Küçük Kemirgenler sistometri ve Kullanımı: Mesane Chemosensation Çalışması
Summary
Sistometriler küçük hayvanların mesane fonksiyonu ölçmek için etkili bir tekniktir<em> In vivo</em>. Mesane sürekli idrar işeme için serbest bırakılmalıdır ise, intravezikal kateter yoluyla kontrol fiyatla demlenir. Bu intravezikal basıncı ve işeme hacmi kaydedilir iken, tekrarlayan için doldurma ve mesane boşaltılmasını sağlar.
Abstract
<p class="jove_content"> Idrarı depolamak ve verimli uygun bir anda çıkarmak için güçlü bir dinamik rezervuar olarak alt üriner sistem (AÜS) fonksiyonları. Idrar depolanması sırasında, ancak, mesane atık ürünler için uzun süre maruz kalır. Sıkı bir bariyer gibi hareket ederek, LUT, Ürotelyumun, epitel zarının zararlı maddelerin emilimini önler. Ayrıca, zararlı kimyasallar mesane nosiseptif innervasyon uyarmak ve mesane içeriğini sınırdışı kasılmaları işeme başlatabilir. İlginçtir, zararlı kimyasallar mesane hassasiyeti intravezikal nörojenik mesane aşırı aktivitesi tedavi TRPV1 agonisti kapsaisin beslerken tarafından, klinik pratikte başarıyla kullanılmıştır<sup> 1</sup>. Bu kimyasal duyusal organ olarak mesane görüntüleme avantajı altını çiziyor ve daha ileri klinik araştırmalar için ister. Ancak, etik konular ciddi insan denekler, LUT klinik farmakoloji moleküler temelleri çözülmeye gerekli olan invaziv ölçümler, gerçekleştirmek için olanakları sınırlı. Bu sınırlama üstesinden gelmek için bir yol birkaç hayvan modellerinin kullanımı<sup> 2</sup>. Burada fare ve sıçanlarda sistometri, kontrollü mesane perfüzyon koşullarında intravezikal basıncı ölçmek sağlayan bir tekniğin uygulanmasını açıklar.</p><p class="jove_content"> Laparotomi sonra bir kateter mesane kubbesi implante ve interskapular bölgeye subkutan tünel. Üretra işeme için serbest bırakılırken sonra mesane, kontrollü bir oranda doldurulabilir. Dolum ve işeme tekrarlayan döngüleri sırasında intravezikal basınç implante kateter yoluyla ölçülebilir. Bunun gibi, basınç değişiklikleri belirleyen ve analiz edilebilir. Ayrıca, işeme hacmi aynı anda ölçülmesini sağlar dışı işeme kasılmalar ayırt işeme kasılmalar<sup> 3</sup>.</p><p class="jove_content"> Önemlisi, kemirgenler ve insanlar arasında miksiyon kontrolü farklılıklar nedeniyle, bu hayvanlarda sistometrik ölçümler sadece sınırlı ötelenme değeri<sup> 4</sup>. Yine de, deneysel klinik öncesi ortamlarda mesane patofizyolojisi ve farmakoloji çalışmasında oldukça aracı bulunmaktadır. Bu tekniği kullanarak son araştırmalar mesane Mechano-ve kemo-duyusal özelliklerinde yeni moleküler oyuncuların rol ortaya çıkarmıştır.</p>
Protocol
1. Laboratuvar Hayvanları Hayvanlar (fare, sıçan) 12 saat ışık-karanlık döngüsü, su ve standart gıda granül ad libitum erişimi ile özel bir hayvan tesisi içinde muhafaza edilir. Hayvanların yaş ve cinsiyet Hem ihtiyaçlarına göre standardize edilmelidir önemli parametrelerdir. 12 haftalık dişi hayvanlarda 5,6 – Biz genellikle 10 sistometri gerçekleştirin. Tüm hayvan deneyleri Avrupa Birliği Topluluğu Konseyi kurallarına uygun olarak yürütülen ve yer…
Discussion
Burada sunulan sistometri tekniği hayvan modellerinde mesane fonksiyonu in vivo ölçümleri performans sağlar. Sıçanlar belkide en çok kullanılan hayvan modeli vardır. Fare işlemek için daha zor, ama genetik olarak manipüle hayvanları kullanmanın avantajı sunuyoruz. Çünkü implante kateter ve intravezikal basıncı etkileyebilir karın içi basınç değişiklikleri gevşemesi sonucunda çok aktif olma eğilimi bilinçli fareler kullanarak teknik zorluk, biz tam sistometrisi sırasında üretan …
Declarações
The authors have nothing to disclose.
Acknowledgements
Bu eser Belçika Federal Hükümeti (IUAP P6/28), Araştırma Vakfı-Flanders (FWO) (G.0565.07 ve G.0686.09), Astellas Avrupa Vakfı Ödülü 2009 ve KU Leuven Araştırma Konseyi bağışları ile desteklenmiştir (GOA 2009/07, EF/95/010 ve PFV/10/006). PU ve BİZ Araştırma Vakfı-Flanders (FWO) ve doktora öğrencisinin vardır. MB Marie Curie akademisyendir. FWO DDR temel-klinik fellow.
Materials
| Name of the reagent | Commercial name, company, | Catalogue number | Comments |
| urethane | Urethane, Sigma-Aldrich | 315419 | group 2B carcinogen |
| isoflurane | Isoba, Schering-Plough Animal Health | ||
| polyethylene catheter | Intramedic Polyethylene tubing PE50, Becton Dickinson | 427411 | |
| surgical microscope | Op-Mi 6, Carl Zeiss | Op-Mi 6 | |
| purse-string suture | Prolene 6/0, Ethicon | 8610H | |
| fascia and skin suture | Ethilon 4/0 or 5/0, Ethicon | 662G or 661G | |
| postoperative analgesics | Temgesic, Schering-Plough Animal Health | dosage for rats: 0.05 mg/kg | |
| amplifier | 78534c monitor, Hewlett Packard | ||
| analytical balances and balance data acquisition software | FZ 300i, A&D | FZ-300i | |
| infusion pumps | pump 33, Harvard apparatus | HA33 | |
| cystometry recording system | Dataq instruments, DI-730 series and Windaq/Lite | DI-730-USB Windaq/Lite | |
| temperature registration | Fluke 52 KJ thermometer | 52 KJ | |
| pressure transducers | Edwards Lifesciences, pressure monitoring set | T322247A |
Referências
- Everaerts, W., Gevaert, T., Nilius, B., De Ridder, D. On the origin of bladder sensing: Tr(i)ps in urology. Neurourol. Urodyn. 27, 264-2673 (2008).
- Fry, C. H. Animal models and their use in understanding lower urinary tract dysfunction. Neurourol. Urodyn. 29, 603-608 (2010).
- Gevaert, T. Deletion of the transient receptor potential cation channel TRPV4 impairs murine bladder voiding. J. Clin. Invest. 117, 3453-3462 (2007).
- Andersson, K. E., Soler, R., Fullhase, C. Rodent models for urodynamic investigation. Neurourol. Urodyn. 30, 636-646 (2011).
- Everaerts, W. Inhibition of the cation channel TRPV4 improves bladder function in mice and rats with cyclophosphamide-induced cystitis. Proc. Natl. Acad. Sci. U.S.A. 107, 19084-19089 (2010).
- Everaerts, W. The capsaicin receptor TRPV1 is a crucial mediator of the noxious effects of mustard oil. Curr. Biol. 21, 316-321 (2011).
- Yoshiyama, M., Roppolo, J. R., Thor, K. B., de Groat, W. C. Effects of LY274614, a competitive NMDA receptor antagonist, on the micturition reflex in the urethane-anaesthetized rat. Br. J. Pharmacol. 110, 77-86 (1993).
- Yoshiyama, M., Roppolo, J. R., de Groat, W. C. Effects of MK-801 on the micturition reflex in the rat–possible sites of action. J. Pharmacol. Exp. Ther. 265, 844-850 (1993).
- Boudes, M. Functional Characterization of a Chronic Cyclophosphamide-Induced Overactive Bladder Model in mice. Neurourol. Urodyn. , (2011).
- Yoshiyama, M. Sex-related differences in activity of lower urinary tract in response to intravesical acid irritation in decerebrate unanesthetized mice. Am. J. Physiol. Regul. Integr. Comp. Physiol. 295, R954-R960 (2008).
- McMahon, S. B., Abel, C. A model for the study of visceral pain states: chronic inflammation of the chronic decerebrate rat urinary bladder by irritant chemicals. Pain. 28, 109-127 (1987).
- Du, S., Araki, I., Yoshiyama, M., Nomura, T., Takeda, M. Transient receptor potential channel A1 involved in sensory transduction of rat urinary bladder through C-fiber pathway. Urology. 70, 826-831 (2007).
- Streng, T., Santti, R., Talo, A. Similarities and differences in female and male rat voiding. Neurourol. Urodyn. 21, 136-141 (2002).
- Igawa, Y. Cystometric findings in mice lacking muscarinic M2 or M3 receptors. J. Urol. 172, 2460-2464 (2004).
- Schroder, A., Newgreen, D., Andersson, K. E. Detrusor responses to prostaglandin E2 and bladder outlet obstruction in wild-type and Ep1 receptor knockout mice. J. Urol. 172, 1166-1170 (2004).
- Chen, Q. Function of the lower urinary tract in mice lacking alpha1d-adrenoceptor. J. Urol. 174, 370-374 (2005).
- May, V., Vizzard, M. A. Bladder dysfunction and altered somatic sensitivity in PACAP-/- mice. J. Urol. 183, 772-779 (2010).
- Thorneloe, K. S., Meredith, A. L., Knorn, A. M., Aldrich, R. W., Nelson, M. T. Urodynamic properties and neurotransmitter dependence of urinary bladder contractility in the BK channel deletion model of overactive bladder. Am. J. Physiol. Renal. Physiol. 289, 604-610 (2005).
Citar este artigo
Uvin, P., Everaerts, W., Pinto, S., Alpízar, Y. A., Boudes, M., Gevaert, T., Voets, T., Nilius, B., Talavera, K., De Ridder, D. The Use of Cystometry in Small Rodents: A Study of Bladder Chemosensation. J. Vis. Exp. (66), e3869, doi:10.3791/3869 (2012).