O Uso de cistometria em pequenos roedores: Um Estudo de Chemosensation Bexiga
Summary
Cistometria é uma técnica eficiente para medir a função da bexiga em animais de pequeno porte<em> In vivo</em>. A bexiga é infundida continuamente a taxas controladas por meio de um cateter intravesical, ao passo que a uretra é deixado livre para a micção. Isto permite a repetição de enchimento e esvaziamento da bexiga, enquanto a pressão intravesical e volume vazio são gravadas.
Abstract
<p class="jove_content"> As trato urinário inferior (LUT) funciona como um reservatório dinâmico que é capaz de armazenar e urina de forma eficiente expeli-lo em um momento conveniente. Embora o armazenamento da urina, no entanto, a bexiga é exposta por períodos prolongados em produtos residuais. Ao agir como uma barreira forte, o revestimento epitelial da LUT, o urotélio, evita re-absorção de substâncias nocivas. Além disso, os produtos químicos nocivos estimular inervação nociceptiva da bexiga e iniciar a micção contrações que expelem conteúdo da bexiga. É interessante notar que a sensibilidade da bexiga para produtos químicos nocivos tem sido utilizado com sucesso na prática clínica, por infusão intravesical a capsaicina agonista TRPV1 para tratar hiperactividade da bexiga neurogénica<sup> 1</sup>. Isso ressalta a vantagem de ver a bexiga como um órgão chemosensory e pede para a investigação clínica adicional. No entanto, questões éticas limitam seriamente as possibilidades de realizar, em seres humanos, as medidas invasivas que são necessários para desvendar as bases moleculares da farmacologia clínica LUT. Uma forma de ultrapassar esta limitação é a utilização de vários modelos animais<sup> 2</sup>. Aqui descreve-se a aplicação de cistometria em ratinhos e ratos, uma técnica que permite a medição da pressão intravesical, em condições de perfusão controlada bexiga.</p><p class="jove_content"> Após laparotomia, um cateter é implantado na cúpula da bexiga e encapsulado por via subcutânea na região interescapular. Em seguida, a bexiga pode ser enchido a uma velocidade controlada, ao passo que a uretra é deixado livre para a micção. Durante os ciclos repetitivos de enchimento e esvaziamento, a pressão intravesical pode ser medida através do cateter implantado. Como tal, as variações de pressão podem ser quantificados e analisados. Além disso, a medição simultânea do volume anulado permite distinguir contrações esvaziamento de não esvaziamento contrações<sup> 3</sup>.</p><p class="jove_content"> Importante, devido às diferenças no controlo da micção entre roedores e humanos, as medições cistométrica nestes animais tem apenas um valor limitado de translação<sup> 4</sup>. No entanto, eles são muito instrumental no estudo da fisiopatologia da bexiga e em farmacologia pré-clínicos experimentais configurações. Uma pesquisa recente usando esta técnica revelou o papel chave das novas jogadores molecular nas propriedades mecânico-químico-sensoriais e da bexiga.</p>
Protocol
1. Animais de Laboratório Os animais (ratos, ratazanas) estão alojados numa instalação para animais com um especializado 12 horas de ciclo claro-escuro e acesso ad libitum a água e alimentos granulados convencionais. Tanto a idade e sexo do animal, são parâmetros importantes, que devem ser normalizadas, de acordo com as necessidades. Nós normalmente executam cistometria em 10 – 12 semanas de idade fêmeas 5,6. Todos os experimentos com animais são realizadas de acordo co…
Discussion
A técnica aqui apresentada permite cistometria realizar as medições in vivo da função da bexiga em modelos animais. Os ratos são, provavelmente, o modelo animal mais utilizado. Os ratinhos são mais difíceis de manusear, mas oferece a vantagem de utilizar animais geneticamente manipulados. Por causa da dificuldade técnica de usar ratos conscientes, que tendem a ser muito ativos, resultando em afrouxamento do cateter implantado e alterações nas pressões intra-abdominais que podem influenciar …
Declarações
The authors have nothing to disclose.
Acknowledgements
Este trabalho foi suportado por concessões do Governo federal belga (IUAP P6/28), a Fundação de Pesquisa de-Flandres (FWO) (G.0565.07 e G.0686.09), o Prêmio Fundação Europeia Astellas 2009 e do Conselho de Pesquisa da KU Leuven (GOA 2009/07, e EF/95/010 PFV/10/006). PU e WE são bolsistas de doutorado da Fundação de Pesquisa de-Flandres (FWO). MB é um companheiro Marie Curie. DDR companheiro fundamental clínica do FWO.
Materials
| Name of the reagent | Commercial name, company, | Catalogue number | Comments |
| urethane | Urethane, Sigma-Aldrich | 315419 | group 2B carcinogen |
| isoflurane | Isoba, Schering-Plough Animal Health | ||
| polyethylene catheter | Intramedic Polyethylene tubing PE50, Becton Dickinson | 427411 | |
| surgical microscope | Op-Mi 6, Carl Zeiss | Op-Mi 6 | |
| purse-string suture | Prolene 6/0, Ethicon | 8610H | |
| fascia and skin suture | Ethilon 4/0 or 5/0, Ethicon | 662G or 661G | |
| postoperative analgesics | Temgesic, Schering-Plough Animal Health | dosage for rats: 0.05 mg/kg | |
| amplifier | 78534c monitor, Hewlett Packard | ||
| analytical balances and balance data acquisition software | FZ 300i, A&D | FZ-300i | |
| infusion pumps | pump 33, Harvard apparatus | HA33 | |
| cystometry recording system | Dataq instruments, DI-730 series and Windaq/Lite | DI-730-USB Windaq/Lite | |
| temperature registration | Fluke 52 KJ thermometer | 52 KJ | |
| pressure transducers | Edwards Lifesciences, pressure monitoring set | T322247A |
Referências
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Citar este artigo
Uvin, P., Everaerts, W., Pinto, S., Alpízar, Y. A., Boudes, M., Gevaert, T., Voets, T., Nilius, B., Talavera, K., De Ridder, D. The Use of Cystometry in Small Rodents: A Study of Bladder Chemosensation. J. Vis. Exp. (66), e3869, doi:10.3791/3869 (2012).