Summary

تسجيل الضغط إينتراكافيرنوسال لتقييم وظيفة الانتصاب في القوارض

Published: June 06, 2018
doi:

Summary

تسجيل الضغط إينتراكافيرنوسال (برنامج المقارنات الدولية) وسيلة هامة لتقييم وظيفة الانتصاب الحيوانات التجريبية. هنا، يتجلى بروتوكول مفصل لإجراءات التسجيل لبرنامج المقارنات الدولية كاثيتيريزينج القضيب كرورا وثم كهربائياً تحفيز الأعصاب الكهفي في الفئران.

Abstract

ضعف الانتصاب (ED) يعرف بأنه عدم القدرة على تحقيق أو المحافظة على انتصاب من القضيب، وقد أصبح هذا اضطراب جنسي ذكور انتشارا. تستخدم القوارض بالعديد من الدراسات لبحوث علم وظائف الأعضاء/أمراض الانتصاب. يمكن تقييم وظيفة الانتصاب في القوارض بقياس الضغط إينتراكافيرنوسال (برنامج المقارنات الدولية). في الممارسة العملية، يمكن رصد برنامج المقارنات الدولية في أعقاب التحفيز الكهربائي للأعصاب الكهفي (CNs). الضغط الشرياني للشريان السباتي (متوسط الضغط الشرياني) يستخدم كالمرجع لبرنامج المقارنات الدولية. باستخدام برنامج المقارنات الدولية تسجيل البروتوكولات، ويمكن قياس العديد من المعالم الرئيسية لوظيفة الانتصاب من منحنى استجابة برنامج المقارنات الدولية. قياس برنامج المقارنات الدولية توفر معلومات أكثر من اختبار الانتصاب القضيب المستحثة apomorphine، وهو أرخص من رصد القياس البعدي القضيب spongiosum الإحضار، مما يجعل هذا الأسلوب الأكثر شعبية واحدة لتقييم وظيفة الانتصاب. ومع ذلك، مقارنة لاختبار وظيفة الانتصاب التي يسببها APO تنفيذها بسهولة، تسجيلات برنامج المقارنات الدولية الناجحة تتطلب الاهتمام بالتفاصيل، والممارسة، والتمسك بطريقة عملية. في هذا العمل، تقدم مقدمة لتسجيل برنامج المقارنات الدولية في الفئران لتكملة الإجراءات كفاءة.

Introduction

اد يعرف بأنه عدم القدرة على تحقيق أو الحفاظ انتصاب القضيب، وأصبح اضطراب جنسي ذكور مشتركة1. وتستخدم الحيوانات التجريبية وتقديم نماذج استنساخه للتحقيق في وظيفة الانتصاب2. لفترة طويلة، وقد استخدمت عدة نماذج حيوانية أكبر للتحقيق في الانتصاب3،،من45. على الرغم من قوارض صغيرة نسبيا مقارنة بغيرها من الحيوانات، كما أنها تستخدم لدراسة الانتصاب الذكور نظراً لنستعرض عدة مزايا6. أولاً، يرد موجز لها الخصائص الجنسية المورفولوجية والوظيفية للبشر في القوارض. ثانيا، بالمقارنة مع أكبر الحيوانات المستخدمة في الدراسات اد، القوارض أكثر اقتصادا لشراء منزل، والحفاظ على. نماذج القوارض المعدلة وراثيا، والثالثة توفر مزايا في الدراسات السلوكية وكذلك العصبية استنساخه واللاحقة. ولذلك، أصبحت القوارض بسرعة الحيوانات الأولية المستخدمة في هذه الدراسة من الذكور من ضعف الانتصاب.

تستفيد من خلفية وراثية نقية وظروف ثقافة متسقة، قدمت نماذج القوارض استنساخه باستمرار البيانات5،6،،من78. من بين العديد من الدراسات المتاحة ذات الصلة بجوانب كثيرة من وظائف الانتصاب، apomorphine (APO)-استجابة الانتصاب المستحث واختبار التحفيز المستحثة الكهربائية برنامج المقارنات الدولية الاستجابة هي الأساليب الأكثر استخداماً التي موثوق بها تعكس الانتصاب وظيفة9،10،،من1112. اختبار وظيفة الانتصاب التي يسببها APO، وضعتها هيتون et al. 13، هو بيو-الإنزيم الذي يستخدم هذه الظاهرة أن إدارة apomorphine الفئران يتسبب الانتصاب والتثاؤب. كسهله وموسع ومستقرة بيو-مقايسة لتقييم وظيفة الانتصاب، اختبار وظيفة الانتصاب التي يسببها APO يستخدم على نطاق واسع في العديد من الدراسات. غير أن هذا التحليل لا يعكس نوعية الانتصاب أو التغيرات الدينامية في تدفق الدم المقترن استجابة الانتصاب14. قياسات برنامج المقارنات الدولية، وضعت في البداية كوينلان et al. 15-في هذا الأسلوب، يتم وضع قسطرة في الشريان السباتي لقياس ضغط الدم النظامية، ويتم إدخال قسطرة أخرى في cavernosum الإحضار ساق لتسجيل برنامج المقارنات الدولية. قبل أو أثناء التسجيل، وعامل فعال في الأوعية و/أو تنشيط الحقل الكهربائي من العقدة الحوض الرئيسية (ميلا في الغالون) برنامج المقارنات الدولية أو CN كثيرا ما أعطيت ل الفئران14. هذا التحليل كان أداة موثوقة لتقييم العلاج والأدوية اد، وسوف يرجح أن تستخدم كأسلوب تقييم حيوي في المستقبل6.

مقارنة لاختبار وظيفة الانتصاب التي يسببها APO تنفيذها بسهولة، تسجيلات برنامج المقارنات الدولية الناجحة تتطلب الاهتمام بالتفاصيل والممارسة، والتمسك بطريقة عملية. ولذلك، هنا، نحن نقدم وصفاً مفصلاً لكيفية إجراء تسجيل برنامج المقارنات الدولية.

Protocol

عمره ثلاثة أشهر و 18 شهرا الفئران سبراغ داولي واستخدمت في هذه الدراسة. كل الحيوانات عولجت وفقا “المبادئ التوجيهية المعاهد الوطنية للصحة” لرعاية واستخدام الحيوانات المختبرية. الإجراءات التي تشمل مواضيع الحيوان أقرتها لجنة الأخلاق، ورعاية الحيوان المؤسسية المحلية مع محاولة لتقليل معاناة ا…

Representative Results

وأظهرت العديد من الدراسات أن ضعف الانتصاب في المسنين الذكور أصبحت مشكلة شائعة. ومع ذلك، يقتصر العلاج الطبي في إدارة المتصلة بالشيخوخة اد16. في نماذج القوارض من اد المتصلة بالشيخوخة، يتم اختبار العديد من العلاجات في وظيفة الانتصاب من الفئران الذين تتراوح أعم?…

Discussion

كتدبير مباشر لوظيفة الانتصاب، هو برنامج المقارنات الدولية طريقة موثوق بها14. أنها تسمح للحصول على بيانات عن القاعدية برنامج المقارنات الدولية، ذروة برنامج المقارنات الدولية، هضبة برنامج المقارنات الدولية، وقت إلى وقت الانتصاب وديتوميسسينسي، ومدة الاستجابة و ما إلى ذلك</em…

Declarações

The authors have nothing to disclose.

Acknowledgements

هذا العمل كان تدعمها “أموال البحوث الأساسية” للجامعات المركزية (020814380018، 020814380077)، مجلس المنح الدراسية الصيني (ديوان الخدمة المدنية، رقم 201606195024)، ومؤسسة العلوم الطبيعية بمقاطعة جيانغسو (BK20160138)، ومشروع مفتاح يدعمه العلم والتكنولوجيا مؤسسة التنمية، جامعة نانجينغ الطبية (2014NJMUZD053).

Materials

Animal
Rats Strain: Sprague-Dawley
Age: 2-3 month
Rats Strain: Sprague-Dawley
Age: 15-18 month
Name Company Catalog Number Comments
Reagents formula
Saline Sigma-Aldrich, S7653 dissolve 8.5 gram sodium chloride in distilled water
Pentobarbital sodium solution Sigma-Aldrich, P3761 dissolve 1 gram in 100 ml saline
Povidone-iodine BTP Pharmaceutical Co. Limited 10% (V/V)
Ethanol China National Pharmaceutical Group Corporation (SINOPHARM) 70% (V/V)
Heparin Sigma-Aldrich, H3149 dissolve 20000U heparin in 100 ml saline
Name Company Catalog Number Comments
Materials
Hypodermic needle Shandong Weigao Group Medical Polymer Co., Ltd.  23G
Syringe Shandong Weigao Group Medical Polymer Co., Ltd 10 ml
Three-way stopcock Chengdu Instrument factory TSK 01
Electrode Chengdu Instrument factory JST-1
Catheter tube Chengdu Instrument factory PE-10, PE-50
Operating scissors Shanghai operation equipment factory J22010, J22020
Ophthalmic operating scissors Shanghai operation equipment factory Y00010, Y00020
Ophthalmic forceps Shanghai operation equipment factory JD1010, JD1020
MicroScissors World Precision Instruments WAA260
silk suture Shandong Weigao Group Medical Polymer Co., Ltd.  5-0
Name Company Catalog Number Comments
Equipment
Stimulator Nanjing medease science and technology co. ltd (model 4C501H) 15 Hz, 5 ms pulse, 5 V, 60 s duration and 5 minutes interval
Multichannel signal collection processing system Nanjing medease science and technology co. ltd (model 4C501H) Blood pressure model
Pressure transducer Beijing Xin Hang Xing Ye Technology Trading Company Limited (model YP100) 40KPa

Referências

  1. . NIH Consensus Conference. Impotence. NIH Consensus Development Panel on Impotence. JAMA. 270 (1), 83-90 (1993).
  2. Chung, E., De Young, L., Brock, G. B. Investigative models in erectile dysfunction: a state-of-the-art review of current animal models. J Sex Med. 8 (12), 3291-3305 (2011).
  3. Lue, T. F., Takamura, T., Schmidt, R. A. Hemodynamics of erection in the monkey. J Urol. 130 (6), 1237-1241 (1983).
  4. Carati, C. J., Creed, K. E., Keogh, E. J. Autonomic control of penile erection in the dog. J Physiol. 384, 525-538 (1987).
  5. Steers, W. D., Mallory, B., de Groat, W. C. Electrophysiological study of neural activity in penile nerve of the rat. Am J Physiol. 254 (6 Pt 2), R989-R1000 (1988).
  6. Kapoor, M. S., Khan, S. A., Gupta, S. K. Animal models of erectile dysfunction. J Pharmacol Toxicol Methods. 76, 43-54 (2015).
  7. Burnett, A. L., Lowenstein, C. J., Bredt, D. S. Nitric oxide: A physiologic mediator of penile erection. Science. 257 (5068), 401-403 (1992).
  8. Oh, T. Y., Kang, K. K., Ahn, B. O. Erectogenic effect of the selective phosphodiesterase type 5 inhibitor, DA-8159. Arch Pharm Res. 23 (5), 471-476 (2000).
  9. Ouyang, B., Sun, X., Han, D. Human urine-derived stem cells alone or genetically-modified with FGF2 Improve type 2 diabetic erectile dysfunction in a rat model. PLoS One. 9 (3), e92825 (2014).
  10. Pan, F., Xu, J., Zhang, Q. Identification and characterization of the MicroRNA profile in aging rats with erectile dysfunction. J Sex Med. 11 (7), 1646-1656 (2014).
  11. Cho, M. C., Park, K., Kim, S. W. Restoration of erectile function by suppression of corporal apoptosis, fibrosis and corporal veno-occlusive dysfunction with rho-kinase inhibitors in a rat model of cavernous nerve injury. J Urol. 193 (5), 1716-1723 (2015).
  12. Hannan, J. L., Matsui, H., Sopko, N. A. Caspase-3 dependent nitrergic neuronal apoptosis following cavernous nerve injury is mediated via RhoA and ROCK activation in major pelvic ganglion. Sci Rep. 6, 29416 (2016).
  13. Heaton, J. P., Varrin, S. J., Morales, A. The characterization of a bio-assay of erectile function in a rat model. J Urol. 145 (5), 1099-1102 (1991).
  14. Mehta, N., Sikka, S., Rajasekaran, M. Rat as an animal model for male erectile function evaluation in sexual medicine research. J Sex Med. 5 (6), 1278-1283 (2008).
  15. Quinlan, D. M., Nelson, R. J., Partin, A. W. The rat as a model for the study of penile erection. J Urol. 141 (3), 656-661 (1989).
  16. Albersen, M., Orabi, H., Lue, T. F. Evaluation and treatment of erectile dysfunction in the aging male: A mini-review. Gerontology. 58 (1), 3-14 (2012).
  17. Hedlund, P., Matsumoto, K., Andersson, K. -. E. Animal Models of Erectile Dysfunction. Curr Prot Pharmacol. 29, 5.41.1-5.41.22 (2005).
  18. Giuliano, F., Bernabe, J., Rampin, O. Telemetric monitoring of intracavernous pressure in freely moving rats during copulation. J Urol. 152 (4), 1271-1274 (1994).
  19. Bernabe, J., Rampin, O., Giuliano, F. Intracavernous pressure changes during reflexive penile erections in the rat. Physiol Behav. 57 (5), 837-841 (1995).
  20. Bernabe, J., Rampin, O., Sachs, B. D. Intracavernous pressure during erection in rats: an integrative approach based on telemetric recording. Am J Physiol. 276 (2 Pt 2), R441-R449 (1999).
  21. Adachi, H., Kodama, K., Ishihara, H. Evaluation of erectile response by continuous measurement of penile diameter in rats. J Pharmacol Toxicol Methods. 41 (4), 147-152 (1999).
check_url/pt/56798?article_type=t

Play Video

Citar este artigo
Pan, F., Zhang, J., Liu, Y., Lu, L., Qiu, X., Lv, K., Zhang, Q. Intracavernosal Pressure Recording to Evaluate Erectile Function in Rodents. J. Vis. Exp. (136), e56798, doi:10.3791/56798 (2018).

View Video