Summary

Un expérimental et Finite Element Protocole pour Enquêter sur la transport des solutés neutres et chargés dans Cartilage Articulaire

Published: April 23, 2017
doi:

Summary

Nous vous proposons un protocole d'enquêter sur le transport des molécules chargées et non chargées dans le cartilage articulaire à l'aide de méthodes expérimentales et numériques récemment mis au point.

Abstract

L'arthrose (OA) est une maladie débilitante qui est associée à la dégénérescence du cartilage articulaire et de l'os sous-chondral. La dégénérescence du cartilage articulaire altère sa fonction de support de charge sensiblement comme il subit une dégradation chimique considérable, à savoir la perte et la perturbation de fibrilles de collagène protéoglycane. Un bon moyen d'enquêter sur les mécanismes d'endommagement chimique au cours de l'arthrose est d'exposer les échantillons de cartilage à un soluté externe et contrôler la diffusion des molécules. Le degré de dégradation du cartilage ( à savoir la concentration et la configuration des macromolécules essentielles) est associée à la perte d'énergie de collision de solutés externes tout en se déplaçant à travers le cartilage articulaire crée différentes caractéristiques de diffusion par rapport à un cartilage sain. Dans cette étude, nous présentons un protocole, qui se compose de plusieurs étapes et est basée sur les micro-C expérimental développé précédemment14px; "> omputed T omography (micro-CT) et la modélisation par éléments finis Le transport des molécules iodées chargées et non chargées est d' abord enregistrée à l' aide de micro-CT, qui est suivie par l' application de modèles d'éléments biphasique-soluté et multiphasiques finis pour obtenir des coefficients de diffusion. et des densités de charge fixe à travers des zones de cartilage.

Introduction

Le transport moléculaire joue un rôle essentiel dans l'homéostasie des joints d' articulation, la livraison d'agents thérapeutiques pour le cartilage articulaire et de l' imagerie du cartilage contraste amélioré 1, 2, 3. Des facteurs tels que l' intégration du cartilage et intact, la charge du soluté et la taille ainsi que l' osmolalité et la concentration du bain en contact avec le cartilage peut influencer le taux de transport 4, 5, 6. Le transport de solutés, soit neutres ou chargés, peut être différente entre les zones de cartilage articulaire, parce que chaque zone est constituée de différentes concentrations et les orientations de grandes molécules de la matrice extracellulaire, à savoir les protéoglycanes (PG) et le collagène de type II 1, 7, 8, 9,lass = "xref"> 10, 11. Plus important encore , le transport des solutés charge peut être fortement dépendante de la concentration de protéoglycanes comportant des charges négatives fixes au sein de la matrice extracellulaire qui augmente à travers le cartilage articulaire 8, 9. Ces paramètres particulièrement la densité de charge fixe (FCD), l'orientation des fibrilles de collagène et de la variation de la teneur en eau dans le cartilage peuvent subir des altérations de l'arthrose (OA) progresse, signifiant ainsi l'importance d'étudier la diffusion à travers le cartilage.

Dans la présente étude, un protocole basé sur une enquête préalable des études expérimentales et informatiques établis 6, 8, 9 est proposé de précision diffusion dans différentes conditions aux limites en utilisant des solutés neutres et chargés dans un modèle bain fini de diffusion. Til a proposé des procédés de formation d'image sont composées de micro-tomographie par ordinateur (micro-CT) d'un système comprenant le cartilage et un bain-fini supporté par biphasique-soluté avancée et multiphasiques modèles d'éléments finis. Ces modèles permettent d'obtenir les coefficients de diffusion des molécules neutres et chargées, ainsi que dans diverses zones FCD du cartilage articulaire. L'utilisation de ces modèles, on peut acquérir une meilleure compréhension du comportement des molécules diffusantes neutres et chargées qui pourraient être utilisés pour étudier les interactions entre le cartilage et superposant bain fini.

Protocol

NOTE: Le protocole présenté ici est adopté des procédures expérimentales et de calcul des travaux de recherche récents 6, 8, 9. Le protocole est illustré sur la figure 1. Les matériaux cadavériques ont été recueillies avec la permission de faculté de médecine vétérinaire de l'Université d'Utrecht. 1. Préparation d'…

Representative Results

Les résultats représentatifs fournis ici sont adoptés de documents de recherche précédents 6, 8, 9, 16. Dans l' arthrose, le cartilage articulaire subit des changements importants surtout la perte GAG, et les dommages fibrillaire de collagène 17, <sup clas…

Discussion

Nous avons présenté un protocole expérimental associé à une procédure de modélisation par éléments finis pour étudier la diffusion de solutés neutres et chargés à travers le cartilage articulaire. Selon nos études récentes, les modèles proposés pourraient décrire avec précision le transport des deux solutés neutres (biphasé-soluté) et chargés négativement (multiphasique) dans les différentes zones du cartilage articulaire 8, 9. Il est la…

Declarações

The authors have nothing to disclose.

Acknowledgements

Les auteurs tiennent à exprimer leur gratitude à M. Jeroen van den Berg et M. Matthijs Wassink du groupe mécanique de développement à UMC Utrecht pour leur aide dans le processus d'emballage des bouchons ostéochondrales. Ce travail a été soutenu par une subvention de la Fondation néerlandaise de l'arthrite.

Materials

Hexabrix Guerbet 15HX005D Negatively charged contrast agent
Visipaque GE healthcare 12570511 Nuetral contrast agent
PBS Life technologies 10010023 Medium
micro-CT Perkin Elmer Monitoring diffusion
Freezing-point osmometer Advanced instruments Measuring solution osmolality

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Arbabi, V., Pouran, B., Zadpoor, A. A., Weinans, H. An Experimental and Finite Element Protocol to Investigate the Transport of Neutral and Charged Solutes across Articular Cartilage. J. Vis. Exp. (122), e54984, doi:10.3791/54984 (2017).

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