A modelo pré-clínico, murino de metástases hepáticas realizado através de uma técnica de injeção hemispleen.
Numerosos modelos murinos foram desenvolvidas para estudar os cancros humanos e avançar o entendimento de tratamento e o desenvolvimento do cancro. Aqui, um modelo pré-clínico, murino tumor pancreático de metástases hepáticas através de uma injecção de células tumorais hemispleen pancreáticos de murino singeneicas é descrito. Este modelo imita muitas das condições clínicas em pacientes com doença metastática para o fígado. Ratos consistentemente desenvolvem metástases no fígado, permitindo a investigação do processo metastático, testes terapia experimental, e a pesquisa da imunologia tumoral.
Adenocarcinoma ductal pancreático (PDA) é a quarta principal causa de mortes relacionadas ao câncer nos Estados Unidos 1. A sobrevida em cinco anos para pacientes com PDA metastático é 2-12% 1. Embora a quimioterapia adjuvante e neoadjuvante para câncer de pâncreas é mais eficaz do que nunca hoje em dia, ainda há uma necessidade desesperada de novas terapias.
O desenvolvimento de novas terapêuticas necessita de modelos animais pré-clínicos fidedignos. Embora os modelos de tumores subcutâneos são simples de utilizar, desvantagens incluem a incapacidade destes tumores e a metástase imitar a progressão do tumor e microambientes visto em cancros humanos. Modelos geneticamente modificados, tais como o rato geneticamente modificadas contendo Kras e p53 knock-in mutações oncogénicas (o modelo KPC) 2 e o modelo KPC com um marcador de linhagem YFP (o modelo PKCY 3) permitem o estudo de tumores que ocorrem naturalmente em immunocompetecamundongos NT. Além disso, o micro-ambiente do tumor é inalterada e é mais parecida com a observada na progressão de tumores humanos. Infelizmente, o tempo de desenvolvimento do tumor é variável dentro desses modelos, o que torna difícil de estudar terapias experimentais. Além disso, backcrossing desses ratos requer uma quantidade significativa de tempo e recursos financeiros, o que nem sempre é viável. Por fim, os modelos de mouse xenotransplante PDA implantados tornem indispensável ratos, que foram alterados ou microambientes tumorais ausentes imunocomprometidos. Como resultado, a eficácia de terapias experimentais demonstraram nestes modelos pré-clínicos são muitas vezes não reprodutíveis em ensaios clínicos humanos 4.
Este modelo de rato hemiesplenectomia utiliza células tumorais Panc02, que são um, metilcolantreno induzida linha celular de tumor pancreático altamente tumorigénicas derivadas de C57BL / 6 5, 6. Além disso, outras linhas celulares PDA murino derivado do mic KPCe pode ser utilizado neste modelo. Schulick et al. Já desenvolveu uma técnica hemiesplenectomia e criou um modelo singênico rato de metástases de câncer de cólon 7. Este modelo hemiesplenectomia (Figura 1) oferece a inoculação do tumor consistente e iguais em camundongos imunocompetentes prestando-se à investigação de novos agentes terapêuticos 7-10.
Este modelo murino pré-clínico de metástase do câncer pancreático para o fígado através de uma técnica de injeção hemispleen é o primeiro modelo descrito que espelha muitas das condições clínicas e imunológicas de pacientes com doença metastática para o fígado. Este modelo apresenta várias vantagens em relação aos outros modelos de murino. Em primeiro lugar, ao contrário dos modelos transgénicos de cancro pancreático, em que apenas 30% dos ratinhos desenvolvem metástases do fígado e a temporiza…
The authors have nothing to disclose.
KF e KO são co primeiros autores, juntamente com KS
Este trabalho foi financiado em parte pelo AHPBA Fellowship (KS), NIH K23 CA148964-01 (LZ), Johns Hopkins School of Medicine Clinical Scientist Award (LZ), Fundação Viragh e do Centro de Câncer Ir Viragh pâncreas na Universidade Johns Hopkins (EMJ e LZ), a Fundação Nacional de Pâncreas (LZ), o Lefkofsky Família Foundation (LZ), o SPORE NCI em Gastrointestinal Cânceres P50 CA062924 (EMJ, LZ), a Fundação Lustgarten (LZ), e as bolsas Sol Goldman pâncreas Cancer Center (KS , BHE, LZ).
Cell culture media and components | will vary depending on cell line | ||
Phosphate Buffered Saline | Gibco by Life Technologies | 10010-023 | |
15 mL centrifigure tubes | Corning | 430052 | |
Curved Operating Scissor | Roboz Surgical Store | RS-6835 | |
Micro dissecting Graefe Forceps | Roboz Surgical Store | RS-5130 | |
Needle holder (regular) | World Precision Instruments, Inc | ||
3-0 or 4-0 suture | courtesy of dept of surgery, Johns Hopkins | ||
Weck Horizon Open Ligating Clip Applier, small, angled | Teleflex | 137085 | |
Weck Horizon Open Ligating Clip Applier, medium, angled | Teleflex | 237115 | |
Weck Horizon medium ligating clips | Teleflex | 002200 | |
Weck Horizon small ligating clips | Teleflex | 001200 | |
Syringe, 1 cc, tb syringe, 3/8" slip tip | Becton Dickinson | 309625 | |
Syringe, 1 cc, tb syringe, 5/8" slip tip | Becton Dickinson | 309597 | |
9 mm Autoclip Applier | Mikron | 427630 | |
9 mm Autoclip | Becton Dickinson | 427631 | |
Heating pad | Sunbeam | CAT93 | |
70% Ethanol | sold by numerous vendors | ||
Ketamine Hydrochloride | Hospira | 22395DD | |
Xylazine hydrochloride | Sigma | X1251 |