Non invasive Intratrachéal intubation pour étudier la pathologie et la physiologie des souris poumon

Summary

L'utilisation d'un modèle qui reproduit l'état de maladies pulmonaires chez les humains est essentielle pour l'étude de la pathophysiologie et / ou de l'étiologie d'une maladie particulière et pour développer une intervention thérapeutique. Voici une méthode d'intubation trachéale non invasive qui peut directement livrer les matériaux exogènes aux poumons de souris est présentée.

Abstract

L'utilisation d'un modèle qui reproduit l'état de maladies pulmonaires chez les humains est essentielle pour l'étude de la pathophysiologie et / ou de l'étiologie d'une maladie particulière et pour développer une intervention thérapeutique. Avec la disponibilité croissante de knock-out et transgéniques dérivés, avec une grande quantité d'information génétique, les souris offrent l'un des meilleurs modèles pour étudier les mécanismes moléculaires qui sous-tendent la pathologie et la physiologie des maladies pulmonaires. Inhalation, l'instillation intranasale, instillation intratrachéale, et l'intubation trachéale sont les techniques les plus couramment utilisées par un certain nombre de chercheurs pour administrer des matériaux d'intérêt pour les poumons de souris. Il ya des avantages et des inconvénients de chaque technique en fonction des objectifs de l'étude. Voici une méthode d'intubation trachéale non invasive qui peut directement livrer les matériaux exogènes aux poumons de souris est présentée. Cette technique a été appliquée à administrer de la bléomycine poumons de souris en tant que modèle pour l'étude de la fibrose pulmonaire. </ P>

Introduction

Poumon est un organe où de nombreuses maladies dévastatrices sont généralement diagnostiqués. Parmi eux, le cancer du poumon est le deuxième cancer le plus diagnostiqué chez les hommes et les femmes, et la cause la plus fréquente de décès par cancer. Maladie pulmonaire obstructive chronique, également connu sous l'emphysème et la bronchite chronique, une maladie très grave et la troisième cause de décès aux Etats-Unis. En 2011, il a été estimé que 25,9 millions d'Américains avaient l'asthme, y compris 7,1 millions d'enfants de moins de 18 ans. L'asthme est la troisième cause d'hospitalisation chez les enfants de moins de 15 ans (American Lung Association, http://www.lung.org ). Afin d'étudier la physiopathologie et / ou l'étiologie de ces maladies dévastatrices et leurs mécanismes sous-jacents, l'utilisation de modèles précis est essentiel, en liaison avec l'administration pratique et non invasif de divers matériaux d'intérêt pour les poumons. Souris offrent l'un des meilleurs modèles deétudier les mécanismes moléculaires qui sous-tendent la pathologie et la physiologie des maladies pulmonaires en raison de la disponibilité croissante des huitièmes de finale et des souris transgéniques et une grande quantité d'informations génétiques disponibles.

Diverses méthodes ont été utilisées par un certain nombre de chercheurs dans différents contextes pour livrer le matériel d'intérêt pour les poumons de souris, y compris l'inhalation, l'instillation intranasale, instillation intratrachéale, et l'intubation trachéale ^1-4. Cette dernière procédure n'a pas été utilisée en routine car il est considéré comme assez difficile à réaliser. Intubation intratrachéale décrite ici est une méthode non invasive, simple et rapide pour livrer les matériaux d'intérêt pour les poumons de souris afin d'étudier l'effet des matériaux livrés sur les profils d'expression génique, la pathologie et / ou la physiologie de poumon ^5. Cette technique assure la livraison de matériaux exogènes à un ensemble de poumon et n'implique pas une intervention chirurgicale de survie et donc sera likely être approuvé par les comités de protection des animaux et l'utilisation institutionnels.

Protocol

Le protocole suivant décrit une méthode non invasive, simple et rapide pour livrer les matériaux d'intérêt pour les poumons de souris. Cette procédure a été approuvée par le Comité de protection et d'utilisation des animaux par l'Institut national du cancer. Une. Anesthésie Tout d'abord, anesthésier la souris en utilisant un mélange de kétamine et de xylazine (100 mg / kg de poids corporel et 10 mg / kg de poids corporel, respectivement). C'est le…

Representative Results

Initialement, solution vert-teinte a été utilisé pour intuber les souris pour la pratique. Le poumon a été réséquée immédiatement après l'intubation pour examiner le degré d'uniformité de la couleur a été distribué dans les poumons (Figure 2). Cette technique a été appliquée à l'étude de la fibrose pulmonaire induite par la bléomycine en utilisant souris C57BL / 6. Lorsque les souris ont été intubés par voie intratrachéale avec 1,2 U / kg de bléomycine ou de solutio…

Discussion

Intubation intratrachéale décrit ici est une méthode non invasive simple, mais excellente pour fournir uniformément des matériaux d'intérêt pour les poumons de souris. Cette méthode permet l'étude de l'effet et / ou le rôle de la substance administrée sur la physiologie et / ou pathologie de cancer du poumon. Les matériaux administrés peuvent être des molécules endogènes tels que les cytokines, ou des matériaux exogènes tels que les produits chimiques xénobiotiques / médicaments, les subs…

Materials

KetaVed	Vedco		Ketamine
AnaSed Injection 20 mg	LLOYD		Xylazine
BioLite Stand	Braintree Scientific	RIS100	For mice
BioLite Intubation Illumination System	Braintree Scientific	BIO MI-KIT	For mice
22 G, 1 inch i.v. catheter	Terumo	SR-OX2225CA	For mice below 30 g. Catheter is used only for the case where the Intubation Illumination System is not used.
			or
20 G, 1 inch i.v. catheter	Terumo	SR-OX2025CA	For mice over 30 g. Catheter is used only for the case where the Intubation Illumination System is not used.
			Catheter is used only for the case where the Intubation Illumination System is not used