隔离和使用的牛肠系膜动脉和静脉部分，作为生物测定在小肠测试的Vasoactivity
Summary
小肠经常暴露于毒素可影响血液流动和养分吸收的负面影响。使用multimyograph和肠系膜动脉和静脉分离物，化合物或感兴趣的毒素可筛选vasoactivity。
Abstract
哺乳动物的胃肠道系统经常暴露于化合物（期望的和不希望），可以对血液流动的效果，并从该系统中。血流变化到小肠可导致对器官的吸收功能的作用。从饲料通过发酵和消化过程中释放毒素，特别关注已经发展反刍动物的地方生产效率可以改进的地方。与本文相关的视频描述了体外生物测定发展到屏幕化合物vasoactivity牛肠系膜动脉孤立的横截面，静脉使用multimyograph。一旦血管安装和平衡的肌动描记，生物测定本身可用于：作为筛选工具，以评估收缩反应或感兴趣的化合物vasoactivity;确定由药理学靶向受体的特异性激动剂的受体类型的存在S;确定与一个或一个以上的拮抗剂存在的受体的作用;或确定与拮抗剂的感兴趣的化合物的潜在相互作用。通过这一切，数据采集的实时性，组织从一个单一的动物收集的可暴露于大量的不同实验处理（ 在体外的优势），并表示对毛细血管床，以提供精确的任一侧的脉管图象的什么可以发生在传入和传出的血液供应支撑小肠。
Introduction
在血液流向组织床的改变可能对器官功能产生很大的影响。小肠的主要功能是营养物质的吸收。动脉血流到肠道的吸收表面所需的营养物质的吸收和血流量的增加，以在营养吸收有助于沿面1食糜移动。血流量的减少会导致营养吸收减少，由于在跨膜梯度2的下降。除了营养物，小肠，也可以接触到的次级代谢产物，药物或毒素施加于肠系膜局部血流量的效果。在反刍动物的情况下，化合物可从饲料中解放出来（ 例如 ，营养物质如氨基酸，或毒素，例如麦角生物碱）通过前肠的发酵工艺。如果这些化合物生存瘤胃发酵的微生物新陈代谢，它们现在可以吸收或相互作用，因为它们通过在动物的胃肠道中行进。
有许多不同的方法可用于测量体内的血流量（ 例如 ，多普勒超声，留置血流量计，放射性微球，和指示剂稀释技术），其允许的各种实验方案或疗法的评价。然而，为了获得关于血管平滑肌的机械或药理学特性的信息，方法仍然有限，以大型船舶，直至Mulvany和哈尔3发表了一篇文章，描述使用电线的技术安装在肌动描记血管环的准备。由于该技术的发展，改进继续进行到允许各种不同的应用为管状结构的评价相关联的肌动描记系统。该系统也被改编利用固定杆，用于安装大型船舶4，其中灌注技术是不希望的。
因为在不同的解剖起源和区别在来自不同物种的动物的，数据从容器和动物型相同船只船只相异的不能容易地在不同的容器或在不同种类动物的5相同的容器中推断出来。因此，独立的生物鉴定必须制定并随时验证这些方面发生变化。最近几个生物测定已经开发了这些技术用于牛外侧隐静脉，右瘤胃动脉和静脉6,7。
这个生物测定的开发是为了专门调查效果麦角生物碱对血管支撑小肠。据报道，供给生物碱的50-60％出现在皱胃内容，但只有5％被回收粪便中8。斯特里克兰等 9麦角碱的审查规定，也可用数据sugg估该小肠可以是用于ergopeptine吸收的最重要位点。埃克特等 10回顾生物制药麦角生物碱方面表示，一旦他们穿过上皮屏障，麦角生物碱要么运经淋巴系统向锁骨下静脉或经肠系膜静脉和门静脉进入血液。罗德等人 11报道了减少血液流向十二指肠和结肠公牛消耗高的内生真菌感染（高麦角生物碱）的饮食。使用正确的瘤胃动脉和静脉的生物测定，Foote 等12表明，麦角生物碱是血管瘤胃液中的血管。 Foote 等13后来证明在体内的瘤胃接触麦角生物碱导致降低瘤胃上皮细胞的血流量。这减少血流量，瘤胃的吸收表面伴随造成养分（挥发性脂肪酸）的磁通的降低。鉴于曲麦角生物碱传递来自前肠小肠antity;有人推测会发生在小肠血管和营养吸收同样的效果。这需要牛近端回肠肠系膜上动脉和静脉的生物测定的发展。
Protocol
Representative Results
Discussion
在这种生物测定的发展，最初的挑战是建立一个可重复的集合网站肠系膜血管。示例站点的一致性是至关重要的，因为从通过空肠回肠，因此肠系膜进展过程中的一些小肠变化的功能各不相同的类似的模式。肠系膜上动脉和静脉的回肠分公司分别通过解剖标志是最容易识别。通过定位在盲肠和以下的回盲部折叠到其末端上肠系膜的左侧，这是接近颅肠系膜动脉15的终止。再肠系膜的面积（…
Declarações
The authors have nothing to disclose.
Acknowledgements
作者承认瑞恩·卓别林和肯塔基州肉类实验室和动物与食品科学系大学的格雷格伦特福罗博士提供的机会来收集本文采用实验的组织。
Materials
| Name of the Material/Equipment | Company | Catalog Number | Comment/Description (optional) |
| Multi Myograph | Danish Myo Technologies | 610M | A myograph is critical to this bioassay, but there are other platforms available for use that will suffice. |
| Powerlab 8/sp | ADIntruments | ML785 | |
| LabChart 7 | ADInstruments | Version 7 | |
| Force Calibration Kit | Danish Myo Technologies | 100055 | Specific to DMT myographs |
| Bottle-top Filter | Nalgene | 595-4520 | 0.22 um pore size; 45 mm neck size |
| #5 Jewler’s Forceps | Miltex | 555008FT | Any brand of forceps can be used |
| Noyes Iris Scissors | Miltex | 18-1510 | Any brand of scissors can be used |
| Dissecting Scope | Zeiss | Stemi 2000-C | Any brand of dissecting light microscope will suffice |
| Adjustable Tissue Matrice | Braintree Scientific | TM C12 | This is not critical to the assay, but greatly reduces section to section variation in length and speeds up the slicing process greatly |
| Krebs-Hensleit Buffer | Sigma-Aldrich | K3753-10x1L | It is not necessary to buy Krebs, this can be made in house |
| Calcium chloride dehydrate | Sigma-Aldrich | C7902-500G | |
| Sodium bicarbonate | Sigma-Aldrich | S5761-500G | |
| Desipramine-HCl | Sigma-Aldrich | D3900-5G | |
| Propranolol-HCl | Sigma-Aldrich | P0884-1G | |
| KCl | Sigma-Aldrich | P9333-500G | |
| 95% O2/5% CO2 | Scott Gross | UN3156 |
Referências
- Matheson, P. J., Wilson, M. A., Garrison, R. N. Regulation of intestinal blood flow. The Journal of surgical research. 93, 182-196 (2000).
- Dobson, A. Blood flow and absorption from the rumen. Quarterly journal of experimental physiology. 69, 599-606 (1984).
- Mulvany, M. J., Halpern, W. Mechanical properties of vascular smooth muscle cells in situ. Nature. 260, 617-619 (1976).
- Nielsen-Kudsk, F., Poulsen, B., Ryom, C., Nielsen-Kudsk, J. E. A strain-gauge myograph for isometric measurements of tension in isolated small blood vessels and other muscle preparations. Journal of pharmacological. 16, 215-225 (1986).
- Mulvany, M. J., Aalkjaer, C. Structure and function of small arteries. Physiological reviews. 70, 921-961 (1990).
- Klotz, J. L., et al. Assessment of vasoconstrictive potential of D-lysergic acid using an isolated bovine lateral saphenous vein bioassay. Journal of animal science. 84, 3167-3175 (2006).
- Klotz, J. L., Bush, L. P., Strickland, J. R. A vascular contractility bioassay using bovine right ruminal artery and vein. Journal of animal science. 89, 1944-1951 (2011).
- Westendorf, M. L., et al. In vitro and in vivo ruminal and physiological responses to endophyte-infected tall fescue. Journal of dairy science. 76, 555-563 (1993).
- Strickland, J. R., et al. Board-invited review: St. Anthony"s Fire in livestock: causes, mechanisms, and potential solutions. Journal of animal science. 89, 1603-1626 (2011).
- Eckert, H., Kiechel, J. R., Rosenthaler, J., Schmidt, R., Schreier, E., B, B. e. r. d. e., HO, S. c. h. i. l. d. Ch. 11. Ergot Alkaloids and Related Compounds. , (1978).
- Rhodes, M. T., Paterson, J. A., Kerley, M. S., Garner, H. E., Laughlin, M. H. Reduced blood flow to peripheral and core body tissues in sheep and cattle induced by endophyte-infected tall fescue. Journal of animal science. 69, 2033-2043 (1991).
- Foote, A. P., Harmon, D. L., Strickland, J. R., Bush, L. P., Klotz, J. L. Effect of ergot alkaloids on contractility of bovine right ruminal artery and vein. Journal of animal science. 89, 2944-2949 (2011).
- Foote, A. P., et al. Ergot alkaloids from endophyte-infected tall fescue decrease reticuloruminal epithelial blood flow and volatile fatty acid absorption from the washed reticulorumen. Journal of animal science. 91, 5366-5378 (2013).
- Hocking, K. M., et al. Detrimental effects of mechanical stretch on smooth muscle function in saphenous veins. Journal of vascular surgery. 53, 454-460 (2011).
- Smith, D. F. Bovine intestinal surgery. Modern veterinary practice. 65, 705-710 (1984).
- Budras, K. D., Habel, R. E. . Bovine Anatomy An Illustrated Text. , (2003).
- Klotz, J. L., et al. Antagonism of lateral saphenous vein serotonin receptors from steers grazing endophyte-free, wild-type, or novel endophyte-infected tall fescue. Journal of animal science. 91, 4492-4500 (2013).
- Egert, A. M., Kim, D. H., Schrick, F. N., Harmon, D. L., Klotz, J. L. Dietary exposure to ergot alkaloids decreases contractility of bovine mesenteric vasculature. Journal of animal science. 92, 1768-1779 (2014).
