Chromosomics : 수치과 구조 변경의 탐지는 모두 24 인간의 염색체로 동시에 소설 OctoChrome 생선 분석을 사용
Summary
소설의 형광<em> 현장에서</em> 하이브리드화 (물고기) 동시에 특히 숫자 및 구조 모두 염색체 변경 한 하이브리드화에서 하나의 디바이스에있는 모든 24 인간의 염색체의 백혈병 및 림프종과 관련된 특정 염색체 translocations를 검사 방법은 설명되어 있습니다.
Abstract
원위치 하이브리드화 (물고기)의 형광은 특정 DNA 시퀀스는 세포 핵 1 metaphase이나 계면 염색체를 감지할 수 있도록하는 기법이다. 기술은 전체 염색체 또는 특정 염색체 지역에 잡종을 고유한 시퀀스와 DNA 프로브를 사용하며 고전 cytogenetics에 대한 강력한 보조 역할을합니다. 예를 들어, 많은 이전의 연구는 고전 cytogenetic 분석 2를 사용하여 벤젠 노출, 벤젠 – 중독 환자 및 벤젠에 노출된 건강한 노동자와 관련된 백혈병 환자의 증가 염색체 aberrations의 자주 감지했다. 물고기를 사용하여, 백혈병 특정 염색체 변경은 벤젠 유발 leukemogenesis의 cytogentic 변화의 중요한 역할을 나타내는 벤젠 3-6에 노출 분명히 건강한 노동자로 상승하는 관찰되었습니다.
일반적으로, 하나의 생선 분석은 조사 하나 또는 몇 전체 염색체또는 슬라이드마다 특정 loci, 그래서 여러 hybridizations는 인간의 염색체를 모두 충당하기 위해 여러 슬라이드에 실시해야합니다. 분광 karyotyping (SKY)는 동시에 전체 게놈의 시각화 있지만, 특별한 소프트웨어 및 장비 제한 그 응용 7에 대한 요구 사항을 허용합니다. 여기서는 소설 생선 분석, 우리는 그러한 염색체 전체 aneuploidy 연구와 같은 인간의 연구에서 한 슬라이드에있는 모든 24 인간의 염색체의 동시 분석 (CWAS)로 여기에 정의 Chromosomics에 대해 적용할 수있는 OctoChrome – 물고기, 설명 8. Chromoprobe의 Multiprobe 시스템으로 Cytocell하여 판매 방법의 기초는 세 가지 모든 염색체 페인팅 프로브 (그림 1) 운반 각각 8 사각형으로 나뉘어져 있습니다 OctoChrome 장치입니다. 세 프로브 각각 직접 가지 다른 색의 형광단, 녹색 (FITC), 빨간색 (텍사스 빨강), 파랑 (Coumarin)로 표시됩니다. OctoChrom의 염색체 조합의 정리, T (15, 17), T (8, 21, 전자 장치 인스턴스 t (22 9)에 대해 가장 일반적인 leukemias과 lymphomas에서 발견되지 않은 임의의 구조적 염색체 변경 (translocations)의 식별을 용이하게하도록 설계되었습니다 ), T (14, 18) 9. 또, 염색체의 숫자 변화 (aneuploidy)가 동시에 감지가 가능하다. 해당 템플릿 슬라이드도 metaphase의 확산은 (그림 2) 구속되며, OctoChrome 장치로 배치되는 방향 8 사각형으로 나뉘어져 있습니다. 프로브 및 대상 DNA는 높은 온도와 습기 챔버에 hybridized에 변성이며, 다음 모든 24 인간의 염색체는 동시에 시각이 될 수 있습니다.
OctoChrome 물고기는 백혈병과 림프종의 임상 진단 및 모든 염색체의 aneuploidies의 검출을위한 유망 기술입니다. 우리는 벤젠 노출 중국어 노동자 8,10의 CWAS 연구에서이 새로운 Chromosomic 접근 방식을 적용했습니다.
Protocol
Discussion
이 소설 OctoChrome – 물고기 분석은 하나가 동시에 슬라이드에 하나의 하이브리드화 모두 24 인간의 염색체를 검사 할 수 있습니다. 8 사각형의 염색체 조합의 배치는 가장 일반적인 leukemias과 lymphomas의 비 임의 염색체 rearrangements의 식별을 용이하게하도록 설계되었습니다. 따라서 분석이 동시에 숫자 (aneuploidy)뿐만 아니라 구조적인 (translocations) 염색체 변경 감지할 수 있습니다.
…
Declarações
The authors have nothing to disclose.
Acknowledgements
저자들은 비판적으로 읽고 원고를 편집 박사 Cliona M. 맥헤일을 감사드립니다. 이 작품은 환경 보건 과학, 패 장 건강과 기금 R01ES017452 국립 연구소의 국립 연구소에 의해 재정 지원되었다.
Materials
| Name of the reagent | Company | Catalogue number | Comments (optional) |
| OctoChrome Kit | Cytocell Ltd, Cambridge, UK | PMP 803 | |
| phytohaemagglutinin (PHA) | Invitrogen Corporation | 10576-015 | |
| Colcemid | Invitrogen Corporation | 15212-012 | |
| Carnoy’s fixative | Methanol : glacial acetic acid = 3: 1 | ||
| Fluorescence microscope | Equipped with filters to view DAPI, Texas Red, FITC, and Coumarin spectra individually and a DAPI/FITC/Texas Red triple filter to view different colors simultaneously | ||
| Metafer software | MetaSystems, Altlussheim, Germany | Facilitate to locate all metaphases and to re-evaluate the abnormalities |
Referências
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