骨转移模型
Summary
经常用来研究癌症骨转移动物模型。在这个协议中，我们将介绍两种常见的方法接种肿瘤骨转移研究，并简要介绍了一些用来监测和量化这些模型的分析。
Abstract
骨转移是一种常见的恶性肿瘤，包括乳腺癌，前列腺癌和肺癌的发生。一旦成立于骨，肿瘤有显着的发病率和死亡率1。因此，是一种显着的需要理解在骨的肿瘤的建立，生长和活性的分子机制控制。 体内模型中，已经建立了几个研究这些事件，每个人都有特定的优点和局限性。最常用的模型利用心内接种肿瘤细胞直接进入动脉血液供应的无胸腺（裸）BalbC小鼠。此过程可以应用到许多不同类型的肿瘤（包括PC-3前列腺癌，肺癌，和小鼠乳腺脂肪垫肿瘤），然而，在这最后，我们将重点对乳腺癌模型，MDA-MB-231。在这个模型中，我们利用骨高度选择性的克隆，最初来自曼迪博士的研究小组在圣安东尼奥2，即H转GFP的表达和克隆我们的第3组。克隆是骨转移的变体，具有高的osteotropism率和很少转移到肺，肝，肾上腺。虽然心内注射是最常见的用于研究的骨转移，在某些情况下intratibial 4或乳腺脂肪垫注射是比较合适的。腔内注射时使用的人类肿瘤细胞的目标监测的后期阶段的转移，特别是逮捕骨，生存，增殖，并建立发展成癌性骨骼疾病的肿瘤，癌细胞的能力。 intratibial注射如果侧重于肿瘤后，已转移到骨，这大致既定转移性骨病相关的癌症细胞和骨的关系进行。这些模型概括都不在转移过程中的早期步骤之前栓塞和入境进入血液循环的肿瘤细胞。如果要监控从原发部位的骨原发肿瘤的生长或转移，乳腺脂肪垫接种通常是首选;然而，极少数肿瘤细胞株将一如既往地转移到骨骼，从主站点，与4T1的骨优惠克隆的，一个小鼠乳腺癌，除5,6。
这手稿细节接种程序，并强调在接种后分析的关键步骤。具体来说，它包括细胞培养，心内和intratibial接种的肿瘤细胞接种程序，以及通过X-射线，荧光和组织形态计量学分析的简要信息，关于每周监测。
Protocol
Discussion
骨肿瘤引起的疾病的研究依赖于几种动物模型，其中最常用的两种心内和intratibial的接种。在许多情况下，研究转移到骨，心内是最好的选择，但是，它并不能代表整个转移过程，为了实现这一目标，因此，乳腺脂肪垫或其他原位注射，最好应使用。肿瘤细胞不容易在大多数研究中使用人类细胞从原发部位转移，如果是的话，他们主要转移到肺部。一些菌株的4T1细胞转移到骨5,6，但病变体…
Declarações
The authors have nothing to disclose.
Acknowledgements
作者承认以下资金来源：P01CA040035（FE / JAS）和VA职业发展奖（JAS）。
Materials
| Name of the reagent | Company | Catalogue number |
| MDA-MB-231 human breast cancer cells | Originally ATCC-Internally cloned and selected | |
| DMEM | GIBCO | 11885 |
| PBS | Mediatech Inc | 21-040-CV |
| FBS | Atlas Biological | F-0050a |
| Trypsin | GIBCO | 15400 |
| Faxitron | Faxitron | |
| Maestro | CRi | |
| μCT scanner | Scanco | |
| Athymic Nude Mice | Harlan | Fox nu -/- |
| Insulin Syringes (300 μl, 28.5 g) | Becton Dickinson | 309300 |
| IVIS | Caliper | |
| Irradiated Rodent Diet | Teklad | 2920x |
Referências
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