Aortica trapianto ortotopico in Mouse per lo studio della malattia vascolare
Summary
Descriviamo una tecnica in cui viene trapiantato una sezione dell'aorta addominale di un topo ortotopicamente a appena sotto le arterie renali di un destinatario allogenici o singenici. Questa tecnica può essere utile in studi in cui si considera il trapianto di grandi arterie di dimensioni uniformi vantaggiosa.
Abstract
Procedure vascolari coinvolgono anastomosi nel topo sono generalmente considerati difficili e fortemente dipendente dalla abilità del chirurgo individuale. Questo è in gran parte vero, ma ci sono un certo numero di principi importanti che possono ridurre la difficoltà di queste procedure e migliorare la riproducibilità. Trapianto ortotopico aortica è una procedura eccellente per imparare questi principi perché si tratta di solo due end-to-end anastomosi, ma richiede una buona tecnica di sutura e la gestione delle navi per il successo costante. Questa procedura inizia con l'acquisto di una lunghezza dell'aorta addominale da un donatore, seguita dalla divisione della aorta nativa nel ricevente. L'aorta procurato viene poi collocato tra le estremità divise dell'aorta destinatario e suturato in posizione usando end-to-end anastomosi. Per raggiungere questo obiettivo richiede con successo un elevato grado di concentrazione, buoni strumenti, una mano ferma e un apprezzamento di quanto facilmente ilvascolare di un mouse può essere danneggiato, causando trombosi. Imparare questi importanti principi è quello che occupa la maggior parte del tempo il principiante quando si impara microchirurgia in piccoli roditori. In questo protocollo, si fa riferimento a questi punti importanti. Questo modello può essere usato per studiare la malattia vascolare in una varietà di differenti sistemi sperimentali 1-8. Nel contesto qui illustrato, è più spesso utilizzato per lo studio di post-trapianto malattia vascolare, una comune complicanza a lungo termine del trapianto di organo solido in cui iperplasia intimale si verifica all'interno del allotrapianto. Il vantaggio principale del modello è che facilita quantitative analisi morfometriche e la nave trapiantato giace contigua alla nave endogeno, che può servire come un ulteriore controllo 9. La tecnica qui illustrato è più spesso utilizzato per i topi pesano 18-25 grammi. Abbiamo accumulato la maggior parte della nostra esperienza con il C57BL/6J, BALB / CJ, e ceppi C3H/HeJ.
Protocol
Representative Results
Discussion
Modelli murini di trapianto aortica forniscono una serie di vantaggi poiché i topi sono molto ben definiti immunogenetically 9,12,13, e possono essere facilmente manipolati per alterare l'espressione di geni specifici, se desiderato. Come accennato nell'introduzione, chirurgia vascolare nel topo è più difficile che maggior parte dei modelli a causa delle dimensioni delle navi. Anche i grandi arterie, come l'aorta sono di solito non più di 100-200 micron di diametro interno, così manipolando q…
Declarações
The authors have nothing to disclose.
Acknowledgements
Questo lavoro è stato finanziato dalla risorsa di base del P30 NIH O'Brien centro (DK 079337).
Materials
| Item | Company | Catalog No. |
| Vascular Clamps | Fine Science Tools | 00396-01 (Size B-1) |
| Dumont Forceps | Fine Science Tools | 11293-00 |
| 10-0 Needled microsuture | AROSurgical | TK-107038 |
| Straight scissors | Roboz Surgical Instrument Co. | RS-5620 |
| Low temperature cauterizer | Beaver-Visitec International | 8441000 |
| Self retaining retractor | World Precision Instruments | 14240 |
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