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Selezione-dipendente e generazione indipendente di CRISPR / Cas9-mediata Gene Knockouts nelle cellule di mammiferi

JoVE Journal
Genética

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Selection-dependent and Independent Generation of CRISPR/Cas9-mediated Gene Knockouts in Mammalian Cells

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Selezione-dipendente e generazione indipendente di CRISPR / Cas9-mediata Gene Knockouts nelle cellule di mammiferi

DOI:

10.3791/55903-v

•

11:35 min

•

June 16, 2017

•

Erin L. Sternburg, Kristen C. Dias, Fedor V. Karginov

¹Cell Biology and Neuroscience,University of California, Riverside

Capítulos

00:05Título
00:57Transfection of CRISPER Component into Cultured Cells and Drug Selection
02:31Isolation of Clonal Populations
03:53Screening Candidates by Dot Blot
06:30Screening Candidates by Colony PCR
08:59Results: Knockout Cell Lines Generated by Two CRISPER/Cas9 Methods
10:40Conclusion

Summary

Tadução automática

I recenti progressi nella capacità di manipolare geneticamente le linee cellulari somatiche hanno un grande potenziale per la ricerca di base e applicata. Qui presentiamo due approcci per la produzione e lo screening generati da CRISPR / Cas9 nelle linee cellulari mammiferi, con e senza l'uso di marcatori selectable.

Tags

CRISPR/Cas9 Gene Knockout Nonhomologous End Joining Homology-directed Repair T-REx-293 Cells Transfection Drug Selection Clonal Isolation

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