Klinisch onderzoek en het ruggenmerg verwijderen in een muismodel voor Amyotrofische Lateraal Sclerose (ALS)
Summary
Een muismodel voor amyotrofische lateraal sclerose (ALS) is klinisch en gedragsmatig onderzocht. Als voorwaarde voor een begeleidende immunohistologische analyse de voorbereiding van het ruggenmerg wordt afgebeeld in detail.
Abstract
Amyotrofische lateraal sclerose (ALS) is een fatale neurodegeneratieve aandoening die leidt tot progressieve degeneratie van motoneuronen. Piek van aanvang is ongeveer 60 jaar voor de sporadische ziekte en rond de 50 jaar voor de familiale ziekte. Door zijn progressieve koers, 50% van de patiënten overlijdt binnen 30 maanden na de aanvang van de symptomen. Om nieuwe behandeling voor deze ziekte evalueren zijn genetische muismodellen van ALS is gegenereerd op basis van menselijke familiale mutaties in SOD gen, zoals SOD1 (G93A) mutatie. De belangrijkste aspecten die moeten worden geëvalueerd in het model zijn de totale overleving, klinisch beloop en motorische functies. Hier hebben we de klinische evaluatie aan te tonen, tonen de geleiding van twee gedrags-motortesten en zorgen voor kwantitatieve scoringssystemen voor alle parameters. Omdat een grondige analyse van de ALS-muismodel meestal vereist een immunohistochemische onderzoek van het ruggenmerg, tonen we aan de voorbereiding tot in detail de toepassing van het doenrsal laminectomie methode. Voorbeeldige histologische bevindingen worden aangetoond. De uitgebreide toepassing van de afgebeelde onderzoeksmethoden in studies naar het muismodel van ALS in staat zal stellen de onderzoeker om op betrouwbare wijze te testen toekomstige therapeutische opties die basis voor de latere klinische proeven op mensen kan bieden.
Protocol
Discussion
De SOD1 (G93A) genetische muis-model is een waardevolle diermodel voor de ziekte loop van de progressieve motoneuron verlies te vergelijken met de menselijke amyotrofische laterale sclerose 8 te bestuderen. Een verscheidenheid aan verschillende behandeling paradigma's zijn geëvalueerd in dit model en vormen een basis voor de latere testen in menselijke klinische studies 8-10. Om te kunnen grote verschillen in een experimentele behandeling onderzoek bij deze muizen te detecteren, is van groot b…
Declarações
The authors have nothing to disclose.
Acknowledgements
LT heeft ontvangen subsidies van de Forschungsförderungsprogramm van de Universiteit Geneeskunde Göttingen. PL en MB werden gesteund door de DFG Research Centrum voor Moleculaire Fysiologie van de hersenen (CMPB), Göttingen. De auteurs danken dr. Lars Tatenhorst voor hulp bij het videografie en Birgit Liebau voor hulp bij het audio-en videobewerking.
Materials
| Manufacturer | Ordering Information | |
| Behavioral testing | ||
| Rota-Rod for Mice | Ugo Basile, Comerio, Italy | # 47600 |
| Hanging wire device | Custom-made | |
| Spinal Cord Preparation | ||
| Operation Table Operation lamp Protective gloves |
||
| “Iris” Scissors, angled to side | Fine Science Tools, Heidelberg, Germany | 14063-09 |
| Cohan-Vannas Spring Scissors, straight | Fine Science Tools, Heidelberg, Germany | 15000-10 |
| Micro forceps | Hammacher, Solingen, Germany | HWC 111-10 |
| Scalpel “präzisa plus” | Dahlhausen, Köln, Germany | 11.000.00.510, FIG 10 |
Referências
- Gurney, M. E. Motor neuron degeneration in mice that express a human Cu, Zn superoxide dismutase mutation. Science. 264 (5166), 1772-1775 (1994).
- Weydt, P. Assessing disease onset and progression in the SOD1 mouse model of ALS. Neuroreport. 14 (7), 1051-1054 (2003).
- Crawley, J. N. Behavioral phenotyping strategies for mutant mice. Neuron. 57 (6), 809-818 (2008).
- Miana-Mena, F. J. Optimal methods to characterize the G93A mouse model of ALS. Amyotroph. Lateral Scler. Other Motor Neuron Disord. 6 (1), 55-62 (2005).
- Zhong, Z. Activated protein C therapy slows ALS-like disease in mice by transcriptionally inhibiting SOD1 in motor neurons and microglia cells. J. Clin. Invest. 119 (11), 3437-3449 (2009).
- Pitzer, C. Granulocyte-colony stimulating factor improves outcome in a mouse model of amyotrophic lateral sclerosis. Brain. 131 (Pt. 12), 3335-3347 (2008).
- Gowing, G. Ablation of proliferating microglia does not affect motor neuron degeneration in amyotrophic lateral sclerosis caused by mutant superoxide dismutase. J. Neurosci. 28 (41), 10234-10244 (2008).
- Scott, S. interpretation of studies in the standard murine model of ALS. Amyotroph Lateral Scler. 9 (1), 4-15 (2008).
- Turner, B. J., Talbot, K. Transgenics, toxicity and therapeutics in rodent models of mutant SOD1-mediated familial ALS. Prog Neurobiol. 85 (1), 94-134 (2008).
- Corse, A. M. Preclinical testing of neuroprotective neurotrophic factors in a model of chronic motor neuron degeneration. Neurobiol Dis. 6 (5), 335-346 (1999).
- Knippenberg, S. Significance of behavioural tests in a transgenic mouse model of amyotrophic lateral sclerosis (ALS). Behav Brain Res. 213 (1), 82-87 (2010).
- Burgess, R. W., Cox, G. A., Seburn, K. L. Neuromuscular disease models and analysis. Methods Mol. Biol. 602, 347-393 (2010).
- Hayworth, C. R., Gonzalez-Lima, F. Pre-symptomatic detection of chronic motor deficits and genotype prediction in congenic B6.SOD1(G93A) ALS mouse model. Neurociência. 164 (3), 975-985 (2009).
- Ludolph, A. C. Guidelines for preclinical animal research in ALS/MND: A consensus meeting. Amyotroph Lateral Scler. 11 (1-2), 38-45 (2010).
- Boillee, S. Onset and progression in inherited ALS determined by motor neurons and microglia. Science. 5778 (3), 1389-1392 (2006).
