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Geração independente dependente da seleção e de genes independentes de CRISPR / Cas9 em células de mamíferos
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Selection-dependent and Independent Generation of CRISPR/Cas9-mediated Gene Knockouts in Mammalian Cells

Geração independente dependente da seleção e de genes independentes de CRISPR / Cas9 em células de mamíferos

DOI:
10.3791/55903-v

•

11:35 min

•

June 16, 2017

•

, ,
1Cell Biology and Neuroscience,University of California, Riverside

Capítulos

  • 00:05Título
  • 00:57Transfection of CRISPER Component into Cultured Cells and Drug Selection
  • 02:31Isolation of Clonal Populations
  • 03:53Screening Candidates by Dot Blot
  • 06:30Screening Candidates by Colony PCR
  • 08:59Results: Knockout Cell Lines Generated by Two CRISPER/Cas9 Methods
  • 10:40Conclusion

Summary

Tadução automática

Tadução automática

Os avanços recentes na capacidade de manipular geneticamente as linhas celulares somáticas possuem grande potencial para pesquisas básicas e aplicadas. Aqui, apresentamos duas abordagens para CRISPR / Cas9 gerado produção knockout e triagem em linhas de células de mamíferos, com e sem o uso de marcadores selecionáveis.

Tags

Keywords: CRISPR/Cas9Gene KnockoutNonhomologous End JoiningHomology-directed RepairT-REx-293 CellsTransfectionDrug SelectionClonal Isolation

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