استعمال قياس المثانة في القوارض الصغيرة: دراسة في Chemosensation المثانة
Summary
قياس المثانة هي تقنية فعالة لقياس وظيفة المثانة من الحيوانات الصغيرة<em> في الجسم الحي</em>. هي التي غرست باستمرار المثانة بمعدلات تسيطر من خلال القسطرة داخل المثانة، في حين يتم ترك مجرى البول مجانا للتبول. وهذا يسمح لتكرار تعبئة وتفريغ المثانة، في حين سجلت الضغط داخل المثانة وحجم البول.
Abstract
<p class="jove_content"> والمسالك البولية السفلية (LUT) يعمل بمثابة خزان الحيوية التي هي قادرة على تخزين البول وطرد بكفاءة في وقت مناسب. أثناء تخزين البول، ومع ذلك، يتعرض المثانة لفترات طويلة لمنتجات النفايات. من خلال العمل كحاجز ضيقة، بطانة الظهارية للLUT، والظهارة البولية، يتجنب إعادة امتصاص المواد الضارة. وعلاوة على ذلك، والمواد الكيميائية الضارة تحفيز الغدد العرقية في المثانة nociceptive والشروع يفرغ محتويات طرد تقلصات التي في المثانة. ومن المثير للاهتمام، وقد استخدم حساسية المثانة على المواد الكيميائية الضارة بنجاح في الممارسة السريرية، عن طريق غرس intravesically على كبخاخات ناهض TRPV1 لعلاج فرط نشاط المثانة العصبية<sup> 1</sup>. وهذا يؤكد ميزة عرض المثانة كجهاز حسي كيميائي ويطالب المزيد من البحوث السريرية. ومع ذلك، القضايا الأخلاقية تحد بشدة من إمكانيات القيام بها، في مواضيع الإنسان، والقياسات الغازية والتي هي ضرورية لكشف الأسس الجزيئية في علم الصيدلة السريرية LUT. وهناك طريقة للتغلب على هذا القيد هو استخدام عدة نماذج حيوانية<sup> 2</sup>. نحن هنا وصف تنفيذ قياس المثانة لدى الفئران والجرذان، وهي تقنية تسمح قياس الضغط داخل المثانة في المثانة شروط نضح للرقابة.</p><p class="jove_content"> بعد فتح البطن، يتم زرع قسطرة في المثانة وقبة نفق تحت الجلد للمنطقة بين الكتفين. ويمكن بعد ذلك أن يملأ المثانة بمعدل رقابة، بينما يترك مجرى البول مجانا للتبول. خلال دورات متكررة من التعبئة ويفرغ، يمكن قياس الضغط داخل المثانة عن طريق القسطرة مزروع. على هذا النحو، يمكن كميا تغيرات الضغط وتحليلها. وعلاوة على ذلك، في وقت واحد قياس لحجم باطلة يسمح المميزة تقلصات يفرغ من تقلصات غير يفرغ<sup> 3</sup>.</p><p class="jove_content"> الأهم من ذلك، لوجود خلافات بين التبول في السيطرة القوارض والبشر، وقياسات cystometric في هذه الحيوانات لها قيمة محدودة فقط متعدية<sup> 4</sup>. ومع ذلك، فهي مفيدة جدا في دراسة الفيزيولوجيا المرضية المثانة والصيدلة في إعدادات ما قبل السريرية التجريبية. أظهرت أبحاث حديثة باستخدام هذه التقنية على الدور الرئيسي للاعبين الجزيئية الرواية في خصائص ميكانو والكيماوي الحسية من المثانة.</p>
Protocol
1. مختبر الحيوانات ويضم الحيوانات (الفئران والجرذان) في منشأة متخصصة الحيوانية مع ضوء الظلام دورة 12-HR والإعلان باستمرار طيلة فترة التجربة الوصول إلى المياه والغذاء الكريات القياسية. كل سن وجنس الحيوانات المعالم ?…
Discussion
تقنية قياس المثانة المقدمة هنا يسمح أداء قياسات الجسم الحي في وظيفة المثانة في النماذج الحيوانية. الفئران هي على الأرجح الأكثر استخداما نموذج حيواني. الفئران هي أكثر صعوبة في التعامل معها، ولكن تقدم ميزة استخدام الحيوانات التلاعب وراثيا. بسبب صعوبة استخدام الت…
Declarações
The authors have nothing to disclose.
Acknowledgements
وأيد هذا العمل من المنح المقدمة من الحكومة الاتحادية البلجيكية (IUAP P6/28)، ومؤسسة أبحاث الفلاندر (FWO) (G.0565.07 وG.0686.09)، وجائزة المؤسسة الأوروبية Astellas 2009 ومجلس البحوث التابع لوفين KU (GOA 2009/07، وEF/95/010 PFV/10/006). PU، ونحن زملاء الدكتوراه من مؤسسة أبحاث الفلاندر (FWO). MB هو زميل ماري كوري. DDR زميل الأساسية السريرية من FWO.
Materials
| Name of the reagent | Commercial name, company, | Catalogue number | Comments |
| urethane | Urethane, Sigma-Aldrich | 315419 | group 2B carcinogen |
| isoflurane | Isoba, Schering-Plough Animal Health | ||
| polyethylene catheter | Intramedic Polyethylene tubing PE50, Becton Dickinson | 427411 | |
| surgical microscope | Op-Mi 6, Carl Zeiss | Op-Mi 6 | |
| purse-string suture | Prolene 6/0, Ethicon | 8610H | |
| fascia and skin suture | Ethilon 4/0 or 5/0, Ethicon | 662G or 661G | |
| postoperative analgesics | Temgesic, Schering-Plough Animal Health | dosage for rats: 0.05 mg/kg | |
| amplifier | 78534c monitor, Hewlett Packard | ||
| analytical balances and balance data acquisition software | FZ 300i, A&D | FZ-300i | |
| infusion pumps | pump 33, Harvard apparatus | HA33 | |
| cystometry recording system | Dataq instruments, DI-730 series and Windaq/Lite | DI-730-USB Windaq/Lite | |
| temperature registration | Fluke 52 KJ thermometer | 52 KJ | |
| pressure transducers | Edwards Lifesciences, pressure monitoring set | T322247A |
Referências
- Everaerts, W., Gevaert, T., Nilius, B., De Ridder, D. On the origin of bladder sensing: Tr(i)ps in urology. Neurourol. Urodyn. 27, 264-2673 (2008).
- Fry, C. H. Animal models and their use in understanding lower urinary tract dysfunction. Neurourol. Urodyn. 29, 603-608 (2010).
- Gevaert, T. Deletion of the transient receptor potential cation channel TRPV4 impairs murine bladder voiding. J. Clin. Invest. 117, 3453-3462 (2007).
- Andersson, K. E., Soler, R., Fullhase, C. Rodent models for urodynamic investigation. Neurourol. Urodyn. 30, 636-646 (2011).
- Everaerts, W. Inhibition of the cation channel TRPV4 improves bladder function in mice and rats with cyclophosphamide-induced cystitis. Proc. Natl. Acad. Sci. U.S.A. 107, 19084-19089 (2010).
- Everaerts, W. The capsaicin receptor TRPV1 is a crucial mediator of the noxious effects of mustard oil. Curr. Biol. 21, 316-321 (2011).
- Yoshiyama, M., Roppolo, J. R., Thor, K. B., de Groat, W. C. Effects of LY274614, a competitive NMDA receptor antagonist, on the micturition reflex in the urethane-anaesthetized rat. Br. J. Pharmacol. 110, 77-86 (1993).
- Yoshiyama, M., Roppolo, J. R., de Groat, W. C. Effects of MK-801 on the micturition reflex in the rat–possible sites of action. J. Pharmacol. Exp. Ther. 265, 844-850 (1993).
- Boudes, M. Functional Characterization of a Chronic Cyclophosphamide-Induced Overactive Bladder Model in mice. Neurourol. Urodyn. , (2011).
- Yoshiyama, M. Sex-related differences in activity of lower urinary tract in response to intravesical acid irritation in decerebrate unanesthetized mice. Am. J. Physiol. Regul. Integr. Comp. Physiol. 295, R954-R960 (2008).
- McMahon, S. B., Abel, C. A model for the study of visceral pain states: chronic inflammation of the chronic decerebrate rat urinary bladder by irritant chemicals. Pain. 28, 109-127 (1987).
- Du, S., Araki, I., Yoshiyama, M., Nomura, T., Takeda, M. Transient receptor potential channel A1 involved in sensory transduction of rat urinary bladder through C-fiber pathway. Urology. 70, 826-831 (2007).
- Streng, T., Santti, R., Talo, A. Similarities and differences in female and male rat voiding. Neurourol. Urodyn. 21, 136-141 (2002).
- Igawa, Y. Cystometric findings in mice lacking muscarinic M2 or M3 receptors. J. Urol. 172, 2460-2464 (2004).
- Schroder, A., Newgreen, D., Andersson, K. E. Detrusor responses to prostaglandin E2 and bladder outlet obstruction in wild-type and Ep1 receptor knockout mice. J. Urol. 172, 1166-1170 (2004).
- Chen, Q. Function of the lower urinary tract in mice lacking alpha1d-adrenoceptor. J. Urol. 174, 370-374 (2005).
- May, V., Vizzard, M. A. Bladder dysfunction and altered somatic sensitivity in PACAP-/- mice. J. Urol. 183, 772-779 (2010).
- Thorneloe, K. S., Meredith, A. L., Knorn, A. M., Aldrich, R. W., Nelson, M. T. Urodynamic properties and neurotransmitter dependence of urinary bladder contractility in the BK channel deletion model of overactive bladder. Am. J. Physiol. Renal. Physiol. 289, 604-610 (2005).
Citar este artigo
Uvin, P., Everaerts, W., Pinto, S., Alpízar, Y. A., Boudes, M., Gevaert, T., Voets, T., Nilius, B., Talavera, K., De Ridder, D. The Use of Cystometry in Small Rodents: A Study of Bladder Chemosensation. J. Vis. Exp. (66), e3869, doi:10.3791/3869 (2012).