小型げっ歯類における膀胱内圧測定の使用：膀胱Chemosensationの研究
Summary
膀胱内圧測定では、小動物の膀胱機能を測定するための効率的な手法である<em生体内で></em>。膀胱は、継続的に尿道が排尿のための無料の残っているのに対し、膀胱カテーテルを介して制御された速度で注入されています。これは、膀胱内圧と排尿量が記録されている間、繰り返しのために充填し、膀胱を空にすることができます。
Abstract
<p class="jove_content"尿を格納するために、効率的に都合の良い時に、それを追放することができる動的な貯水池として>下部尿路（LUT）で機能します。尿を保存しながら、しかし、膀胱が廃棄物に長時間さらされている。タイトな障壁として作用することにより、LUTの上皮、尿路上皮には、有害物質の再吸収を避けることができます。また、有害化学物質は、膀胱の神経支配侵害を刺激し、膀胱の内容を追放排尿収縮を開始する。興味深いことに、有害な化学物質への膀胱の感度は膀胱神経因性膀胱の過活動の治療にTRPV1アゴニストカプサイシンを注入することにより、臨床現場で正常に使用されています<sup> 1</sup>。これは、化学感覚器官として膀胱を見ることの利点を強調し、さらに臨床研究のためのプロンプトが表示されます。しかし、倫理的な問題は深刻なヒト被験者は、LUT臨床薬理学の分子基盤を解明するために必要な侵襲的な測定では、実行する可能性を制限する。この限界を克服する方法は、いくつかの動物モデルを使用することである<sup> 2</sup>。ここでは、マウスとラットの膀胱内圧測定、制御された膀胱灌流の条件で膀胱内圧を測定可能にする技術の実装について説明します。</p><p class="jove_content">開腹後、カテーテルを膀胱内に注入し、肩甲間部に皮下にトンネリングされます。尿道は排尿のための無料のままですその後膀胱は、制御された速度で充填することができる。充填と排尿の反復サイクルの間に、膀胱内圧が埋め込まれたカテーテルを介して測定することができます。このように、圧力の変化を定量化して分析することができます。また、排尿量の同時測定により、非排尿収縮を区別排尿収縮<sup> 3</sup>。</p><p class="jove_content">重要なのは、げっ歯類とヒトの間に排尿のコントロールの違いにより、これらの動物におけるcystometric測定は、限られた並進値を持っている<sup> 4</sup>。それにもかかわらず、彼らは実験的な前臨床設定で膀胱の病態生理および薬理学の研究において非常に尽力されています。この手法を用いた最近の研究では、膀胱のメカノと化学感覚特性における新規分子の選手の重要な役割を明らかにした。</p>
Protocol
1。実験動物動物（マウス、ラット）が12時間明暗サイクルと水と標準食物ペレットへの不断のアクセス権を持つ専門の動物施設に収容されています。動物の年齢や性別はどちらもニーズに応じて標準化されるべき重要なパラメータである。 12週齢の雌の動物5,6 -我々は、典型的には10で膀胱内圧測定を行います。 全ての動物実験は、欧州連合コミュニティ協議会?…
Discussion
ここに提示され膀胱内圧測定技術は、動物モデルにおける膀胱機能の in vivo測定で行うことができます。ラットは、おそらく最もよく使われる動物モデルである。マウスのほうが扱いは難しいですが、遺伝子操作された動物を使用することの利点を提供します。なぜなら埋め込まれたカテーテルと膀胱内圧に影響を与える可能性が腹腔内圧力の変化の緩み、その結果非常に活発?…
Declarações
The authors have nothing to disclose.
Acknowledgements
この作品は、ベルギー連邦政府（IUAP P6/28）、研究財団·フランダース（FWO）（G.0565.07とG.0686.09）、アステラス欧州財団賞2009とKU Leuvenの研究評議会からの補助金によって支えられて（GOA 2009/07、EF/95/010とPFV/10/006）。 PUと我々は、研究財団フランダース（FWO）のポスドクです。 MBは、マリー·キュリー·フェローでもある。 DDR FWOの基本的な臨床の仲間。
Materials
| Name of the reagent | Commercial name, company, | Catalogue number | Comments |
| urethane | Urethane, Sigma-Aldrich | 315419 | group 2B carcinogen |
| isoflurane | Isoba, Schering-Plough Animal Health | ||
| polyethylene catheter | Intramedic Polyethylene tubing PE50, Becton Dickinson | 427411 | |
| surgical microscope | Op-Mi 6, Carl Zeiss | Op-Mi 6 | |
| purse-string suture | Prolene 6/0, Ethicon | 8610H | |
| fascia and skin suture | Ethilon 4/0 or 5/0, Ethicon | 662G or 661G | |
| postoperative analgesics | Temgesic, Schering-Plough Animal Health | dosage for rats: 0.05 mg/kg | |
| amplifier | 78534c monitor, Hewlett Packard | ||
| analytical balances and balance data acquisition software | FZ 300i, A&D | FZ-300i | |
| infusion pumps | pump 33, Harvard apparatus | HA33 | |
| cystometry recording system | Dataq instruments, DI-730 series and Windaq/Lite | DI-730-USB Windaq/Lite | |
| temperature registration | Fluke 52 KJ thermometer | 52 KJ | |
| pressure transducers | Edwards Lifesciences, pressure monitoring set | T322247A |
Referências
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Citar este artigo
Uvin, P., Everaerts, W., Pinto, S., Alpízar, Y. A., Boudes, M., Gevaert, T., Voets, T., Nilius, B., Talavera, K., De Ridder, D. The Use of Cystometry in Small Rodents: A Study of Bladder Chemosensation. J. Vis. Exp. (66), e3869, doi:10.3791/3869 (2012).