Un modèle de souris induite par laser de l'hypertension oculaire chronique pour caractériser les défauts d'apparence

Summary

Hypertension oculaire chronique est induite en utilisant la photocoagulation au laser du trabéculum dans les yeux de souris. La pression intraoculaire (PIO) est élevée pendant plusieurs mois après le traitement au laser. La diminution de l'acuité visuelle et la sensibilité au contraste des animaux expérimentaux sont surveillés en utilisant le test optomoteur.

Abstract

Le glaucome, souvent associé à une pression intraoculaire (PIO) élevée, est l'une des principales causes de cécité. Nous avons cherché à établir un modèle de souris de l'hypertension oculaire pour imiter haute tension humaine glaucome. Ici illumination laser est appliqué sur le limbe cornéen à photocoagulate l'écoulement aqueux, induisant fermeture de l'angle. Les variations de pression intraoculaire sont surveillés à l'aide d'un tonomètre à rebond avant et après le traitement au laser. Un test de comportement optomoteur est utilisé pour mesurer les changements correspondants dans la capacité visuelle. Le résultat représentatif d'une souris qui a développé élévation de la PIO soutenue après l'illumination laser est affiché. Une diminution de l'acuité visuelle et la sensibilité au contraste est observé dans ce oculaire souris hypertensive. Ensemble, notre étude introduit un système modèle intéressant d'étudier la dégénérescence neuronale et les mécanismes moléculaires sous-jacents chez les souris glaucomateux.

Protocol

Procédures C57BL/6J souris (Jackson Laboratory, Bar Harbor, ME) sont portées à la Facilité de protection des animaux de l'Université Northwestern. Tous les animaux sont utilisés conformément aux protocoles approuvés par Northwestern University Institutional Animal Care et du Comité de l'utilisation et conforme aux lignes directrices sur l'utilisation des animaux en recherche en neurosciences du NIH. 1. La photocoagulation au laser <p class="jo…

Representative Results

Comme décrit dans les procédures, illumination laser est dirigé vers le trabéculum dans la région limbique à photocoagulate l'écoulement aqueux, provoquant la fermeture de l'angle (figure 1). La plupart des yeux sérigraphiés au laser ne présentaient pas de dommages physiques importants, le détachement de pigment ou d'une infection, en accord avec les résultats antérieurs 6. Quand un petit groupe de souris (moins de 5% de tous les animaux sérigraphiés au laser) a mon…

Discussion

Nous rapportons ci-dessus que l'hypertension oculaire soutenue peut être induite par illumination laser dans les yeux de souris. Par rapport au modèle d'injection saline ¹⁸ et le modèle de cautérisation de la veine ¹¹ qui exigent tous deux de vastes compétences de microchirurgie, l'illumination laser est relativement simple et facile à réaliser. Habituellement, nous pouvons réaliser l'illumination laser pour 4-6 souris dans 2-3 heures. Les étapes essentielles pour atteindre…

Materials

			Reagent
moxifloxacin	Alcon Labs, Inc.	NDC 0065-4013-03	0.5 %, Rx only
Proparacaine Hydrochloride	Bausch & Lomb	NDC 24208-730-06	0.5 %, Rx only
Ophthalmic Solution USP	Bausch & Lomb	NDC 24208-730-06	.5 %, Rx only
ketamine	Butler Schein Animal Health	NDC 11695-0550-1	100 mg / kg
xylazine	LLOYD Inc. of Iowa	NADA 139-236	10 mg / kg
atropine sulfate solution	Alcon Labs, Inc.	NDC 61314-303-02	1 %, Rx only
			Equipment
Slit Lamp, TOPCON	Visual Systems Inc	SL-3E	powered by PS-30A
OptoMotry 1.8.0 virtual	CerebralMechanics Inc.
opto-kinetic testing system	CerebralMechanics Inc.
Tonometer, TonoLab, for mice	Colonial Medical Supply
Heating pad	Sunbeam Products Inc	722-810
Argon laser	Coherent Inc	Ultima 2000SE
DECAPICONE Plastic cone holder	Braintree Sci Inc.	MDC-200	for mouse