Использование Цистометрия в мелких грызунов: исследование мочевого пузыря Chemosensation
Summary
Цистометрия является эффективным методом для оценки функции мочевого пузыря мелких животных<em> В естественных условиях</em>. Мочевой пузырь постоянно переплетаются со скоростью управляется через внутрипузырного катетер, в то время как мочеиспускательный канал остается свободным для мочеиспускания. Это позволяет для повторного наполнения и опорожнения мочевого пузыря, в то время как внутрипузырного давления и объема мочеиспускания записываются.
Abstract
<p class="jove_content"> Нижних мочевых путей (LUT) функционирует как динамический резервуар, который способен хранить мочу и эффективно изгнать его в удобное время. При хранении мочи, однако, мочевого пузыря подвергается в течение длительного времени, чтобы отходы. Действуя как жесткий барьер, эпителиальной выстилки LUT, уротелия, позволяет избежать повторного поглощения вредных веществ. Кроме того, вредные химические вещества стимулируют ноцицептивных иннервации мочевого пузыря и начало мочеиспускания сокращений, которые изгнать содержимое мочевого пузыря. Интересно, что чувствительность мочевого пузыря к вредным химическим веществам успешно применяется в клинической практике, внутрипузырно вливая TRPV1 агонист капсаицина для лечения нейрогенной гиперактивности мочевого пузыря<sup> 1</sup>. Это подчеркивает преимущества просмотра мочевого пузыря, хемосенсорной органов и подсказки для дальнейших клинических исследований. Тем не менее, этические вопросы, серьезно ограничивают возможности для выполнения, у человека, инвазивных измерений, которые необходимы, чтобы разгадать молекулярных основ LUT клинической фармакологии. Способ преодолеть это ограничение является использование нескольких моделей животных<sup> 2</sup>. Здесь мы описываем реализацию цистометрии у мышей и крыс, техника, которая позволяет проводить измерения внутрипузырного давления в условиях контролируемой перфузия мочевого пузыря.</p><p class="jove_content"> После лапаротомии, катетер имплантировали в мочевой пузырь купола и тоннельного подкожно в межлопаточной области. Тогда мочевого пузыря могут быть заполнены с контролируемой скоростью, в то время как мочеиспускательный канал остается свободным для мочеиспускания. Во время повторяющихся циклов наполнения и мочеиспускания, внутрипузырного давления может быть измерена с помощью имплантированного катетера. Таким образом, изменения давления могут быть определены и проанализированы. Кроме того, одновременное измерение объема мочеиспускания позволяет отличительной мочеиспускания сокращений, не являющихся мочеиспускания сокращений<sup> 3</sup>.</p><p class="jove_content"> Важно отметить, что в связи с различиями в мочеиспускании управления грызунов и человека, цистометрической измерений в эти животные имеют лишь ограниченное значение поступательного<sup> 4</sup>. Тем не менее, они весьма важную роль в изучении патофизиологии мочевого пузыря и фармакологии в экспериментальных доклинических настройки. Недавние исследования с помощью этой методики выявило ключевую роль новых молекулярных игроков в механо-и химио-сенсорные свойства мочевого пузыря.</p>
Protocol
1. Лабораторных животных Животных (мышей, крыс) размещаются в специализированном лечебном учреждении животных с 12-час цикле свет-темнота и вволю доступ к воде и стандартных гранул пищи. Оба пола и возраста животных являются важными параметрами, которые должны быть стандартиз…
Discussion
Цистометрии техники, представленные здесь позволяет проводить в естественных условиях измерения функции мочевого пузыря на животных моделях. Крысы являются, вероятно, наиболее часто используемые модели на животных. Мыши сложнее в использовании, но имеют преимущество использова…
Declarações
The authors have nothing to disclose.
Acknowledgements
Эта работа была поддержана грантами от бельгийского федерального правительства (IUAP P6/28), Научно-исследовательский фонд Фландрии (FWO) (G.0565.07 и G.0686.09), Astellas Европейский фонд Award 2009 и Научно-исследовательского совета KU Leuven (GOA 2009/07, EF/95/010 и PFV/10/006). PU и мы научных сотрудников научно-исследовательского фонда Фландрии (FWO). MB является членом Марии Кюри. DDR фундаментальных клинических сотрудник FWO.
Materials
| Name of the reagent | Commercial name, company, | Catalogue number | Comments |
| urethane | Urethane, Sigma-Aldrich | 315419 | group 2B carcinogen |
| isoflurane | Isoba, Schering-Plough Animal Health | ||
| polyethylene catheter | Intramedic Polyethylene tubing PE50, Becton Dickinson | 427411 | |
| surgical microscope | Op-Mi 6, Carl Zeiss | Op-Mi 6 | |
| purse-string suture | Prolene 6/0, Ethicon | 8610H | |
| fascia and skin suture | Ethilon 4/0 or 5/0, Ethicon | 662G or 661G | |
| postoperative analgesics | Temgesic, Schering-Plough Animal Health | dosage for rats: 0.05 mg/kg | |
| amplifier | 78534c monitor, Hewlett Packard | ||
| analytical balances and balance data acquisition software | FZ 300i, A&D | FZ-300i | |
| infusion pumps | pump 33, Harvard apparatus | HA33 | |
| cystometry recording system | Dataq instruments, DI-730 series and Windaq/Lite | DI-730-USB Windaq/Lite | |
| temperature registration | Fluke 52 KJ thermometer | 52 KJ | |
| pressure transducers | Edwards Lifesciences, pressure monitoring set | T322247A |
Referências
- Everaerts, W., Gevaert, T., Nilius, B., De Ridder, D. On the origin of bladder sensing: Tr(i)ps in urology. Neurourol. Urodyn. 27, 264-2673 (2008).
- Fry, C. H. Animal models and their use in understanding lower urinary tract dysfunction. Neurourol. Urodyn. 29, 603-608 (2010).
- Gevaert, T. Deletion of the transient receptor potential cation channel TRPV4 impairs murine bladder voiding. J. Clin. Invest. 117, 3453-3462 (2007).
- Andersson, K. E., Soler, R., Fullhase, C. Rodent models for urodynamic investigation. Neurourol. Urodyn. 30, 636-646 (2011).
- Everaerts, W. Inhibition of the cation channel TRPV4 improves bladder function in mice and rats with cyclophosphamide-induced cystitis. Proc. Natl. Acad. Sci. U.S.A. 107, 19084-19089 (2010).
- Everaerts, W. The capsaicin receptor TRPV1 is a crucial mediator of the noxious effects of mustard oil. Curr. Biol. 21, 316-321 (2011).
- Yoshiyama, M., Roppolo, J. R., Thor, K. B., de Groat, W. C. Effects of LY274614, a competitive NMDA receptor antagonist, on the micturition reflex in the urethane-anaesthetized rat. Br. J. Pharmacol. 110, 77-86 (1993).
- Yoshiyama, M., Roppolo, J. R., de Groat, W. C. Effects of MK-801 on the micturition reflex in the rat–possible sites of action. J. Pharmacol. Exp. Ther. 265, 844-850 (1993).
- Boudes, M. Functional Characterization of a Chronic Cyclophosphamide-Induced Overactive Bladder Model in mice. Neurourol. Urodyn. , (2011).
- Yoshiyama, M. Sex-related differences in activity of lower urinary tract in response to intravesical acid irritation in decerebrate unanesthetized mice. Am. J. Physiol. Regul. Integr. Comp. Physiol. 295, R954-R960 (2008).
- McMahon, S. B., Abel, C. A model for the study of visceral pain states: chronic inflammation of the chronic decerebrate rat urinary bladder by irritant chemicals. Pain. 28, 109-127 (1987).
- Du, S., Araki, I., Yoshiyama, M., Nomura, T., Takeda, M. Transient receptor potential channel A1 involved in sensory transduction of rat urinary bladder through C-fiber pathway. Urology. 70, 826-831 (2007).
- Streng, T., Santti, R., Talo, A. Similarities and differences in female and male rat voiding. Neurourol. Urodyn. 21, 136-141 (2002).
- Igawa, Y. Cystometric findings in mice lacking muscarinic M2 or M3 receptors. J. Urol. 172, 2460-2464 (2004).
- Schroder, A., Newgreen, D., Andersson, K. E. Detrusor responses to prostaglandin E2 and bladder outlet obstruction in wild-type and Ep1 receptor knockout mice. J. Urol. 172, 1166-1170 (2004).
- Chen, Q. Function of the lower urinary tract in mice lacking alpha1d-adrenoceptor. J. Urol. 174, 370-374 (2005).
- May, V., Vizzard, M. A. Bladder dysfunction and altered somatic sensitivity in PACAP-/- mice. J. Urol. 183, 772-779 (2010).
- Thorneloe, K. S., Meredith, A. L., Knorn, A. M., Aldrich, R. W., Nelson, M. T. Urodynamic properties and neurotransmitter dependence of urinary bladder contractility in the BK channel deletion model of overactive bladder. Am. J. Physiol. Renal. Physiol. 289, 604-610 (2005).
Citar este artigo
Uvin, P., Everaerts, W., Pinto, S., Alpízar, Y. A., Boudes, M., Gevaert, T., Voets, T., Nilius, B., Talavera, K., De Ridder, D. The Use of Cystometry in Small Rodents: A Study of Bladder Chemosensation. J. Vis. Exp. (66), e3869, doi:10.3791/3869 (2012).