Klinisk testning och ryggmärg Avlägsnande av en musmodell för amyotrofisk lateralskleros (ALS)
Summary
En musmodell för amyotrofisk lateralskleros (ALS) undersöks kliniskt och beteendemässigt. Som en förutsättning för en medföljande immunhistologisk analys beredningen av ryggmärgen visas i detalj.
Abstract
Amyotrofisk lateral skleros (ALS) är en dödlig neurodegenerativ sjukdom resulterar i progressiv degeneration av motoneuroner. Peak of debut är cirka 60 år för sporadisk sjukdomen och cirka 50 år för familjär sjukdomen. Tack vare sin progressiva kurs 50% av patienterna dör inom 30 månader efter symtomdebut. För att utvärdera nya behandlingsalternativ för denna sjukdom har genetiska musmodeller av ALS tagits fram baserat på mänskliga familje mutationer i SOD-genen, såsom SOD1 (G93A) mutation. De viktigaste aspekter som måste utvärderas i modellen är total överlevnad, kliniskt förlopp och motorisk funktion. Här visar vi den kliniska utvärderingen visar ledning av två beteendemässiga motoriska tester och ge kvantitativa poängsystem för alla parametrar. Eftersom en fördjupad analys av ALS musmodell kräver vanligen en immunhistokemisk undersökning av ryggmärgen, visar vi beredningen i detalj tillämpa göraRsal laminektomi metod. Exempel på histologiska fynd demonstreras. Den omfattande tillämpning av de avbildade undersökningsmetoder i studier på mus modell av ALS gör det möjligt för forskare att tillförlitligt testa framtida terapeutiska alternativ som kan ge en grund för senare kliniska försök.
Protocol
Discussion
Den SOD1 (G93A) genetiska musmodell är en värdefull djurmodell för att studera sjukdomsförloppet progressiva motoneuron förluster kan jämföras med människans amyotrofisk lateral skleros 8. En mängd olika behandlingsmetoder paradigm har utvärderats i denna modell och utgör en grund för senare testning i humana kliniska studier 8-10. För att kunna detektera signifikanta skillnader i en experimentell behandling studie i dessa möss, är det av yttersta vikt att omfatta minst 24 kull-match…
Declarações
The authors have nothing to disclose.
Acknowledgements
LT har fått bidrag stöd från Forschungsförderungsprogramm universitetets Medicin Göttingen. PL och MB stöddes av DFG Research Center för Molekylär fysiologi av hjärnan (CMPB), Göttingen. Författarna tackar Dr Lars Tatenhorst för hjälp med videography och Birgit Liebau för hjälp med ljud och videoredigering.
Materials
| Manufacturer | Ordering Information | |
| Behavioral testing | ||
| Rota-Rod for Mice | Ugo Basile, Comerio, Italy | # 47600 |
| Hanging wire device | Custom-made | |
| Spinal Cord Preparation | ||
| Operation Table Operation lamp Protective gloves |
||
| “Iris” Scissors, angled to side | Fine Science Tools, Heidelberg, Germany | 14063-09 |
| Cohan-Vannas Spring Scissors, straight | Fine Science Tools, Heidelberg, Germany | 15000-10 |
| Micro forceps | Hammacher, Solingen, Germany | HWC 111-10 |
| Scalpel “präzisa plus” | Dahlhausen, Köln, Germany | 11.000.00.510, FIG 10 |
Referências
- Gurney, M. E. Motor neuron degeneration in mice that express a human Cu, Zn superoxide dismutase mutation. Science. 264 (5166), 1772-1775 (1994).
- Weydt, P. Assessing disease onset and progression in the SOD1 mouse model of ALS. Neuroreport. 14 (7), 1051-1054 (2003).
- Crawley, J. N. Behavioral phenotyping strategies for mutant mice. Neuron. 57 (6), 809-818 (2008).
- Miana-Mena, F. J. Optimal methods to characterize the G93A mouse model of ALS. Amyotroph. Lateral Scler. Other Motor Neuron Disord. 6 (1), 55-62 (2005).
- Zhong, Z. Activated protein C therapy slows ALS-like disease in mice by transcriptionally inhibiting SOD1 in motor neurons and microglia cells. J. Clin. Invest. 119 (11), 3437-3449 (2009).
- Pitzer, C. Granulocyte-colony stimulating factor improves outcome in a mouse model of amyotrophic lateral sclerosis. Brain. 131 (Pt. 12), 3335-3347 (2008).
- Gowing, G. Ablation of proliferating microglia does not affect motor neuron degeneration in amyotrophic lateral sclerosis caused by mutant superoxide dismutase. J. Neurosci. 28 (41), 10234-10244 (2008).
- Scott, S. interpretation of studies in the standard murine model of ALS. Amyotroph Lateral Scler. 9 (1), 4-15 (2008).
- Turner, B. J., Talbot, K. Transgenics, toxicity and therapeutics in rodent models of mutant SOD1-mediated familial ALS. Prog Neurobiol. 85 (1), 94-134 (2008).
- Corse, A. M. Preclinical testing of neuroprotective neurotrophic factors in a model of chronic motor neuron degeneration. Neurobiol Dis. 6 (5), 335-346 (1999).
- Knippenberg, S. Significance of behavioural tests in a transgenic mouse model of amyotrophic lateral sclerosis (ALS). Behav Brain Res. 213 (1), 82-87 (2010).
- Burgess, R. W., Cox, G. A., Seburn, K. L. Neuromuscular disease models and analysis. Methods Mol. Biol. 602, 347-393 (2010).
- Hayworth, C. R., Gonzalez-Lima, F. Pre-symptomatic detection of chronic motor deficits and genotype prediction in congenic B6.SOD1(G93A) ALS mouse model. Neurociência. 164 (3), 975-985 (2009).
- Ludolph, A. C. Guidelines for preclinical animal research in ALS/MND: A consensus meeting. Amyotroph Lateral Scler. 11 (1-2), 38-45 (2010).
- Boillee, S. Onset and progression in inherited ALS determined by motor neurons and microglia. Science. 5778 (3), 1389-1392 (2006).
