L’un des nombreux avantages de l’utilisation de la levure comme système modèle est que de grandes quantités de biomacromolécules comprenant les acides nucléiques (ADN et ARN) peuvent être purifiées à partir de cultures cellulaires.
Cette vidéo portera sur les étapes requises pour effectuer une extraction d’acides nucléiques. Nous commencerons par donner un bref aperçu de la culture, de la récolte et de la lyse de cellules de levure qui sont les étapes initiales communes à l’isolation de toute biomacromolécule. Nous discuterons ensuite de deux méthodes de purification propres à la séparation d’acides nucléiques : la colonne d’affinité et la séparation de phase. Nous présenterons également plusieurs applications de ces méthodes en laboratoire, notamment la préparation d’acides nucléiques pour les techniques de biologie moléculaire comme la PCR et le Southern blot, la quantification de l’expression de gènes en réponse à des stimuli environnementaux, et la purification de grandes quantités de protéines recombinantes.
Procedimento
Aujourd’hui, nous allons vous présenter la façon de purifier des acides nucléiques à partir de la Saccharomyces cerevisiae, également connue comme levure de boulanger. Les acides nucléiques peuvent inclure l’ADN et l’ARN. Cette vidéo discutera de l’isolation de ces molécules à partir des cellules de levure par séparation de phase et chromatographie.. Bien qu’il existe de nombreuses méthodes de purification des acides nucléiques de la levure, la plupart de ce…