Technique chirurgicale pour l'implantation de l'ingénierie tissulaire vasculaires greffes et suivantes<em> In Vivo</em> Surveillance
Summary
Un protocole étape par étape pour le placement inter-position des navires de l'ingénierie tissulaire (de TeV) dans l'artère carotide d'un mouton en utilisant une anastomose de bout en bout et l'évaluation numérique en temps réel in vivo jusqu'au sacrifice des animaux.
Abstract
Le développement des navires de l'ingénierie tissulaire (TeV) de est avancé par la capacité de TeV routinière et efficacement implant (4-5 mm de diamètre) dans un grand modèle animal. Un protocole étape par étape pour le placement inter-position de l'évaluation numérique TEV et en temps réel de la TEV et les artères carotides indigènes est décrite ici. Surveillance in vivo est rendue possible par l'implantation de sondes de flux, cathéters et des cristaux à ultrasons (capable d'enregistrement des variations de dynamiques de diamètre TeV implantés et les artères carotides natifs) au moment de la chirurgie. Une fois implantées, les chercheurs peuvent calculer modèles artères de la circulation sanguine, pression artérielle invasive et diamètre de l'artère rendement paramètres tels que la vitesse de l'onde de pouls, l'indice d'augmentation, les pressions d'impulsions et de conformité. L'acquisition des données est réalisée en utilisant un programme informatique pour l'analyse unique pendant toute la durée de l'expérience. Ces données inestimable donne un aperçu de TEV remodelage de la matrice, sa resemblanCE pour les contrôles natifs / faux et la performance globale de TEV in vivo.
Introduction
L'objectif principal pour le développement de TeV a été de fournir un substitut pour le remplacement de greffe autologue lorsque les navires autologues ne sont pas disponibles et de limiter les donateurs de vue de la morbidité. Par exemple, le nombre de pontages coronariens de l'artère par année a dépassé 350 000 aux Etats-Unis, et la source idéale de greffons appropriés reste la gauche artère mammaire interne, descendante antérieure gauche artère coronaire et une veine saphène. Depuis de nombreuses personnes qui souffrent de maladies vasculaires peuvent ne pas avoir les artères et les veines convenables pour le remplacement de greffe autologue, le développement de TeV est ainsi devenue un champ intense de la recherche depuis des décennies 1-6. Alors que l'ingénierie et l'optimisation de nouveaux TeV ont subi de nombreux progrès, les rapports sur les techniques chirurgicales employées pour implanter les TeV eux n'a pas été un sujet d'une telle discussion intense. Plutôt, les protocoles concernant l'implantation de TeV dans des modèles animaux sont largement laisséesjusqu'à enquêteurs recherche.
Le manuscrit suivant montre comment implanter TeV en utilisant une approche de bout-en-bout anastomose. Cette procédure a été optimisé par l'utilisation d'un modèle spécifique de suture anastomotique, stabilisant technique de suture, l'optimisation de la tension longitudinale et l'addition d'instrumentation suivi in vivo. Cette méthode est en contraste avec certaines des nombreuses variantes qui ont été utilisés précédemment. En outre, cette procédure décrit comment acquérir des paramètres tels que la pression artérielle, TEV diamètre / la conformité et le débit à travers la TEV après la chirurgie jusqu'à l'explantation. Cette collection de données comprend une analyse de la TEV indispensable alors qu'il est dans le processus de remodelage.
Protocol
Representative Results
Discussion
Le but de ce rapport est de fournir une procédure fiable et reproductible pour TeV implants d'intérêt dans l'artère carotide ovine. Les artères carotides indigènes des animaux utilisés dans ce modèle étaient 0,5 à 0,75 mm d'épaisseur et de 4,5 à 5 mm de diamètre extérieur. La technique chirurgicale décrite ici a été un succès pour l'implantation de différentes géométries TeV mesure de 0,25 à 1 mm d'épaisseur, 4-5 mm de diamètre extérieur et 4 cm de longueur avec un grand succ…
Declarações
The authors have nothing to disclose.
Acknowledgements
Ce travail a été soutenu par des subventions de l'Institut National Heart and Lung (R01 HL086582) et le Fonds pour la science des cellules souches de New York (NYSTEM, contrat # C024316) à STA et DDS illustrations utilisées dans JoVE vidéo ont été réalisées par John Nyquist; Illustrateur médical de l'Université d'État de New York à Buffalo.
Materials
| Equipment | Manufacturer | Serial/Catalog # | Notes | |
| Pressure Transducer | Becton Dickinson | P23XL-1 | 1+ (1 for each artery) Used with water-filled diaphragm domes |
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| Amplifier and transducer box | Gould | 5900 Signal Conditioner Cage | 1 Two transducers and amplifiers should be included in cage. While this specific unit may be discontinued, other commercially available pressure transducers with a BNC/analog output will communicate with the Sonometrics equipment |
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| T403 Console with TS420 perivascular flowmeter module(x2) | Transonic Systems | T403 module and TS420 (x2) | 1 Flow probes measuring flow through each of the carotid arteries will connect to each of the TS420 units. |
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| Digital ultrasonic measurement unit | Sonometrics | TR-USB | 1 | |
| Flow Probe Precision S-Series 4mm | Transonic Systems Inc. | MC4PSS-LS-WC100-CM4B-GA | 2 | |
| 1mm Sonometrics Crystals | Sonometrics Systems | 1R-38S-20-NC-SH | 2-4 (2 for each artery) | |
| Catheter for implantation | BD (Becton Dickinson) | 381447 | 1+ (1 for each artery) Catheter is cut and secured to microbore tubing, stylette is utilized for insertion |
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| Tygon Microbore Tubing | Norton Performance Plastics | (AAQ04127) Formulation S-54-HL | NA (cut to length for an extension set) | |
| Luer Stub Adapter | BD (Becton Dickinson) | 427564 (20 gauge) | 1+ (1 for each arterial catheter) | |
| Surflo Injection Plug | Terumo | SR-IP2 | 1+ (1 for each arterial catheter) | |
| Meadox | PTFE (Teflon) Felt | 19306 | NA (cut to size) The PTFE felt used in our studies was discontinued. However, comparable companies such as “Surgical Mesh” offer products which are equivalent. |
Referências
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