Summary

نموذج الفأر الليزر التي يسببها ارتفاع ضغط الدم المزمن المقلة لتوصيف العيوب البصرية

Published: August 14, 2013
doi:

Summary

ويتسبب ارتفاع ضغط الدم المزمن العين باستخدام الليزر الضوئي من الشبكة التربيقية في عيون الماوس. هو ارتفاع ضغط العين (IOP) لعدة أشهر بعد العلاج بالليزر. ويتم رصد انخفاض حدة البصر وحساسية النقيض من حيوانات التجارب باستخدام اختبار optomotor.

Abstract

الزرق، ويرتبط في كثير من الأحيان مع ارتفاع ضغط العين (IOP)، هي واحدة من الأسباب الرئيسية للعمى. سعينا إلى إنشاء نموذج الفأر من فرط ضغط العين لتقليد الإنسان التوتر العالي الزرق. هنا يتم تطبيق إضاءة الليزر إلى حوف القرنية إلى photocoagulate تدفق مائي، الأمر الذي أدى إغلاق زاوية. ويتم رصد التغيرات في معهد جامعة هارفارد باستخدام مقياس توتر العين انتعاش قبل وبعد العلاج بالليزر. يتم استخدام اختبار السلوكية optomotor لقياس التغيرات المناظرة في القدرة البصرية. يظهر نتيجة ممثل من الماوس واحد التي وضعت حقت IOP الارتفاع بعد إضاءة الليزر. ويلاحظ وجود انخفاض حدة البصر وحساسية التباين في هذه العين الماوس ارتفاع ضغط الدم. معا، ويدخل دراستنا نظام نموذجا قيما للتحقيق تنكس الخلايا العصبية والآليات الجزيئية الكامنة في الفئران زرقي.

Protocol

الإجراءات تثار C57BL/6J الفئران (مختبر جاكسون، بار هاربور، ME) في منشأة رعاية الحيوان جامعة نورث وسترن. وتستخدم كل الحيوانات وفقا للبروتوكولات المعتمدة من جامعة نورث وسترن المؤسسي رعاية الحيوان واللجنة الاستخدام ومطابقة للمبادئ التو?…

Representative Results

كما هو موضح في الإجراءات، ويهدف إضاءة الليزر في الشبكة التربيقية في المنطقة الحوفي إلى photocoagulate تدفق مائي، الأمر الذي أدى إغلاق زاوية (الشكل 1). عيون معظم lasered عرضت قوع أضرار مادية كبيرة، مفرزة الصباغ أو عدوى، بما يتفق مع النتائج السابقة 6. عندما قامت مجم?…

Discussion

نحن التقرير المذكور أن فرط ضغط العين المستمر يمكن أن يتسبب من خلال إضاءة الليزر في عيون الماوس. بالمقارنة مع نموذج الحقن بالمحلول الملحي 18 ونموذج الكي الوريد 11 وكلاهما تتطلب مهارات المجهرية واسعة، وإضاءة الليزر هو بسيط نسبيا وسهلة لتنفيذ. وعادة ما يمكن أ?…

Declarações

The authors have nothing to disclose.

Acknowledgements

وقد تم دعم العمل الواردة في هذه الورقة من قبل دوغلاس جائزة الدكتور H. جونسون لأبحاث الزرق من مؤسسة الصحة الأمريكية المساعدة (XL)، وجائزة الباحث غريف الخاص وليام وماري من البحوث للوقاية من العمى (XL)، في جمعية إلينوي للوقاية من العمى (HC) والمعاهد الوطنية للصحة منح R01EY019034 (XL).

Materials

Reagent
moxifloxacin Alcon Labs, Inc. NDC 0065-4013-03 0.5 %, Rx only
Proparacaine Hydrochloride Bausch & Lomb NDC 24208-730-06 0.5 %, Rx only
Ophthalmic Solution USP Bausch & Lomb NDC 24208-730-06 .5 %, Rx only
ketamine Butler Schein Animal Health NDC 11695-0550-1 100 mg / kg
xylazine LLOYD Inc. of Iowa NADA 139-236 10 mg / kg
atropine sulfate solution Alcon Labs, Inc. NDC 61314-303-02 1 %, Rx only
Equipment
Slit Lamp, TOPCON Visual Systems Inc SL-3E powered by PS-30A
OptoMotry 1.8.0 virtual CerebralMechanics Inc.
opto-kinetic testing system CerebralMechanics Inc.
Tonometer, TonoLab, for mice Colonial Medical Supply
Heating pad Sunbeam Products Inc 722-810
Argon laser Coherent Inc Ultima 2000SE
DECAPICONE Plastic cone holder Braintree Sci Inc. MDC-200 for mouse

Referências

  1. Gupta, N., Yucel, Y. H. Glaucoma as a neurodegenerative disease. Curr. Opin. Ophthalmol. 18, 110-114 (2007).
  2. Quigley, H. A. Neuronal death in glaucoma. Prog. Retin. Eye Res. 18, 39-57 (1999).
  3. McKinnon, S. J., Schlamp, C. L., Nickells, R. W. Mouse models of retinal ganglion cell death and glaucoma. Experimental Eye Research. 88, 816-824 (2009).
  4. Pang, I. H., Clark, A. F. Rodent models for glaucoma retinopathy and optic neuropathy. J. Glaucoma. 16, 483-505 (2007).
  5. Levkovitch-Verbin, H., et al. Translimbal laser photocoagulation to the trabecular meshwork as a model of glaucoma in rats. Investigative Ophthalmology & Visual Science. 43, 402-410 (2002).
  6. Aihara, M., Lindsey, J. D., Weinreb, R. N. Experimental mouse ocular hypertension: establishment of the model. Investigative Ophthalmology & Visual Science. 44, 4314-4320 (2003).
  7. Grozdanic, S. D. Laser-induced mouse model of chronic ocular hypertension. Investigative ophthalmology & visual science. 44, 4337-4346 (2003).
  8. Sappington, R. M., Carlson, B. J., Crish, S. D., Calkins, D. J. The microbead occlusion model: a paradigm for induced ocular hypertension in rats and mice. Investigative ophthalmology & visual science. 51, 207-216 (2010).
  9. Ding, C., Wang, P., Tian, N. Effect of general anesthetics on IOP in elevated IOP mouse model. Experimental Eye Research. 92, 512-520 (2011).
  10. Kalesnykas, G., et al. Retinal ganglion cell morphology after optic nerve crush and experimental glaucoma. Investigative Ophthalmology & Visual Science. 53, 3847-3857 (2012).
  11. Shareef, S. R., Garcia-Valenzuela, E., Salierno, A., Walsh, J., Sharma, S. C. Chronic ocular hypertension following episcleral venous occlusion in rats. Experimental Eye Research. 61, 379-382 (1995).
  12. Chiu, K., Chang, R., So, K. F. Laser-induced chronic ocular hypertension model on SD rats. J. Vis. Exp. (10), e549 (2007).
  13. Fu, C. T., Sretavan, D. Laser-induced ocular hypertension in albino CD-1 mice. Investigative Ophthalmology & Visual Science. 51, 980-990 (2010).
  14. Rangarajan, K. V. Detection of visual deficits in aging DBA/2J mice by two behavioral assays. Curr. Eye Res. 36, 481-491 (2011).
  15. Wang, L., et al. Direction-specific disruption of subcortical visual behavior and receptive fields in mice lacking the beta2 subunit of nicotinic acetylcholine receptor. J. Neurosci. 29, 12909-12918 (2009).
  16. Douglas, R. M., et al. Independent visual threshold measurements in the two eyes of freely moving rats and mice using a virtual-reality optokinetic system. Visual Neuroscience. 22, 677-684 (2005).
  17. Prusky, G. T., Alam, N. M., Beekman, S., Douglas, R. M. Rapid quantification of adult and developing mouse spatial vision using a virtual optomotor system. Investigative Ophthalmology & Visual Science. 45, 4611-4616 (2004).
  18. Morrison, J. C., et al. A rat model of chronic pressure-induced optic nerve damage. Experimental Eye Research. 64, 85-96 (1997).
  19. Cone, F. E., et al. The effects of anesthesia, mouse strain and age on intraocular pressure and an improved murine model of experimental glaucoma. Experimental Eye Research. 99, 27-35 (2012).
  20. Liu, X., et al. Brain-derived neurotrophic factor and TrkB modulate visual experience-dependent refinement of neuronal pathways in retina. J. Neurosci. 27, 7256-7267 (2007).
  21. Liu, X., et al. Regulation of neonatal development of retinal ganglion cell dendrites by neurotrophin-3 overexpression. The Journal of Comparative Neurology. 514, 449-458 (2009).
  22. Sun, W., Li, N., He, S. Large-scale morphological survey of mouse retinal ganglion cells. The Journal of Comparative Neurology. 451, 115-126 (2002).
  23. Feng, L., et al. Sustained Ocular Hypertension Induces Dendritic Degeneration of Mouse Retinal Ganglion Cells that Depends on Cell-type and Location. Investigative Ophthalmology & Visual Science. , (2013).
check_url/pt/50440?article_type=t

Play Video

Citar este artigo
Feng, L., Chen, H., Suyeoka, G., Liu, X. A Laser-induced Mouse Model of Chronic Ocular Hypertension to Characterize Visual Defects. J. Vis. Exp. (78), e50440, doi:10.3791/50440 (2013).

View Video