Summary

Farelerde Sistemik ve Karaciğer Hemodinamik Parametrelerin İzleme

Published: October 04, 2014
doi:

Summary

Bu film farelerde sistemik ve hepatik hemodinamik kazanmak için nasıl gösterir. Tüm izleme hayati parametrelerin, sistemik kan basıncı, santral venöz basınç, ortak hepatik arter akım hızı ve portal ven basıncı yanı sıra farelerde portal akış hızı edinimini içerir.

Abstract

Deneysel araştırma fare modellerinin kullanımı hepatik fizyolojisi ve patofizyolojik rahatsızlıkların çalışma için çok büyük önem taşıyor. Ancak nedeniyle fare, küçük boyutu, fare için uygun intraoperatif izleme prosedürünün teknik detayları nadiren tarif edildi. Daha önce biz fareler için hemodinamik parametrelerini elde etmek için bir izleme prosedürü bildirdi. Şimdi, farelerde sistemik ve hepatik hemodinamik parametrelerini elde etmek için prosedür, sıçanlar daha küçük on kat bir tür adapte. Bu film, hayvanların aletleri hem de farelerde karaciğer ve sistemik hemodinamikler değerlendirmek için gerekli olan veri toplama işlemini göstermektedir. Vücut ısısı, solunum hızı ve kalp hızı dahil yaşamsal parametreleri, işlem boyunca kaydedildi. Sistemik hemodinamik karotis arter basıncı (CAP) ve santral venöz basınç (CVP) oluşmaktadır. Karaciğer perfüzyon parametreleri portalı v dahilEin basıncı (PVP), köprülü akış hızı hem de ortak hepatik arter (Tablo 1) akış hızı. Enstrümantasyon ve veri toplama normal değerler 1.5 saat içinde tamamlandı kaydetmek için. Sistemik ve hepatik hemodinamik parametreler bu işlem sırasında normal sınırlar içinde kalmıştır.

Bu prosedür zor ama mümkündür. Biz zaten deneyler sıkma normal farelerde olduğu gibi% 70 hepatektomiden sırasında ve karaciğer lobunda hepatik hemodinamikleri değerlendirmek için bu prosedürü uyguladık. Rezeksiyon (n = 20), rezeksiyon (6.87 ± 2.39 cmH2O) daha önce anlamlı derecede yüksek olduğu cmH2O (p <0.05) 11.41 ± 2.94 idi sonra PVP idi. Denemeyi sıkma lob sonuçları bu izleme prosedürü portal basınçta ve portal akış hızında küçük değişiklikler tespit etmek için hassas ve uygun olduğunu belirtti. Sonuç olarak, bu yordamı tecrübeli bir mikro-cerrahın elinde güvenilir ama exp sınırlı olmalıdıreriments farenin kesinlikle nerede ihtiyaç vardır.

Introduction

Bu videonun genel amacı, sistemik ve hepatik hemodinamik parametrelerini elde etmek için gerçek-zamanlı izleme prosedürü göstermekti. Bu prosedürü geliştirmek için gerekçe sistemik ve hepatik hemodinamik parametrelerin elde edilmesi gerektiren farelerde deneysel müdahaleler için büyük bir değerdir. Prosedür böyle hepatektomiden, portal ven ligasyonu ve karaciğer nakli gibi, naif hayvanlara ve sırasında veya belirli bir hepatobiliyer deneysel cerrahi müdahale sonrasında uygulanabilir.

Kemirgenlerde karaciğer hemodinamik verilerin elde edilmesi önerilen invaziv prosedür gerektirir. Karaciğer perfüzyon non-invaziv elde edilemez. Ancak, sistemik kan basıncı edinimi için alternatifler vardır. Böyle kuyruk manşet tekniği 8 olarak izleme teknikleri sıçan ve farelerde hem de kan basıncını elde etmek için kullanılmıştır. Kuyruk manşet tekniği consci uygulanabilirlı hayvanlar. Kan basıncını ölçerken, hayvan belirli bir rahatsız bir pozisyonda yerleştirilir ve düzeltilmesi gerekiyor. Kuyruk manşet cihaz kılavuzda, üretici farenin sinir olur ve kuyruk dolaşımını azaltabilir hangi vurguladı belirtmektedir. Bu koşullar altında, kuyruk elde edilen periferik kan basıncı merkezi kan basıncından daha düşük olabilir.

Tam izleme prosedürü veri toplama için sensörler bir dizi kullanarak bir tümleşik çoklu-kanal monitör ile gerçekleştirildi. Kan basıncı, mikroskop altında dikkatli bir mikrocerrahi diseksiyon ve maruz kaldıktan sonra söz konusu kabı içine bir kateter sokulması ile elde edilmiştir. Akış hızı, her bir kabın etrafına transonik akış prob yerleştirilmesi ile ölçülmüştür.

Biz zaten SINGL karşılaştırılabilir fizyolojik hemodinamik verileri kapsamlı bir dizi sonuçlanan sıçanlar için benzer intraoperatif izleme prosedürü bildirdiDiğer grup 7 rapor E verileri. Bu nedenle fare, sıçan daha küçük 10-kat bir türe adapte için iyi bir temel temsil etmek için bu prosedürü kabul. Sıçan prosedüre en önemli fark, kan basıncı verileri yerine sıvı tabanlı kateter sistemi elde etmek için Millar kateter kullanılmasıdır. Akış veriler de transonik akış sondaları, gelen sıçan gemiler için daha sadece daha küçük olanlar ile elde edildi.

Nedeniyle hayvanın küçük boyutu, farelerin enstrümantasyon teknik açıdan zorlayıcı, ama mümkündür. Enstrümantasyon tamamlandıktan sonra önceden tanımlanmış bir ayar dosyası kullanılabilir beri, veri toplama ve birincil yaşam veri analizi, basittir. Ayar dosyası bir dizi deney başında bir kez tanımlanması ve bu depolanmış ve daha sonraki deneyler için kullanılabilir sahiptir.

Şimdiye kadar akut deneylerde karaciğer hemodinamik etkilerini değerlendirmek için bu prosedürü uygulanır. Biz CA ölçülenP ve PVP önce ve hemen% 70 parsiyel hepatektomi (PH) sonra ve / de-sıkma deneyler kıstırma. Biz karaciğer kütlesinin tamamen% 90'ını temsil eden kitle medyan kısa (5 dakika) sıkıştırma ve sol lateral lob ardından karaciğer% 20 temsil eden sağ lobunun Hepato-duodenum ligament kenetlenir. De-sıkma medyan ve sol lateral lobu boşaltarak ardından sağ lob kelepçeyi serbest başladı. Maksimum bağlama süresi 10 dakikanın altında idi.

Protocol

Konut ve yürütülen tüm işlemler Alman Hayvan Refahı Mevzuatına uygun vardı. 1. Sensörler Kalibrasyon (Sensörler Kalibrasyon için üreticinin talimatlarına uyun) 1.1) Millar kateter kalibrasyonu. 30 dakika önce dengelemek için (sıfırlar) ve kalibrasyon için steril su ya da tuzlu su içinde kateterin ucu ön-ıslatma. Köprü amplifikatör millar1 kanalına millar sensörünü bağlayın ve su sütununa millar sensör ucu takın. …

Representative Results

Böyle solunum hızı ve kalp hızı gibi farelerin hayati parametreleri açıkça sıçan çok daha yüksektir. Ortalama sistemik kan basıncı ve boyun ven basıncı sıçan değerlere benzer ve insan verilerinden bile benzer. Karaciğer hemodinamik veriler açıkça farklıdır. Biz 8 farelerin normal değerleri elde edilmiştir. Normal farelerde, portal kan akışı 1,6-2,3 ml / dakika arasında değişmektedir. Ortak hepatik arter akış 0.10 0.35 ml / dk arasında değişmektedir. Norm…

Discussion

Hepatik Hemodinamiğin izlenmesi Hepatoloji ve karaciğer cerrahisinde önemli bir araştırma aracı. Hepatik hemodinamik verilerin elde dolaşım sistemi üzerinde hepatobilier prosedürlerin etkisini belirlemek için yardımcı olur. Vazoaktif ilaçlar değerlendiren çalışmalarda gerektiği gibi hepatik hemodinamik verilerin elde edilmesi de, örneğin portal basıncı ve portal akışını etkileyen ilaçların etkilerini incelemek için gereklidir.

Küçük boyutuna rağmen,…

Declarações

The authors have nothing to disclose.

Acknowledgements

Bu araştırma, "Sanal Karaciğer Ağ" finanse Eğitim ve Araştırma Federal Bakanlığı (Bmbf) tarafından desteklenmiştir. Ben videoyu üreten ve ses kayıt için animasyon ve Isabel Jank yaratarak onların yardım için Jena Üniversitesi Hastanesi medya merkezinden Frank Schubert ve Rene GUMPERT teşekkür etmek istiyorum.

Materials

Name of Material/ Equipment Company Catalog Number Comments/Description
PowerLab 16/30  ADInstruments PL3516
Quad Bridge Amp ADInstruments  FE224 Bridge amplifier 
Animal Bio Amp ADInstruments  FE136
Needle Electrodes for FE136 (3 pk) ADInstruments  MLA1213
Perivascular Flowmeter Module Transonic TS420 
Flowprobe MA0.5PSB/MA1PSB Transonic MA0.5PSB/MA1PSB
SPR-1000 Mouse Pressure Catheter Millar instruments 841-0001
fluid filled catheter  Terumo SR+DU2619PX 26G, 0.64×19mm
micro scissors F·S·L No. 14058-09
micro serrefine F·S·L No.18055-05
Micro clamps applicator F·S·L No. 18057-14
Straight micro forceps F·S·L No. 00632-11
Curved micro forceps F·S·L No. 00649-11
needle-holder F·S·L No. 12061-01
6-0 silk ethicon
6-0 prolene ethicon
7-0 prolene ethicon
10-0 prolene ethicon
Tail cut-off device  Kent Scientific www.kentscientific.com
LabChart7 ADInstruments data  analysis software 

Referências

  1. Albuszies, G., et al. Effect of increased cardiac output on hepatic and intestinal microcirculatory blood flow, oxygenation, and metabolism in hyperdynamic murine septic shock. Crit Care Med. 33 (10), 2332-2338 (2005).
  2. Bernhard, W., et al. Phosphatidylcholine molecular species in lung surfactant: composition in relation to respiratory rate and lung development. Am. J. Respir. Cell Mol. Biol. 25 (6), 725-731 (2001).
  3. Cheever, A. W., Warren, K. S. Portal vein ligation in mice: portal hypertension, collateral circulation, and blood flow. 18, 405-407 (1963).
  4. Costa, G., Aguiar, B. G., Coelho, P. M., Cunha-Melo, J. R. On the increase of portal pressure during the acute and chronic phases of murine schistosomiasis mansoni and its reversibility after treatment with oxamniquine. Acta Trop. 89 (1), 13-16 (2003).
  5. Cui, S., Shibamoto, T., Zhang, W., Takano, H., Kurata, Y. Venous resistance increases during rat anaphylactic shock. Shock. 29 (6), 733-739 (2008).
  6. Geerts, A. M., et al. Comparison of three research models of portal hypertension in mice: macroscopic, histological and portal pressure evaluation. Int. J. Exp. Pathol. 89 (4), 251-263 (2008).
  7. Huang, H., Deng, M., Jin, H., Dirsch, O., Dahmen, U. Intraoperative vital and haemodynamic monitoring using an integrated multiple-channel monitor in rats. Lab Anim. 44 (3), 254-263 (2010).
  8. Krege, J. H., Hodgin, J. B., Hagaman, J. R., Smithies, O. A noninvasive computerized tail-cuff system for measuring blood pressure in mice. Hypertension. 25 (5), 1111-1115 (1995).
  9. Kuga, N., et al. Rapid and local autoregulation of cerebrovascular blood flow: a deep-brain imaging study in the mouse. J. Physiol.. 587 (Pt 4), 745-752 (2009).
  10. Muraki, T., Strain Kato, R. difference in the effects of morphine on the rectal temperature and respiratory rate in male mice. Psychopharmacology (Berl). 89 (1), 60-64 (1986).
  11. Nielsen, J. M., et al. Left ventricular volume measurement in mice by conductance catheter: evaluation and optimization of calibration. Am. J. Physiol Heart Circ. Physiol. 293 (1), H534-H540 (2007).
  12. Sakamoto, M., et al. Improvement of portal hypertension and hepatic blood flow in cirrhotic rats by oestrogen. Eur. J. Clin. Invest. 35 (3), 220-225 (2005).
  13. Reverter, E., et al. Impact of deep sedation on the accuracy of hepatic and portal venous pressure measurements in patients with cirrhosis. Liver Int. 34 (1), 16-25 (2014).

Play Video

Citar este artigo
Xie, C., Wei, W., Zhang, T., Dirsch, O., Dahmen, U. Monitoring of Systemic and Hepatic Hemodynamic Parameters in Mice. J. Vis. Exp. (92), e51955, doi:10.3791/51955 (2014).

View Video