Clonagem molecular é um conjunto de métodos, que são usados para inserir DNA recombinante em um vetor – um portador de moléculas de DNA que replicará fragmentos de DNA recombinantes em organismos hospedeiros. O fragmento de DNA, que pode ser um gene, pode ser isolado de um espécime procariótico ou eucariótico. Após o isolamento do fragmento de interesse, ou inserir, tanto o vetor quanto a inserção devem ser cortados com enzimas de restrição e purificados. As peças purificadas são unidas através de uma técnica chamada ligadura. A enzima que catalisa a reação de ligadura é conhecida como ligadura.
Este vídeo explica os principais métodos que são combinados, em conjunto, para compor o procedimento global de clonagem molecular. Aspectos críticos da clonagem molecular são discutidos, como a necessidade de estratégia de clonagem molecular e como acompanhar colônias bacterianas transformadas. Também são mencionadas etapas de verificação, como a verificação do plasmídeo purificado para a presença de inserção com digestões de restrições e sequenciamento.
Procedimento
Clonagem molecular é um conjunto de técnicas usadas para inserir DNA recombinante de uma fonte procariótica ou eucariótica em um veículo replicante, como plasmídeos ou vetores virais. Clonagem refere-se a fazer numerosas cópias de um fragmento de DNA de interesse, como um gene. Neste vídeo você aprenderá sobre as diferentes etapas da clonagem molecular, como configurar o procedimento e diferentes aplicações dessa técnica. Pelo menos duas moléculas importantes de DNA são nec…