Искусственного кровообращения в мышиной модели: новый подход
Summary
Этот документ описывает, как выполнять искусственного кровообращения у мышей. Эта новая модель будет способствовать изучение молекулярных механизмов, занимающихся повреждения органов.
Abstract
Как длительное искусственного кровообращения становится более важным во время кардиологических вмешательств, клинических спрос возникает для оптимизации процедуры и минимизации орган ущерба в результате длительного экстракорпоральной циркуляции. Целью этой статьи было продемонстрировать полностью функциональной и клинически значимых модель искусственного кровообращения в мыши. Мы сообщаем о дизайн устройства, оптимизация цепи перфузии и микрохирургической техники. Эта модель является острый модель, которая не совместима с выживания вследствие необходимости для нескольких рисунков крови. Из-за ряда инструментов, доступных для мышей (например, маркеры, нокауты и т.д.) Эта модель будет способствовать расследование молекулярные механизмы повреждения органов и эффект искусственного кровообращения по отношению к другой сопутствующих заболеваний.
Introduction
С момента введения искусственного кровообращения (КПБ) в клинике она сыграла важную роль в хирургии сердца1. В современной кардиохирургии длительное время КПБ имеет важное значение для выполнения обширной реконструкции аорты и комбинированных процедур. Хотя технологические достижения были огромны, использования экстракорпоральной циркуляции связан с интра – и послеоперационной системных и местный орган ущерб2,3.
Крупные животные модели были разработаны для расследования роли КПБ на физиологические процессы в4,5. Хотя эти модели представление о некоторых из КПБ ассоциированных осложнений, они являются очень дорогостоящими и молекулярных инструменты (например, антитела) весьма ограничены. Была разработана более экономичную альтернативу в мелких животных. После их разработки оптимизировать модель КПБ в крыс и кроликов5,6,,78,9были проведены многочисленные исследования. Эти модели обеспечивают хорошую основу для измерения процессов патофизиологические болезни; Однако они все еще недостаточны для расследования гуморального и клеточного иммунологии из-за отсутствия соответствующих антител и реагенты. Это ухудшает их роль в этой области исследований.
Мы недавно разработали модель мыши КПБ. Благодаря широкому выбору мыши специфические реагенты и генетически модифицированные мыши мыши модели являются в целом модель выбора для физиологических, молекулярной и иммунологических исследований10,11. Таким образом наша модель будет способствовать изучению КПБ в отношении различных сопутствующих заболеваний, как есть много мышей штаммов с клинически значимых заболеваний12,13. Соответственно этот документ описывает, в деталях, как выполнять КПБ в мышах. После глубокого дыхания и кровообращения ареста внимательно следить за кислорода и гемодинамики.
Protocol
Representative Results
Discussion
Мы разработали полностью функционирующей клинически значимых модель КПБ в мыши. С более чем тридцатью штаммов мышей, имеющих сердечно-сосудистые заболевания наша модель может быть отправной точкой для разработки новых перспективных протоколов, связанных с КПБ. Кроме того из-за множес…
Declarações
The authors have nothing to disclose.
Acknowledgements
Авторы имеют без подтверждений.
Materials
| Sterofundin | B.Braun Petzold GmbH | PZN:8609189 | priming volume, 1:1 with Tetraspan |
| Tetraspan 6% HES Solution | B. Braun Melsungen AG | PZN: 05565416 | priming volume, 1:1 with Sterofundin |
| Heparin Natrium 25.000 | Ratiopharm GmbH | PZN: 3029843 | 2.5 IU per ml of priming solution |
| NaHCO3 8,4% Solution | B. Braun Melsungen AG | PZN: 1579775 | 3% in priming solution |
| KCL 7,45 % Solution | B. Braun Melsungen AG | PZN: 2418577 | 0.1 ml for cardioplegia |
| Carprofen | Zoetis Inc., USA | PZN:00289615 08859153 | 5 mg/kg/BW |
| 1 Fr PU Catheter | Instechlabs INC., USA | C10PU-MCA1301 | carotid artery |
| 2 Fr PU Catheter | Instechlabs INC., USA | C20PU-MJV1302 | jugular vein |
| Vasofix Safety catheter 20G | B.Braun Medical | 4268113S-01 | orotracheal intubation |
| 8-0 Silk suture braided | Ashaway Line & Twine Mfg. Co., USA | 75290 | ligature |
| Isoflurane | Piramal Critical Care Deutschland GmbH | PZN:9714675 | narcosis |
| CLINITUBES blood capillaries | Radiomed GmbH | 51750132 | blood sampling 60 – 95 microliter |
| Spring Scissors – 6mm Blades | Fine Science Tools GmbH | 15020-15 | instruments |
| Spring Scissors – 2mm Blades | Fine Science Tools GmbH | 15000-03 | instruments |
| Halsted-Mosquito Hemostat | Fine Science Tools GmbH | 13009-12 | instruments |
| Dumont #55 Forceps | Fine Science Tools GmbH | 11295-51 | instruments |
| Castroviejo Micro Needle Holder – 9cm | Fine Science Tools GmbH | 12060-02 | instruments |
| Micro Serrefines | Fine Science Tools GmbH | 18555-01 | instruments |
| Bulldog Serrefine | Fine Science Tools GmbH | 18050-28 | instruments |
| MiniVent Ventilator for Mice (Model 845) | Harvard Apparatus | 73-0044 | mechanical ventilation |
| Isoflurane Vaporizer Drager 19.1 | Drägerwerk AG & Co. KGaA | anesthesia 1.3 -2.5% | |
| PowerLab data acquisition device 4/35 | ADInstruments Ltd, New Zealand | PL3504 | invasive pressure, ECG, temperature |
| ABL 800 Flex | Radiometer GmbH | blood gas analysis | |
| NMRI mice | Charles River Laboratories | Crl:NMRI(Han) | male, 30-35 g, 12 weeks old, housed at least 1 week before the experiment |
Referências
- Edmunds, L. Cardiopulmonary Bypass after 50 Years. N. Engl. J. Med. 351 (16), 1601-1603 (2004).
- Goto, T., Maekawa, K. Cerebral dysfunction after coronary artery bypass surgery. J. Anesth. 28 (2), 242-248 (2014).
- Uysal, S., Reich, D. L. Neurocognitive outcomes of cardiac surgery. J. Cardiothorac. Vasc. Anesth. 27 (5), 958-971 (2013).
- Ballaux, P. K., Gourlay, T., Ratnatunga, C. P., Taylor, K. M. A literature review of cardiopulmonary bypass models for rats. Perfusion. 14 (6), 411-417 (1999).
- Jungwirth, B., de Lange, F. Animal models of cardiopulmonary bypass: development, applications, and impact. Semin. Cardiothorac. Vasc. Anesth. 14 (2), 136-140 (2010).
- Günzinger, R., et al. A rat model of cardiopulmonary bypass with cardioplegic arrest and hemodynamic assessment by conductance catheter technique. Basic Res Cardiol. 102 (6), 508-517 (2007).
- Waterbury, T., Clark, T. J., Niles, S., Farivar, R. S. Rat model of cardiopulmonary bypass for deep hypothermic circulatory arrest. J. Thorac. Cardiovasc. Surg. 141 (6), 1549-1551 (2011).
- Schnoering, H., et al. A newly developed miniaturized heart-lung machine-expression of inflammation in a small animal model. Artif. Organs. 34 (11), 911-917 (2010).
- Kim, J., et al. The responses of tissues from the brain, heart, kidney, and liver to resuscitation following prolonged cardiac arrest by examining mitochondrial respiration in rats. Oxid. Med. Cell. Longev. 2016, (2016).
- Shappell, S. B., Gurpinar, T., Lechago, J., Suki, W. N., Truong, L. D. Chronic obstructive uropathy in severe combined immunodeficient (SCID) mice: lymphocyte infiltration is not required for progressive tubulointerstitial injury. J. Am. Soc. Nephrol. 9 (6), 1008-1017 (1998).
- Majzoub, J. A., Muglia, L. J. Knockout mice. N. Engl. J. Med. , 904-907 (1996).
- Houser, S. R., et al. Animal Models of Heart Failure A Scientific Statement From the American Heart Association. Circ. Res. 111 (1), 131-150 (2012).
- Russell, J. C., Proctor, S. D. Small animal models of cardiovascular disease: tools for the study of the roles of metabolic syndrome, dyslipidemia, and atherosclerosis. Cardiovasc. Pathol. 15 (6), 318-330 (2006).
- Iurascu-Gagea, M., Craig, S., Suckow, M. A., Stevens, K. A., Wilson, R. P. Euthanasia and necropsy. The laboratory rabbit, guinea pig, hamster, and other rodents. , 117-141 (2012).
