Circulation extracorporelle dans un modèle murin : une nouvelle approche
Summary
Cet article explique comment effectuer la circulation extracorporelle chez la souris. Ce nouveau modèle permettra de faciliter l’étude des mécanismes moléculaires impliqués dans les lésions organiques.
Abstract
Comme extracorporelle prolongée devient plus essentiel pendant les interventions cardiaques, une demande croissante de clinique se pose pour l’optimisation de la procédure et pour minimiser les lésions organiques résultant de la circulation extracorporelle prolongée. L’objectif de cette étude était de démontrer un modèle entièrement fonctionnel et cliniquement pertinent de la circulation extracorporelle chez une souris. Nous rapportons sur la conception de l’appareil, optimisation de circuit de perfusion et techniques microchirurgicales. Ce modèle est un modèle aiguë, ce qui n’est pas compatible avec la survie en raison de la nécessité de multiples dessins de sang. En raison de l’éventail d’outils disponibles pour la souris (par exemple, marqueurs, Ejecteurs, etc.), ce modèle facilitera l’enquête sur les mécanismes moléculaires de lésions organiques et l’effet de la circulation extracorporelle par rapport aux autres comorbidités.
Introduction
Depuis l’introduction d’extra-corporelle (CEC) dans la clinique, il a joué un rôle essentiel dans la chirurgie cardiaque1. En chirurgie cardiaque moderne, prolongée de la DGPC est indispensable pour effectuer des reconstructions aortiques et procédures combinées. Bien que les progrès technologiques ont été énormes, l’utilisation de la circulation extracorporelle est associée avec intra – et postopératoires systémique et endommager les organes locaux2,3.
Grands modèles animaux ont été développés pour étudier le rôle de la DGPC sur les processus physiologiques4,5. Bien que ces modèles ont fourni à l’aperçu de certains de la DGPC associés à des complications, ils sont extrêmement coûteux et outils moléculaires (p. ex. anticorps) sont très limitées. Une alternative plus rentable a été développée chez de petits animaux. Depuis leur mise au point, plusieurs études ont été menées afin d’optimiser un modèle de la DGPC aux rats et lapins5,6,7,8,9. Ces modèles fournissent une bonne base pour des mesures des processus physiopathologique de la maladie ; Cependant, ils sont encore insuffisants pour étudier l’immunologie cellulaire et humorale en raison de l’absence d’anticorps compétents et réactifs. Cela porte atteinte à leur rôle dans ce domaine de recherche.
Nous avons récemment développé un modèle murin de la DGPC. En raison d’une grande variété de réactifs spécifiques de souris et souris génétiquement modifiés, les modèles murins sont en général le modèle de choix pour les recherches physiologiques, moléculaires et immunologiques10,11. Par conséquent, notre modèle facilitera l’étude du CPB en ce qui concerne les diverses maladies concomitantes comme il existe de nombreuses souches de souris disponibles avec des maladies ayant une pertinence clinique12,13. En conséquence, le présent document explique, en détail, comment effectuer CPB chez la souris. Oxygène et paramètres hémodynamiques sont surveillés étroitement après l’arrestation de profondes respiratoire et circulatoire.
Protocol
Representative Results
Discussion
Nous avons développé un modèle ayant une pertinence clinique pleinement opérationnel de la DGPC dans une souris. Avec plus d’une trentaine de souches de souris ayant des maladies cardiovasculaires, notre modèle pourrait être un point de départ pour le développement de nouveaux protocoles éventuels associés au doryphore. En outre, en raison de la pléthore des réactifs spécifiques de souris et souris knockout-out, ce modèle ne peut pas seulement remplacer l’actuel modèle de rat de CPB mais facilitera la …
Declarações
The authors have nothing to disclose.
Acknowledgements
Les auteurs n’ont aucun remerciements.
Materials
| Sterofundin | B.Braun Petzold GmbH | PZN:8609189 | priming volume, 1:1 with Tetraspan |
| Tetraspan 6% HES Solution | B. Braun Melsungen AG | PZN: 05565416 | priming volume, 1:1 with Sterofundin |
| Heparin Natrium 25.000 | Ratiopharm GmbH | PZN: 3029843 | 2.5 IU per ml of priming solution |
| NaHCO3 8,4% Solution | B. Braun Melsungen AG | PZN: 1579775 | 3% in priming solution |
| KCL 7,45 % Solution | B. Braun Melsungen AG | PZN: 2418577 | 0.1 ml for cardioplegia |
| Carprofen | Zoetis Inc., USA | PZN:00289615 08859153 | 5 mg/kg/BW |
| 1 Fr PU Catheter | Instechlabs INC., USA | C10PU-MCA1301 | carotid artery |
| 2 Fr PU Catheter | Instechlabs INC., USA | C20PU-MJV1302 | jugular vein |
| Vasofix Safety catheter 20G | B.Braun Medical | 4268113S-01 | orotracheal intubation |
| 8-0 Silk suture braided | Ashaway Line & Twine Mfg. Co., USA | 75290 | ligature |
| Isoflurane | Piramal Critical Care Deutschland GmbH | PZN:9714675 | narcosis |
| CLINITUBES blood capillaries | Radiomed GmbH | 51750132 | blood sampling 60 – 95 microliter |
| Spring Scissors – 6mm Blades | Fine Science Tools GmbH | 15020-15 | instruments |
| Spring Scissors – 2mm Blades | Fine Science Tools GmbH | 15000-03 | instruments |
| Halsted-Mosquito Hemostat | Fine Science Tools GmbH | 13009-12 | instruments |
| Dumont #55 Forceps | Fine Science Tools GmbH | 11295-51 | instruments |
| Castroviejo Micro Needle Holder – 9cm | Fine Science Tools GmbH | 12060-02 | instruments |
| Micro Serrefines | Fine Science Tools GmbH | 18555-01 | instruments |
| Bulldog Serrefine | Fine Science Tools GmbH | 18050-28 | instruments |
| MiniVent Ventilator for Mice (Model 845) | Harvard Apparatus | 73-0044 | mechanical ventilation |
| Isoflurane Vaporizer Drager 19.1 | Drägerwerk AG & Co. KGaA | anesthesia 1.3 -2.5% | |
| PowerLab data acquisition device 4/35 | ADInstruments Ltd, New Zealand | PL3504 | invasive pressure, ECG, temperature |
| ABL 800 Flex | Radiometer GmbH | blood gas analysis | |
| NMRI mice | Charles River Laboratories | Crl:NMRI(Han) | male, 30-35 g, 12 weeks old, housed at least 1 week before the experiment |
Referências
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