Kutan leishmaniasis er endemisk i tropene og neotropics. Det blir ofte referert til som en gruppe av sykdommer på grunn av den varierte spekter av kliniske manifestasjoner, som spenner fra små kutane knuter til brutto slimhinnene vev ødeleggelse. De fleste tilgjengelige medikamenter er kostbare, krever lange behandlingsregimer og blir stadig ineffektivt, nødvendiggjør oppdagelsen av nye legemidler.
Musen Modellen er mye brukt, men har noen ulemper. Dermed for eksempel på grunnlag av le…
Declarações
The authors have nothing to disclose.
Acknowledgements
Denne studien ble støttet med tilskudd fra Utvalget for forskning ved University of Antioquia (CODI), Den colombianske Institutt for utviklingen av vitenskap og teknologi – COLCIENCIAS og Senter for utvikling av produkter mot tropiske sykdommer – CIDEPRO.
Materials
| Name of the reagent | Tipo | Company | Catalogue number |
| Ketamine | Reagent | Holliday –Scott S.A | |
| Xilacine | Reagent | Synthesis | |
| PBS | Reagent | GIBCO | 14190-136 |
| Digital caliper | Equipment | Fisher | 15-077-958 |
| Giemsa | Reagent | SIGMA | GS1L-1L |
| Formalin | Reagent | Nova lab | 11273 |
| Paraffin | Reagent | Pechiney Plastic Packaging | PM-996 |
| Haemotoxilin | Reagent | Nova lab | 10870103 |
| Eosin | Nova lab | 10870203 | |
| Kodak Ektachem dry chemistry | Equipment | Kodak Ektachem | DT-60 |
| meglumine antimoniate | Reagent | Aventis | |
| Microscopy | Equipment | Nikon | YS2-T |
Referências
- WHO. Control of the leishmaniasis. Report of a Meeting of the WHO Expert Committee on the Control of Leishmaniasis WHO. 949, (2010).
- Titus, R. G., Marchand, M., Boon, T., Louis, J. A. A limiting dilution assay for quantifying Leishmania major in tissues of infected mice. Parasite Immunol. 7, 545-555 (1985).
- Reynolds, K. M. The Kodak Ektachem dry layer technology for clinical chemistry. Upsala. J. Med. Sci. 91, 143-146 (1986).
- Handman, E., Ceredig, R., Mitchell, G. F. Murine cutaneous leishmaniasis: disease patterns in intact and nude mice of various genotypes and examination of some differences between normal and infected macrophages. Australian J. Exp. Biol. Med. Sci. 57, 9-29 (1979).
- Hanson, W., Chapman, W., Waits, V., Lovelace, J. Development of Leishmania (Viannia) panamensis lesions and relationship of numbers of amastigotes to lesion area antimony-treated and untreated hamsters. J. Parasitol. 77, 780-783 (1991).
- Henao, H. H., Osorio, Y., Saravia, N. G., Gómez, A., Travi, B. Efficacy and toxicity of pentavalentantimonials (Glucantime and Pentostam) in an American cutaneous leishmaniasis animal model: luminometry application. Biomédica. 24, 393-402 (2004).
- Travi, B. L., Martinez, J. E., Zea, A. Antimonial treatment of hamsters infected with Leishmania (Viannia) panamensis: assessment of parasitological cure with different therapeutic schedules. Trans. R. Soc. Trop. Med. Hyg. 87, 567-569 (1993).
- Hommel, M., jaffe, C. L., Travi, B., Milon, G. Experimental models for leishmaniasis and for testing anti-leishmanial vaccines. Ann. Trop. Med. Parasitol. 89, 55-73 (1995).
- Travi, B. L., Osorio, Y., Saravia, N. G. The inflammatory response promotes cutaneous metastasis in hamsters infected with Leishmania (Viannia) panamensis. J. Parasitol. 82, 454-457 (1996).
- Travi, B. L., Osorio, Y. Failure of Albendazole as an alternative treatment of cutaneous Leishmaniasis in the hamster model. Memorias Instituto Oswaldo. 93, 515 (1998).
- Travi, B. L., Osorio, Y., Melby, P. C., Chandrasekar, B., Arteaga, L., Saravia, N. G. Gender is a major determinant of the clinical evolution and immune response in hamsters infected with Leishmania spp. Infect Immun. 70, 2288-2296 (2002).
- Osorio, Y., Melby, P. C., Pirmez, C., Chandrasekar, B., Guarín, N., Travi, B. L. The site of cutaneous infection influences the immunological response and clinical outcome of hamsters infected with Leishmania panamensis. Parasite Immunol. 25, 139-148 (2003).
- Osorio, Y., Bonilla, D. L., Peniche, A. G., Melby, P. C., Travi, B. L. Pregnancy enhances the innate immune response in experimental cutaneous leishmaniasis through hormone-modulated nitric oxide production. J. Leukoc. Biol. 83, 1413-1422 (2008).
- Espitia, C. M., Zhao, W., Saldarriaga, O., Osorio, Y., Harrison, L. M., Cappello, M., Travi, B. L., Melby, P. C. Duplex real-time reverse transcriptase PCR to determine cytokine mRNA expression in a hamster model of New World cutaneous leishmaniasis. BMC Immunol. 22, 11-31 (2010).
