Inducida por la quimioterapia Vascular Toxicidad - En tiempo real<em> En vivo</em> Imagen de Deterioro del buque
Summary
We herein describe the method of fibered confocal fluorescent microscopy (FCFM) based imaging, which provides an innovative mode to understand physiological phenomena at the cellular and sub-cellular levels in animal subjects.
Abstract
Ciertas clases de quimioterapia pueden ejercer cambios vasculares agudos que pueden progresar en condiciones a largo plazo que pueden predisponer al paciente a un mayor riesgo de morbilidad vascular. Sin embargo, aunque la evidencia clínica de montaje, hay una escasez de estudios claros de toxicidad vascular y por lo tanto la etiología de un grupo heterogéneo de trastornos cardiovasculares vasculares / queda por esclarecer. Además, el mecanismo que puede ser la base de toxicidad vascular puede diferir completamente de los principios de la cardiotoxicidad inducida por la quimioterapia, que se relaciona para dirigir la lesión de los miocitos. Hemos establecido un tiempo real, vivo plataforma de imágenes molecular para evaluar el potencial de toxicidad vascular aguda de terapias contra el cáncer.
Hemos puesto en marcha una plataforma de in vivo, de alta resolución de imagen molecular en ratones, adecuado para la visualización de la vasculatura dentro de los órganos confinados y blo de referenciavasos DO dentro de los mismos individuos, mientras que cada individuo sirven como su propio control. Paredes de los vasos sanguíneos se deterioran después de la administración de doxorrubicina, lo que representa un mecanismo único de la toxicidad vascular que puede ser el evento temprano en la lesión de órganos diana. En esto, el método de creación de imágenes basada Fibered microscopía confocal de fluorescencia (FCFM) se describe, que proporciona un modo innovador para entender los fenómenos fisiológicos a nivel celular y subcelular en sujetos animales.
Introduction
La evidencia clínica indica que varias clases de quimioterapias producen una variedad de patologías vasculares manifestados por el fenómeno de Raynaud, hipertensión, con infarto de miocardio, ataque cerebrovascular y hepática veno-occlusivedisease 1,2. "Fármacos antiangiogénicos 'accidental'" es un término bastante nuevo, que describe agentes quimioterapéuticos convencionales que actúan como posibles inhibidores de la angiogénesis, aunque no desarrollaron originalmente para este propósito 3-5 pero diseñados para eliminar células tumorales mediante la imposición de tan poco "garantía daño "a las células normales como sea posible 3. Varios quimioterapias se han implicado como vasculo-tóxicos como se ha observado en estudios clínicos utilizando biomarcadores séricos. Entre ellos están los agentes (como la ciclofosfamida), compuestos de platino (como cisplatino) y antraciclinas 1,2,5-7 alquilantes.
Complicaciones cardiovasculares agudas pueden ocurrir como result de la toxicidad vascular inducida por la quimioterapia. Ellos pueden progresar en condiciones crónicas como la aterosclerosis y representan mayor riesgo de morbilidad vascular tarde. Sin embargo, a pesar de la creciente evidencia clínica, hay una escasez de estudios designados enfatizando el mecanismo de toxicidad vascular y, por tanto, mayor esclarecimiento de la patogenia exacta que infligen se justifica.
Un reto importante en el descubrimiento del mecanismo de toxicidad vascular inducida por la quimioterapia se deriva de la complejidad de la investigación de la función vascular en vivo. Se describe en este documento una plataforma de alta resolución pt imagen molecular in vivo en ratones que permite capturar el flujo sanguíneo y características del buque. Esta plataforma facilita la detección de efectos vasculares directos inducidos por el tratamiento: en tiempo real, así como después de ellos durante un período de tiempo dentro de los mismos individuos.
Protocol
Representative Results
Discussion
La evaluación de la toxicidad vascular inducida por la quimioterapia es un reto debido a la dificultad en la visualización de la dinámica del sistema vascular en respuesta a un estímulo en tiempo real. Numerosos estudios clínicos han implicado que varias quimioterapias causan daño vascular directo, sin embargo, el mecanismo y las características de su toxicidad aún no se ha dilucidado. Hemos establecido un tiempo real, vivo plataforma de imágenes molecular pt para evaluar la potencial toxicida…
Declarações
The authors have nothing to disclose.
Acknowledgements
None
Materials
| Name of Material/ Equipment | Company | Catalog Number | Comments/Description |
| general anesthesia (100mg/kg ketaset and 6mg/kg XYL-M2). | Fort Dodge Animal Health, IA, USA and Biove Laboratories, France | ||
| a depilatory cream (Veet) | ReckittBenckiser, Bristol, UK | ||
| A 30-gauge, 1/2-inch needle attached to 1 ml syringe | |||
| FITC dextran at a volume of 100 µl (10 mg/ml; FD2000S, MW 2000000 Dalton) | Sigma | ||
| Doxorubicin (8 mg/kg, Adriamycin) | Teva, Israel | ||
| paclitaxel (1.2 mg/kg, Medexel) | Taro, Israel | ||
| Saline |
Referências
- Chow, A. Y., et al. Anthracyclines cause endothelial injury in pediatric cancer patients: a pilot study. J Clin Oncol. 24 (6), 925-928 (2006).
- Nuver, J., et al. Acute chemotherapy-induced cardiovascular changes in patients with testicular cancer. J Clin Oncol. 23 (36), 9130-9137 (2005).
- Vos, F. Y., et al. Endothelial cell effects of cytotoxics: balance between desired and unwanted effects. Cancer Treat Rev. 30 (6), 495-513 (2004).
- Kerbel, R. S., et al. ‘Accidental’ anti-angiogenic drugs. anti-oncogene directed signal transduction inhibitors and conventional chemotherapeutic agents as examples.Eur. J Cancer. 36 (10), 1248-1257 (2000).
- Soultati, A., et al. Endothelial vascular toxicity from chemotherapeutic agents: preclinical evidence and clinical implications. Cancer Treat Rev. 38 (5), 473-483 (2012).
- Tempelhoff, G. F., et al. Blood coagulation during adjuvant epirubicin/cyclophosphamide chemotherapy in patients with primary operable breast cancer. J Clin Oncol. 14 (9), 2560-2568 (1996).
- Ben Aharon, I., et al. Doxorubicin-induced vascular toxicity–targeting potential pathways may reduce procoagulant activity. PLoS One. 8 (9), e7515 (2013).
- Laemmel, E., et al. Fibered confocal fluorescence microscopy (Cell-viZio) facilitates extended imaging in the field of microcirculation. A comparison with intravital microscopy. J Vasc Res. 41 (5), 400-411 (2004).
- Al-Gubory, K. H., Houdebine, L. M. In vivo imaging of green fluorescent protein-expressing cells in transgenic animals using fibred confocal fluorescence microscopy. Eur J Cell Biol. 85 (8), 837-845 (2006).
- Bar-Joseph, H., et al. In vivo bioimaging as a novel strategy to detect doxorubicin-induced damage to gonadal blood vessels. PLoS One. 6 (9), e23492 (2011).
- Kaushal, V., Kaushal, G. P., Mehta, P. Differential toxicity of anthracyclines on cultured endothelial cells. Endothelium. 11 (5-6), 253-258 (2004).
- Kim, E. J., et al. Doxorubicin-induced platelet cytotoxicity: a new contributory factor for doxorubicin-mediated thrombocytopenia. J Thromb Haemost. 7 (7), 1172-1183 (2009).
- Walsh, J., Wheeler, H. R., Geczy, C. L. Modulation of tissue factor on human monocytes by cisplatin and adriamycin. Br J Haematol. 81 (4), 480-488 (1992).
- Kotamraju, S., et al. Doxorubicin-induced apoptosis in endothelial cells and cardiomyocytes is ameliorated by nitrone spin traps and ebselen. Role of reactive oxygen and nitrogen species. J Biol Chem. 275 (43), 33585-33592 (2000).
- Vasquez-Vivar, J., et al. Endothelial nitric oxide synthase-dependent superoxide generation from adriamycin. Bioquímica. 36 (38), 11293-11297 (1997).
