Behoud van Aedes aegypti muggen geïnfecteerd met Wolbachia
Summary
Aedes aegypti muggen geïnfecteerd met Wolbachia worden vrijgegeven in natuurlijke populaties te onderdrukken van de overdracht van arboviruses. We worden methoden beschreven aan achterzijde Ae. aegypti met Wolbachia infecties in het laboratorium voor experimenten en veld release, voorzorgsmaatregelen nemen om laboratorium aanpassing en selectie te minimaliseren.
Abstract
Aedes aegypti muggen experimenteel geïnfecteerd met Wolbachia zijn in de verspreiding van arboviruses zoals dengue en chikungunya Zika-programma’s wordt gebruikt. Wolbachia-geïnfecteerde muggen kunnen worden vrijgegeven in het veld te ofwel verminderen bevolking maten door incompatibele verparingen of te transformeren van populaties met muggen die vuurvaste tot overdracht van het virus. Deze strategieën om te slagen, moeten de muggen vrijkomen in het veld van het laboratorium kunnen concurreren met inheemse muggen. Echter, behoud van de muggen in het laboratorium kan leiden tot inteelt en genetische drift laboratorium aanpassing die kan verminderen hun fitness in het veld en de resultaten van experimenten kan verwarren. Om te testen de geschiktheid van verschillende Wolbachia infecties voor implementatie in het veld, is het noodzakelijk om muggen in een gecontroleerde laboratoriumomgeving over meerdere generaties. Beschrijven we een eenvoudig protocol voor het handhaven van Ae. aegypti muggen in het laboratorium, geschikt voor beide Wolbachia is-besmette en wild-type muggen. De methoden minimaliseren laboratorium aanpassing en uitvoering outcross te verhogen van de relevantie van de experimenten aan veld muggen. Bovendien worden kolonies bijgehouden onder optimale omstandigheden te maximaliseren hun geschiktheid voor open veld releases.
Introduction
Aedes aegypti muggen zijn verantwoordelijk voor het overbrengen van enkele van de belangrijkste arboviruses in de wereld, met inbegrip van Zika, dengue en chikungunya1. Deze virussen worden een steeds ernstiger bedreiging vormt voor de gezondheid van de mondiale zoals de wijdverspreide distributie van Ae. aegypti in de tropen blijft uitbreiden van2,3,4. Vrouwelijke Ae. aegypti netcongestieproblemen voeden met menselijk bloed5 en dus de neiging om te leven dicht bij de mens, met name in stedelijke gebieden waar populaties dichtste zijn. Door deze nauwe samenwerking met de mens hebben ze ook aangepast om te broeden in kunstmatige habitat, inclusief banden, potten, dakgoten en water tanks6,7. AE. aegypti ook gemakkelijk aan te passen aan laboratorium omgevingen waar zij kunnen worden gehandhaafd zonder speciale eisen na wordt verzameld rechtstreeks uit het veld, in tegenstelling tot sommige andere soorten in de Aedes geslacht8, 9,10. Hun gemak van onderhoud ze wijd studeerde in het laboratorium in een brede waaier van velden heeft gezien, uiteindelijk gericht op het bepalen van de ziekten muggen kan doorgeven.
Traditioneel, afhankelijk arboviral controle sterk van het gebruik van insecticiden te verminderen mug populaties. Echter, er is steeds meer belangstelling in benaderingen waar gemodificeerde muggen zijn gekweekt in het laboratorium en vervolgens vrijgelaten in natuurlijke populaties. Vrijgegeven muggen kunnen genetisch gewijzigd worden11,12,13, biologisch14,15, door middel van bestraling16, chemische behandeling17,18, of met gecombineerde technieken19 onderdrukken van de bevolking van muggen of vervang ze door muggen die vuurvaste arboviral transmissie20.
Wolbachia zijn bacteriën die momenteel worden gebruikt als een agent van de biologische bestrijding voor arboviruses. Verschillende stammen van Wolbachia werden onlangs binnengebracht Ae. aegypti experimenteel met behulp van embryonale microinjection21,22,23,24. Deze stammen verminderen de capaciteit van de arboviruses te verspreiden en te repliceren in de mug, het afnemen van hun transmissie potentiële23,25,26,27,28 . Wolbachia infecties worden doorgegeven van moeder aan nakomelingen, maar bepaalde spanningen steriliteit induceren wanneer geïnfecteerde mannen met niet geïnfecteerde vrouwen22 paren. Wolbachia-geïnfecteerde mannen kunnen daarom worden vrijgegeven in grote hoeveelheden natuurlijke mug populaties, zoals onlangs is aangetoond in andere Aedes -soorten15,29te onderdrukken. Nochtans, aangezien Wolbachia ook remmen arboviral transmissie in Ae. aegypti, muggen kunnen ook worden vrijgegeven ter vervanging van de inheemse bevolking met armere vectoren. Ae. aegypti experimenteel geïnfecteerd met Wolbachia worden nu vrijgegeven in het veld in verschillende landen met behulp van deze laatste benadering14,30,31.
Wolbachia-gebaseerde benaderingen voor arboviral besturingselement afhankelijk van een goed begrip van de interacties tussen Wolbachia, de mug en het milieu. Wolbachia van nature in een breed scala van insecten, en de stammen binnengebracht muggen zijn divers in hun effecten32. Als nieuwe Wolbachia infectie typen in Ae. aegypti24worden binnengebracht, is het noodzakelijk te karakteriseren van elke stam voor hun effecten op de mug fitness, voortplanting en arboviral storing onder een aantal voorwaarden. Strenge experimenten in het laboratorium is dus vereist voor het beoordelen van het potentieel voor Wolbachia stammen om te slagen in het veld.
Open veld releases van Ae. aegypti met Wolbachia infecties kunnen vereisen vaak duizenden tot tienduizenden muggen per release zone worden gehouden elke week14,30,31. Het succes van de eerste releases kan worden verbeterd door het vrijgeven van muggen van een groot formaat om hun vruchtbaarheid33 en paring succes34,35te maximaliseren. Muggen moeten ook worden aangepast aan de omstandigheden die ze in het veld beleeft, maar op lange termijn laboratorium fokken kan er wijzigingen optreden in gedrag en fysiologie die veld prestaties36,37beïnvloeden kon, 38.
Beschrijven we een eenvoudig protocol voor het opfokken van Ae. aegypti in het laboratorium met behulp van basisuitrusting. Dit protocol is geschikt voor zowel wild-type en Wolbachia-besmette muggen, de laatste speciale aandacht vereisen kan omdat sommige Wolbachia spanningen aanzienlijke gevolgen voor de mug levensgeschiedenis traits39, hebben 40. de steigerend voorwaarden voorkomen dat overbevolking en concurrentie voor voedsel te produceren muggen met een consistent formaat, die essentieel is voor de vector competentie en fitness experimenten en zorgt ervoor dat de muggen gezond voor veld release41 zijn . Wij ook voorzorgsmaatregelen te nemen om laboratorium aanpassing en inteelt te minimaliseren door selectieve druk te verminderen en ervoor te zorgen dat de volgende generatie is gesampled uit een grote, random pool. Laboratorium omgevingen zijn duidelijk verschilt van veldomstandigheden echter, en op lange termijn onderhoud ontspannen omstandigheden kan verminderen de geschiktheid van muggen op introductie in het veld37,42,43 . Daarom steken wij vrouwtjes uit laboratorium lijnen voor veld-verzameld mannetjes regelmatig, wat resulteert in kolonies die genetisch vergelijkbaar voor experimentele vergelijkingen en die zijn aangepast aan de doelgroep veld bevolking39. De methoden vereisen geen speciale apparatuur en kunnen worden opgeschaald tot achterzijde tientallen van duizenden personen per week voor veld releases. Het protocol wordt ook de geschiktheid van muggen binnen en tussen generaties, een belangrijke overweging voor insecten die bestemd zijn voor de inrichting in natuurlijke populaties prioriteit. Het protocol is geschikt voor de meeste laboratoria die vereisen onderhoud van Ae. aegypti, met name voor experimentele vergelijkingen waar een consistente kwaliteit van muggen en relatability naar het veld zijn belangrijk.
Protocol
Representative Results
Discussion
Volgens het protocol hier gepresenteerd voor het onderhoud van Wolbachia-besmette Ae. aegypti moeten ervoor zorgen dat gezonde muggen van een constante kwaliteit worden geproduceerd voor experimenten en veld releases open. In tegenstelling tot andere protocollen die het prioriteren van de productie van massale hoeveelheden muggen (zie referentie57), zijn de methoden gericht op het maximaliseren van hun fitness, zowel binnen de generaties door ontspannen steigerend uitvoeringsvoor…
Declarações
The authors have nothing to disclose.
Acknowledgements
Wij erkennen Heng Lin Yeap, Chris Paton Petrina Johnson en Clare Doig voor hun bijdragen aan de ontwikkeling van onze kolonie onderhoud methoden en drie Anoniem reviewers voor hun suggesties die bijgedragen aan een verbetering van het manuscript. Ons onderzoek wordt ondersteund door een programma grant en de fellowship te AAH van de National Health en Medical Research Council en een vertaling van de Wellcome Trust verlenen. PAR is een ontvanger van een Australische regering onderzoek opleiding programma beurs.
Materials
| Wild type Aedes aegypti | Collected from field locations in Queensland, Australia, see Yeap and others39 for details | ||
| w Mel-infected Aedes aegypti | Provided by Monash University. Refer to Walker and others23 for information on the strain | ||
| w AlbB-infected Aedes aegypti | Provided by Monash University. Refer to Xi and others21 for information on the strain | ||
| w MelPop-infected Aedes aegypti | Provided by Monash University. Refer to McMeniman and others22 for information on the strain | ||
| Instant dried yeast | Lowan | Stimulates egg hatching. Found in general grocery stores. Other brands may be used | |
| 5 L plastic tub | Quadrant | Q110950 | Used for hatching and rearing larvae. Other products may be used |
| Fish Food (Tetramin Tropical Tablets) | Tetra | 16152 | Provided to larvae as a source of food. Web address: https://www.amazon.com/Tetra-16152-TetraMin-Tropical-10-93-Ounce/dp/B00025Z6SE |
| Plastic containers | Used for rearing larvae. Any plastic container above 500 mL should be suitable | ||
| Glass pipette | Used for transferring larvae and pupae between containers. Web address: https://www.aliexpress.com/item/10Pcs-Durable-Long-Glass-Experiment-Medical-Pipette-Dropper-Transfer-Pipette-Lab-Supplies-With-Red-Rubber-Cap/32704471109.html?spm=2114.40010308.4.2.py4Kez | ||
| Clicker counter | RS Pro | 710-5212 | Used to assist in the counting of larvae, pupae and eggs. Web address: http://au.rs-online.com/web/p/products/7105212/?grossPrice=Y |
| Rearing trays | Gratnells | Used for rearing larvae. Web address: http://www.gratnells.com | |
| Nylon mesh | Used to transfer larvae and pupae to containers of fresh water. Other brands may be used. Web address: https://www.spotlightstores.com/fabrics-yarn/specialty-apparel-fabrics/nettings-tulles/nylon-netting/p/BP80046941001-white | ||
| Cages | BugDorm | DP1000 | Houses adult mosquitoes. Alternative products may be used. Web address: http://bugdorm.megaview.com.tw/bugdorm-1-insect-rearing-cage-30x30x30-cm-pack-of-one-p-29.html |
| 35 mL plastic cup | Huhtamaki | AA272225 | Used to provide water or sucrose to adult mosquitoes. Other brands may be used |
| 35 mL plastic cup lid | Huhtamaki | GB030005 | Used to provide sucrose to adult mosquitoes. Other brands may be used |
| Cotton wool | Cutisoft | 71841-13 | Moist cotton wool is provided as a source of water to adults. Other brands may be used |
| White Sugar | Provided as a source of sugar to adult mosquitoes. Found in general grocery stores | ||
| Rope | M Recht Accessories | C323C/W | Used to provide sucrose solution to adults. Other brands may be used. Web address: https://mrecht.com.au/haberdashery/braids-cords-and-tapes/cords/plaited-cord/cotton/ |
| Plastic cup (large) | Used as an oviposition container. Any plastic cup that holds 100 mL of water should be suitable | ||
| Sandpaper | Norton Master Painters | CE015962 | Provided as an oviposition substrate. Alternative products may be used, but we use this brand because it is relatively odorless. Lighter colors are used for contrast with eggs. Web address: https://www.bolt.com.au/115mm-36m-master-painters-bulk-roll-p80-medium-p-9396.html |
| Filter paper | Whatman | 1001-150 | Used as an alternative oviposition substrate. Other brands may be used |
| Latex gloves | SemperGuard | Z560979 | Prevents mosquito bites on hands when blood feeding. Other brands may be used. Web address: http://www.sempermed.com/en/products/detail/semperguardR_latex_puderfrei_innercoated/ |
Referências
- Mayer, S. V., Tesh, R. B., Vasilakis, N. The emergence of arthropod-borne viral diseases: A global prospective on dengue, chikungunya and zika fevers. Acta Trop. 166, 155-163 (2017).
- Campbell, L. P., et al. Climate change influences on global distributions of dengue and chikungunya virus vectors. Philos Trans R Soc Lond B Biol Sci. 370 (1665), (2015).
- Kraemer, M. U., et al. The global distribution of the arbovirus vectors Aedes aegypti and Ae. albopictus. eLife. 4, (2015).
- Carvalho, B. M., Rangel, E. F., Vale, M. M. Evaluation of the impacts of climate change on disease vectors through ecological niche modelling. Bull Entomol Res. , 1-12 (2016).
- Scott, T. W., et al. Longitudinal studies of Aedes aegypti (Diptera: Culicidae) in Thailand and Puerto Rico: population dynamics. J Med Ent. 37 (1), 77-88 (2000).
- Cheong, W. Preferred Aedes aegypti larval habitats in urban areas. Bull World Health Organ. 36 (4), 586-589 (1967).
- Barker-Hudson, P., Jones, R., Kay, B. H. Categorization of domestic breeding habitats of Aedes aegypti (Diptera: Culicidae) in Northern Queensland, Australia. J Med Ent. 25 (3), 178-182 (1988).
- Watson, T. M., Marshall, K., Kay, B. H. Colonization and laboratory biology of Aedes notoscriptus from Brisbane, Australia. J Am Mosq Control Assoc. 16 (2), 138-142 (2000).
- Williges, E., et al. Laboratory colonization of Aedes japonicus japonicus. J Am Mosq Control Assoc. 24 (4), 591-593 (2008).
- Munstermann, L. E. . The Molecular Biology of Insect Disease Vectors. , 13-20 (1997).
- McDonald, P., Hausermann, W., Lorimer, N. Sterility introduced by release of genetically altered males to a domestic population of Aedes aegypti at the Kenya coast. Am J Trop Med Hyg. 26 (3), 553-561 (1977).
- Rai, K., Grover, K., Suguna, S. Genetic manipulation of Aedes aegypti: incorporation and maintenance of a genetic marker and a chromosomal translocation in natural populations. Bull World Health Organ. 48 (1), 49-56 (1973).
- Harris, A. F., et al. Field performance of engineered male mosquitoes. Nature Biotechnol. 29 (11), 1034-1037 (2011).
- Hoffmann, A. A., et al. Successful establishment of Wolbachia in Aedes populations to suppress dengue transmission. Nature. 476 (7361), 454-457 (2011).
- O’Connor, L., et al. Open release of male mosquitoes infected with a Wolbachia biopesticide: field performance and infection containment. PLoS Negl Trop Dis. 6 (11), e1797 (2012).
- Morlan, H. B. Field tests with sexually sterile males for control of Aedes aegypti. Mosquito news. 22 (3), 295-300 (1962).
- Grover, K. K., et al. Field experiments on the competitiveness of males carrying genetic control systems for Aedes aegypti. Entomol Exp Appl. 20 (1), 8-18 (1976).
- Seawright, J., Kaiser, P., Dame, D. Mating competitiveness of chemosterilized hybrid males of Aedes aegypti (L.) in field tests. Mosq News. 37 (4), 615-619 (1977).
- Zhang, D., Lees, R. S., Xi, Z., Gilles, J. R., Bourtzis, K. Combining the sterile insect technique with Wolbachia-based approaches: II- a safer approach to Aedes albopictus population suppression programmes, designed to minimize the consequences of inadvertent female release. PloS One. 10 (8), e0135194 (2015).
- McGraw, E. A., O’Neill, S. L. Beyond insecticides: new thinking on an ancient problem. Nature Rev Microbiol. 11 (3), 181-193 (2013).
- Xi, Z., Khoo, C. C., Dobson, S. L. Wolbachia establishment and invasion in an Aedes aegypti laboratory population. Science. 310 (5746), 326-328 (2005).
- McMeniman, C. J., et al. Stable introduction of a life-shortening Wolbachia infection into the mosquito Aedes aegypti. Science. 323 (5910), 141-144 (2009).
- Walker, T., et al. The wMel Wolbachia strain blocks dengue and invades caged Aedes aegypti populations. Nature. 476 (7361), 450-453 (2011).
- Joubert, D. A., et al. Establishment of a Wolbachia superinfection in Aedes aegypti mosquitoes as a ppotential approach for future resistance management. PLoS Pathog. 12 (2), e1005434 (2016).
- Ferguson, N. M., et al. Modeling the impact on virus transmission of Wolbachia-mediated blocking of dengue virus infection of Aedes aegypti. Sci Transl Med. 7 (279), 279ra237 (2015).
- Aliota, M. T., Peinado, S. A., Velez, I. D., Osorio, J. E. The wMel strain of Wolbachia Reduces Transmission of Zika virus by Aedes aegypti. Sci Rep. 6, 28792 (2016).
- van den Hurk, A. F., et al. Impact of Wolbachia on infection with chikungunya and yellow fever viruses in the mosquito vector Aedes aegypti. PLoS Negl Trop Dis. 6 (11), e1892 (2012).
- Moreira, L. A., et al. A Wolbachia symbiont in Aedes aegypti limits infection with dengue, Chikungunya, and Plasmodium. Cell. 139 (7), 1268-1278 (2009).
- Mains, J. W., Brelsfoard, C. L., Rose, R. I., Dobson, S. L. Female Adult Aedes albopictus Suppression by Wolbachia-Infected Male Mosquitoes. Sci Rep. 6, 33846 (2016).
- Nguyen, T. H., et al. Field evaluation of the establishment potential of wmelpop Wolbachia in Australia and Vietnam for dengue control. Parasit Vectors. 8, 563 (2015).
- Garcia Gde, A., Dos Santos, L. M., Villela, D. A., Maciel-de-Freitas, R. Using Wolbachia releases to estimate Aedes aegypti (Diptera: Culicidae) population size and survival. PloS One. 11 (8), e0160196 (2016).
- Hoffmann, A. A., Ross, P. A., Rašić, G. Wolbachia strains for disease control: ecological and evolutionary considerations. Evol Appl. 8 (8), 751-768 (2015).
- Briegel, H. Metabolic relationship between female body size, reserves, and fecundity of Aedes aegypti. J Insect Physiol. 36 (3), 165-172 (1990).
- Ponlawat, A., Harrington, L. C. Factors associated with male mating success of the dengue vector mosquito, Aedes aegypti. Am J Trop Med Hyg. 80 (3), 395-400 (2009).
- Segoli, M., Hoffmann, A. A., Lloyd, J., Omodei, G. J., Ritchie, S. A. The effect of virus-blocking Wolbachia on male competitiveness of the dengue vector mosquito, Aedes aegypti. PLoS Negl Trop Dis. 8 (12), e3294 (2014).
- Imam, H., Zarnigar, G., Sofi, A., Seikh, The basic rules and methods of mosquito rearing (Aedes aegypti). Trop Parasitol. 4 (1), 53-55 (2014).
- Spitzen, J., Takken, W. Malaria mosquito rearing-maintaining quality and quantity of laboratory-reared insects. Proc Neth Entomol Soc Meet. 16, 95-100 (2005).
- Lorenz, L., Beaty, B. J., Aitken, T. H. G., Wallis, G. P., Tabachnick, W. J. The effect of colonization upon Aedes aegypti susceptibility to oral infection with Yellow Fever virus. Am J Trop Med Hyg. 33 (4), 690-694 (1984).
- Yeap, H. L., et al. Dynamics of the "popcorn" Wolbachia infection in outbred Aedes aegypti informs prospects for mosquito vector control. Genética. 187 (2), 583-595 (2011).
- Turley, A. P., Moreira, L. A., O’Neill, S. L., McGraw, E. A. Wolbachia infection reduces blood-feeding success in the dengue fever mosquito, Aedes aegypti. PLoS Negl Trop Dis. 3 (9), e516 (2009).
- Yeap, H. L., Endersby, N. M., Johnson, P. H., Ritchie, S. A., Hoffmann, A. A. Body size and wing shape measurements as quality indicators of Aedes aegypti mosquitoes destined for field release. Am J Trop Med Hyg. 89 (1), 78-92 (2013).
- Leftwich, P. T., Bolton, M., Chapman, T. Evolutionary biology and genetic techniques for insect control. Evol Appl. 9 (16), 212-230 (2016).
- Calkins, C., Parker, A. . Sterile Insect Technique. , 269-296 (2005).
- Tun-Lin, W., Burkot, T., Kay, B. Effects of temperature and larval diet on development rates and survival of the dengue vector Aedes aegypti in north Queensland, Australia. Med Vet Entomol. 14 (1), 31-37 (2000).
- Richardson, K., Hoffmann, A. A., Johnson, P., Ritchie, S., Kearney, M. R. Thermal sensitivity of Aedes aegypti from Australia: empirical data and prediction of effects on distribution. J Med Ent. 48 (4), 914-923 (2011).
- Richardson, K. M., Hoffmann, A. A., Johnson, P., Ritchie, S. R., Kearney, M. R. A replicated comparison of breeding-container suitability for the dengue vector Aedes aegypti in tropical and temperate Australia. Austral Ecol. 38 (2), 219-229 (2013).
- Ross, P. A., et al. Wolbachia infections in Aedes aegypti differ markedly in their response to cyclical heat stress. PLoS Pathog. 13 (1), e1006006 (2017).
- Gjullin, C., Hegarty, C., Bollen, W. The necessity of a low oxygen concentration for the hatching of Aedes mosquito eggs. J Cell Physiol. 17 (2), 193-202 (1941).
- Axford, J. K., Ross, P. A., Yeap, H. L., Callahan, A. G., Hoffmann, A. A. Fitness of wAlbB Wolbachia infection in Aedes aegypti: parameter estimates in an outcrossed background and potential for population invasion. Am J Trop Med Hyg. 94 (3), 507-516 (2016).
- Degner, E. C., Harrington, L. C. Polyandry depends on postmating time interval in the dengue vector Aedes aegypti. Am J Trop Med Hyg. 94 (4), 780-785 (2016).
- Bentley, M. D., Day, J. F. Chemical ecology and behavioral aspects of mosquito oviposition. Ann Rev Entomol. 34 (1), 401-421 (1989).
- Wong, J., Stoddard, S. T., Astete, H., Morrison, A. C., Scott, T. W. Oviposition site selection by the dengue vector Aedes aegypti and its implications for dengue control. PLoS Negl Trop Dis. 5 (4), e1015 (2011).
- Meola, R. The influence of temperature and humidity on embryonic longevity in Aedes aegypti. Ann Entomol Soc Am. 57 (4), 468-472 (1964).
- Faull, K. J., Williams, C. R. Intraspecific variation in desiccation survival time of Aedes aegypti (L.) mosquito eggs of Australian origin. J Vector Ecol. 40 (2), 292-300 (2015).
- McMeniman, C. J., O’Neill, S. L. A virulent Wolbachia infection decreases the viability of the dengue vector Aedes aegypti during periods of embryonic quiescence. PLoS Negl Trop Dis. 4 (7), e748 (2010).
- Ross, P. A., Endersby, N. M., Hoffmann, A. A. Costs of three Wolbachia infections on the survival of Aedes aegypti larvae under starvation conditions. PLoS Negl Trop Dis. 10 (1), e0004320 (2016).
- Carvalho, D. O., et al. Mass production of genetically modified Aedes aegypti for field releases in Brazil. J Vis Exp. (83), e3579 (2014).
- Benedict, M. The first releases of transgenic mosquitoes: an argument for the sterile insect technique. Trends Parasitol. 19 (8), 349-355 (2003).
- Lee, S. F., White, V. L., Weeks, A. R., Hoffmann, A. A., Endersby, N. M. High-throughput PCR assays to monitor Wolbachia infection in the dengue mosquito (Aedes aegypti) and Drosophila simulans. Appl Environ Microbiol. 78 (13), 4740-4743 (2012).
- Corbin, C., Heyworth, E. R., Ferrari, J., Hurst, G. D. Heritable symbionts in a world of varying temperature. Heredity. 118 (1), 10-20 (2017).
- Day, J. F., Edman, J. D. Mosquito engorgement on normally defensive hosts depends on host activity patterns. J Med Ent. 21 (6), 732-740 (1984).
- Gonzales, K. K., Hansen, I. A. Artificial diets for mosquitoes. Int J Environ Res Public Health. 13 (12), (2016).
- McMeniman, C. J., Hughes, G. L., O’Neill, S. L. A Wolbachia symbiont in Aedes aegypti disrupts mosquito egg development to a greater extent when mosquitoes feed on nonhuman versus human blood. J Med Ent. 48 (1), 76-84 (2011).
- Caragata, E. P., Rances, E., O’Neill, S. L., McGraw, E. A. Competition for amino acids between Wolbachia and the mosquito host, Aedes aegypti. Microb Ecol. 67 (1), 205-218 (2014).
- Suh, E., Fu, Y., Mercer, D. R., Dobson, S. L. Interaction of Wolbachia and bloodmeal type in artificially infected Aedes albopictus (Diptera: Culicidae). J Med Entomol. , (2016).
- Thangamani, S., Huang, J., Hart, C. E., Guzman, H., Tesh, R. B. Vertical transmission of Zika virus in Aedes aegypti mosquitoes. Am J Trop Med Hyg. 95 (5), 1169-1173 (2016).
