Summary

नैदानिक ​​और Amyotrophic पार्श्व स्केलेरोसिस के लिए एक माउस मॉडल (ए एल एस) में स्पाइनल कॉर्ड को हटाने परीक्षण

Published: March 17, 2012
doi:

Summary

Amyotrophic पार्श्व काठिन्य (ए एल एस) के लिए एक माउस मॉडल चिकित्सकीय और behaviorally जांच की है. एक साथ immunohistological विश्लेषण के लिए एक शर्त के रूप में रीढ़ की हड्डी की तैयारी में विस्तार से दर्शाया जाता है.

Abstract

Amyotrophic पार्श्व काठिन्य (ए एल एस) एक घातक neurodegenerative विकार motoneurons के प्रगतिशील अध: पतन में जिसके परिणामस्वरूप है. चोटी शुरुआत की छिटपुट रोग के लिए और पारिवारिक रोग के लिए 50 साल के आसपास 60 वर्ष के आसपास है. अपनी प्रगतिशील पाठ्यक्रम के कारण रोगियों का 50% लक्षण शुरू होने के 30 महीने के भीतर मर जाते हैं. आदेश में इस रोग के लिए उपन्यास उपचार के विकल्प का मूल्यांकन करने के लिए ALS का आनुवंशिक माउस मॉडल वतन जीन में मानव पारिवारिक SOD1 उत्परिवर्तन (G93A) के रूप में, परिवर्तन के आधार पर उत्पन्न किया गया है. सबसे महत्वपूर्ण पहलू है कि मॉडल में मूल्यांकन किया जाना है समग्र अस्तित्व, नैदानिक ​​पाठ्यक्रम और मोटर समारोह कर रहे हैं. यहाँ, हम नैदानिक ​​मूल्यांकन का प्रदर्शन, दो व्यवहार मोटर के परीक्षण के प्रवाहकत्त्व दिखा और सभी मापदंडों के लिए मात्रात्मक स्कोरिंग प्रणाली प्रदान करते हैं. क्योंकि ए एल एस माउस मॉडल का गहराई से विश्लेषण में एक आम तौर पर रीढ़ की हड्डी के एक immunohistochemical परीक्षा के की आवश्यकता है, हम करते हैं लागू करने के विस्तार में अपनी तैयारी का प्रदर्शनrsal laminectomy विधि. अनुकरणीय ऊतकीय निष्कर्ष प्रदर्शन कर रहे हैं. ए एल एस के माउस मॉडल पर अध्ययन में दर्शाया परीक्षा तरीकों की व्यापक आवेदन के शोधकर्ता मज़बूती से भविष्य चिकित्सकीय विकल्प है जो बाद में मानव नैदानिक ​​परीक्षण के लिए एक आधार प्रदान कर सकते हैं परीक्षण करने के लिए सक्षम हो जाएगा.

Protocol

पशु जैक्सन प्रयोगशाला (002,726) एक से खरीदे गए थे. वे नैदानिक ​​और रन बनाए हैं और मोटर समारोह (rotarod परीक्षण) और मांसपेशियों की शक्ति (तार परीक्षण लटका) के परीक्षण के अधीन है. बहुत करीब पशु प्रयोगों के समुचित ?…

Discussion

SOD1 (G93A) आनुवंशिक माउस मॉडल प्रगतिशील motoneuron मानव amyotrophic पार्श्व काठिन्य 8 के लिए बराबर के झड़ने की बीमारी के पाठ्यक्रम का अध्ययन करने के लिए एक मूल्यवान जानवर मॉडल है. अलग उपचार मानदंड की एक किस्म इस मॉडल म?…

Declarações

The authors have nothing to disclose.

Acknowledgements

LT गौटिंगेन विश्वविद्यालय के चिकित्सा की Forschungsförderungsprogramm से अनुदान का समर्थन प्राप्त हुआ है. पी एल और एमबी (CMPB) मस्तिष्क, गौटिंगेन की आण्विक फिजियोलॉजी के लिए DFG अनुसंधान केंद्र द्वारा समर्थित थे. लेखक वीडियोग्राफी और Birgit Liebau के साथ ऑडियो और वीडियो संपादन के साथ मदद के लिए सहायता के लिए डॉ. लार्स Tatenhorst धन्यवाद.

Materials

  Manufacturer Ordering Information
Behavioral testing    
Rota-Rod for Mice Ugo Basile, Comerio, Italy # 47600
Hanging wire device Custom-made  
 
Spinal Cord Preparation    
Operation Table
Operation lamp
Protective gloves
   
“Iris” Scissors, angled to side Fine Science Tools, Heidelberg, Germany 14063-09
Cohan-Vannas Spring Scissors, straight Fine Science Tools, Heidelberg, Germany 15000-10
Micro forceps Hammacher, Solingen, Germany HWC 111-10
Scalpel “präzisa plus” Dahlhausen, Köln, Germany 11.000.00.510, FIG 10

Referências

  1. Gurney, M. E. Motor neuron degeneration in mice that express a human Cu, Zn superoxide dismutase mutation. Science. 264 (5166), 1772-1775 (1994).
  2. Weydt, P. Assessing disease onset and progression in the SOD1 mouse model of ALS. Neuroreport. 14 (7), 1051-1054 (2003).
  3. Crawley, J. N. Behavioral phenotyping strategies for mutant mice. Neuron. 57 (6), 809-818 (2008).
  4. Miana-Mena, F. J. Optimal methods to characterize the G93A mouse model of ALS. Amyotroph. Lateral Scler. Other Motor Neuron Disord. 6 (1), 55-62 (2005).
  5. Zhong, Z. Activated protein C therapy slows ALS-like disease in mice by transcriptionally inhibiting SOD1 in motor neurons and microglia cells. J. Clin. Invest. 119 (11), 3437-3449 (2009).
  6. Pitzer, C. Granulocyte-colony stimulating factor improves outcome in a mouse model of amyotrophic lateral sclerosis. Brain. 131 (Pt. 12), 3335-3347 (2008).
  7. Gowing, G. Ablation of proliferating microglia does not affect motor neuron degeneration in amyotrophic lateral sclerosis caused by mutant superoxide dismutase. J. Neurosci. 28 (41), 10234-10244 (2008).
  8. Scott, S. interpretation of studies in the standard murine model of ALS. Amyotroph Lateral Scler. 9 (1), 4-15 (2008).
  9. Turner, B. J., Talbot, K. Transgenics, toxicity and therapeutics in rodent models of mutant SOD1-mediated familial ALS. Prog Neurobiol. 85 (1), 94-134 (2008).
  10. Corse, A. M. Preclinical testing of neuroprotective neurotrophic factors in a model of chronic motor neuron degeneration. Neurobiol Dis. 6 (5), 335-346 (1999).
  11. Knippenberg, S. Significance of behavioural tests in a transgenic mouse model of amyotrophic lateral sclerosis (ALS). Behav Brain Res. 213 (1), 82-87 (2010).
  12. Burgess, R. W., Cox, G. A., Seburn, K. L. Neuromuscular disease models and analysis. Methods Mol. Biol. 602, 347-393 (2010).
  13. Hayworth, C. R., Gonzalez-Lima, F. Pre-symptomatic detection of chronic motor deficits and genotype prediction in congenic B6.SOD1(G93A) ALS mouse model. Neurociência. 164 (3), 975-985 (2009).
  14. Ludolph, A. C. Guidelines for preclinical animal research in ALS/MND: A consensus meeting. Amyotroph Lateral Scler. 11 (1-2), 38-45 (2010).
  15. Boillee, S. Onset and progression in inherited ALS determined by motor neurons and microglia. Science. 5778 (3), 1389-1392 (2006).
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Citar este artigo
Günther, R., Suhr, M., Koch, J. C., Bähr, M., Lingor, P., Tönges, L. Clinical Testing and Spinal Cord Removal in a Mouse Model for Amyotrophic Lateral Sclerosis (ALS). J. Vis. Exp. (61), e3936, doi:10.3791/3936 (2012).

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