Summary

強膜ウサギモデルで軸性近視の予防のためのリボフラビンおよび紫外線A放射線を用いて架橋

Published: April 03, 2016
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Summary

私たちは、軸方向伸長のウサギの眼にリボフラビンおよびUVAと強膜架橋の効果を実証します。軸方向の伸びは、その右目のまぶた(瞼板縫合)を縫合することによって13日齢のニュージーランドウサギ(オスとメス)で誘導されました。

Abstract

近視の人、重度の近視の特には、白内障、緑内障、網膜剥離および脈絡網膜異常の通常より高い危険にさらされています。また、病的近視は視力障害や失明1-3の一般的な不可逆的な原因です。本研究では、ウサギモデルにおける軸性近視の開発にリボフラビンおよび紫外線照射を使用して強膜の架橋の効果を示します。眼球の軸長は、13日(雄および雌)熟成ニュージーランド白ウサギにおける走査超音波検査で測定しました。目はその後、瞼板縫合に続いて、強膜の架橋と360°の結膜peritomyを施行しました。軸方向の伸びは、その右目のまぶた(瞼板縫合)を縫合することによって13日齢のニュージーランドウサギで誘導されました。眼の象限に分割され、すべての象限は、0.2 cm 2での面積と4mmの半径でそれぞれ2つの強膜照射ゾーンを有していました。架橋は0.1%をドロップすることによって行いましたデキストランフリー紫外線照射前照射ゾーン20秒と200秒の照射時間の間に20秒ごとの上にリボフラビン-5-リン酸。 UVA照射(370 nm)は57 mWの/ cm 2の(合計UVA光の線量、57 J / cm 2で)で強膜に垂直に印加しました。 Tarsorrhaphiesが繰り返さ軸方向の長さの測定に続いて、55日目に除去しました。この研究は、リボフラビンおよび紫外線放射で強膜の架橋が効果的にウサギモデルで閉塞によって誘発される軸方向の伸びを防止することを示しています。

Introduction

近視は、屈折障害の最も一般的なものです。米国および欧州で近視の有病率は約30%であることが報告され、アジア諸国では一般人口1,2の60%にまで影響を及ぼしています。近視の進行は、通常2年間の期間3オーバーの周り-0.5ジオプターの割合で、近視者の50%までに発生します。近視によって課される医療費は、眼鏡、コンタクトレンズ及び屈折矯正手術のための費用や緑内障、白内障、網膜剥離や視覚障害4-6の増加、健康上のリスクに関連する費用を含む、かなりのです。

近視の動物実験では、視力低下は、眼および角膜入れ墨11から短い距離でまぶた縫合7-10、閉塞器の配置によって誘導されます。しかしながら、これらの研究で発生する人工的な近視のために、オクルージョン処理なし視覚剥奪実験カーとして、非常に若い動物で行われなければなりません大人の標本上でIEDは成功を収めてきました。

重度の近視の重要な特徴の一つは、このようなEhlers-のように視覚剥奪12または強膜のいくつかの代謝障害に起因した後正視の乱れフィードバック機構に起因し、おそらく強膜の進行間伐と強膜の病理学的変化、ですダンロス症候群13。最終的には、両方のメカニズムは、そのような線維形成16で減少したコラーゲン繊維径14,15や外乱などの近視、強膜の構造異常にストレッチや強膜、網膜および脈絡膜の薄膜化につながります。

いくつかの研究は、障害のコラーゲン架橋は近視強膜17-18の弱化過程における重要な因子であることを示しています。ウォレンサック 19-21は、リボフラビンおよび紫外線A(UVA)照射光増感剤を適用することにより、コラーゲンの架橋を誘導した(370 nm)とおよびin vitro 19 ブタと人間の強膜の剛性が大幅に、157パーセントの増加と、in vivoでのウサギの強膜剛性465%の増加(ヤング率)20を指摘しました。 剛性が4ヶ月後、3日後に320.4パーセントによって277.6パーセント増加し、8ヶ月(ヤング率)22の後に502パーセント:架橋はまた、 インビボでのウサギの強膜上の長期的な効果を持っていました。

近視の進行を阻止するための治療の試みが23-26公開されているが、これらの方法の成功は議論の余地があります。進行性近視を防ぐませ効率的な手段は、現在までに見出されていません。

近視の病因は依然として論争のであり、その治療が課題となって。これらの知見に基づいて、強膜の架橋は、近視の進行の強膜に基づく治療のための手段として働くことができると仮定されます。本研究の目的は、強膜コラーゲンを調べることですcrosslinki視線閉塞によって誘発される軸性近視の発展に影響をngの。

Protocol

動物は、研究における動物の使用に関するARVO決議に従って処理しました。研究プロトコールは、実験動物研究のための制度委員(。; 021211承認なし022-4598-2)によって承認されました。 手術#1の1.準備計量し、塩酸ケタミン100 mg / mlで(100mg / kg)およびキシラジン塩酸塩25 mg / mlで(12.5ミリグラム/キログラム)の筋肉内注射で13日齢のニュージーランド白ウサギを麻酔。これらの?…

Representative Results

図1及び図 2は、図式2群の軸方向長さの測定を示します。左眼が( 図1)上で動作されなかったグループ1のウサギは、右眼の上強膜の架橋と瞼板縫合を施行しました。左眼が( 図2)上で動作されなかったグループ2のウサギは、右眼にのみperitomyと瞼板縫合を施行しました。 <p class="jove_content" fo:keep-toge…

Discussion

我々は、リボフラビンおよびUVA照射で架橋技術を使用して、ウサギモデルで軸性近視の防止のインビボ試験最初の提示します。別の実験動物は、研究のこのタイプに使用することができるが、我々は、目の大きさや強膜表面に架橋を行う必要のほとんどによるウサギを選択しました。

私たちは、ウサギの強膜を露出し、手順に挑戦する上下のまぶたを縫?…

Declarações

The authors have nothing to disclose.

Acknowledgements

著者らは、実験室でのプロと優れた技術的な仕事のために氏ダリアセラ氏えみシャロンに感謝しています。

Materials

2-0 braided silk non-needled sutures  ETHICON W193
4-0 braided silk ivory color  ETHICON W816
0.1% dextran-free riboflavin-5-phosphate 1mg:1ml Concept for Pharmacy Ltd D2-5025
UV A (370nm) light source  O/E LAND Inc NCSU033B
Beveled down custom made fiber optic  Prizmatix Ltd
26G lacrimal cannula  Beaver-visitec International Ltd.  REF581276
25G tapered hydrodelineator [Blumenthal]  Beaver-visitec International Ltd.  REF585107
13 days old rabbits Harlan  1NZWR40
Ultrasonic biometer Allergan-Humphrey 820-519
Skin marker Devon 4237101664X

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Dotan, A., Kremer, I., Gal-Or, O., Livnat, T., Zigler, A., Bourla, D., Weinberger, D. Scleral Cross-linking Using Riboflavin and Ultraviolet-A Radiation for Prevention of Axial Myopia in a Rabbit Model. J. Vis. Exp. (110), e53201, doi:10.3791/53201 (2016).

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