Summary

Synthese von Multi-walled Carbonnanotubes mit Silber-Nanopartikeln und Bewertung ihrer antibakteriellen Aktivitäten und zytotoxische Eigenschaften modifiziert

Published: May 10, 2018
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Summary

In dieser Studie wurden antimikrobielle Nanomaterialien durch saure Oxidation von Multiwalled Carbonnanotubes und anschließende reduktive Abscheidung von Silber-Nanopartikeln synthetisiert. Antimikrobielle Aktivität und Zytotoxizität Tests wurden durchgeführt mit Nanomaterialien als vorbereitet.

Abstract

In dieser Studie wurden mit einer wässrigen Schwefelsäure-Lösung zu einer Sauerstoff-basierte Sachgruppe bilden Multi-walled Carbonnanotubes (MWCNTs) behandelt. Silber MWCNTs wurden von der reduktiven Abscheidung von Silber aus einer wässrigen Lösung von AgNO3 auf die oxidierte MWCNTs vorbereitet. Die einzigartige Farbe der CNTs war es nicht möglich, auf der minimalen inhibitorischen Konzentration oder mitochondriale Toxizität Assays, die Toxizität und antibakterielle Eigenschaften, zu bewerten, da sie die Assays behinderen würde anzuwenden. Die Hemmung Zone und minimale bakterizide Konzentration für die Ag-MWCNTs wurden gemessen und Live/Dead und Trypan blau-Assays wurden verwendet, um die Toxizität und antibakterielle Eigenschaften zu messen, ohne die Farbe der CNTs zu stören.

Introduction

Das ultimative Ziel dieser Studie ist zu umweltfreundlichen antibakteriellen Nanomaterialien, die das Wachstum von Bakterien hemmen können diese Form Biofilmen. Diese antibakteriellen Nanomaterialien haben das Potenzial, die Toxizität und Antibiotikum Resistenzprobleme von häufig verwendeten Chemikalien oder Antibiotika chemischer Verbindungen zu überwinden. Ein Biofilm ist eine hydratisierte extrazellulären Polymeren Substanz (EPS), die besteht aus Polysacchariden, Proteinen, Nukleinsäuren und Lipiden1,2. Biofilme verhindern das Eindringen von Fremdstoffen und helfen Bakterien3,4kräftig wachsen. Biofilme verursachen Geruch und chronische Infektionskrankheiten5,6. Methylobacterium Spp., zum Beispiel, wächst durch das Festhalten an Orten, wo immer Wasser vorhanden ist oder ist es schwierig, bakterielle Beseitigung auf einer kontinuierlichen Basis, wie z. B. Klimaanlage Wärmetauscher, Duschräume und medizinische Geräte zu gewährleisten. Diese Arten von Biofilmen auslösen Geruch und chronische Infektionskrankheiten5,6.

Normalerweise sind Chemikalien oder Antibiotika chemischen Verbindungen verwendet, um das Wachstum von Bakterien hemmen, die Biofilme bilden. Die Entstehung von Antibiotika-resistenten Bakterien und Sicherheitsbedenken in Vivo von Chemikalien fahren die Notwendigkeit zur Entwicklung neuer Materialien, um die Bildung von Biofilmen zu verhindern und das Wachstum von Bakterien hemmen.

In dieser Studie werden antimikrobielle Nanomaterialien synthetisiert, die frei von Antibiotika-Resistenz und Toxizität sind. Silber ist ein bekannter antimikrobieller Wirkstoff, und jüngste Entwicklungen im Bereich der Nanowissenschaften und Nanotechnologie führten zu aktive Forschung in die antimikrobielle Wirkung von Metall-Nanopartikeln7,8. Jüngste Studien haben berichtet, dass die geringe Größe und hohe Oberflächen-Volumen-Verhältnisses der Nanopartikel erhöhte antibakterielle Aktivität9,10,11führen.

Die enthaltenen Nanomaterialien kombinieren Silber-Nanopartikel mit erhöhten antimikrobielle Eigenschaften und Kohlenstoff-Nanoröhrchen mit einem hohen Seitenverhältnis, wodurch sich die Fläche pro Volumeneinheit. Die fabrizierten Silber Nanopartikel-Carbon-Nanotube-Composite weist beträchtliche antimikrobielle Eigenschaften und minimale Toxizität für menschlichen und tierischen Zellen. Die synthetischen Prozesse in früheren Studien verwenden gefährlicher Reduktionsmittel wie NaBH4, Formamid, Dimethylformamid und Hydrazin. Der Prozess ist kompliziert, gefährlich und zeitaufwendig. Das synthetische Verfahren berichtet verwendet hier Ethanol als deutlich weniger gefährlichen Reduktionsmittel.

Die Hemmung Zone und minimale bakterizide Konzentration (MBC) für die Ag-MWCNTs wurden gemessen; Lebenden/Toten und Trypan blau-Assays wurden zur Toxizität und antibakteriellen Eigenschaften zu messen. Minimalen inhibitorischen Konzentration (MIC) und mitochondriale Toxizität (MTT) Assays wurden nicht durch die ungewöhnliche Farbe der Kohlenstoff-Nanoröhren durchgeführt, die mit der Assays gestört haben würde. Zu guter Letzt wurde die minimale Konzentration zu verhindern das Wachstum von Methylobacterium spp. ohne Säugetier-Zellen bestimmt.

Protocol

1. MWCNT Oxidation 30-50 mg MWCNT in ein 50-mL-Fläschchen zu messen. Fügen Sie langsam 8 mL eines H2SO4: Druckaufschluss3 Lösung (90 % der Ausgangskonzentration, 3:1 Vol/Vol) mit Pipette mit 1 mL Pipettenspitzen.Achtung: Dieses Präparat muss in einem chemischen Abzug durchgeführt werden. Lassen Sie 30 min für die exotherme Reaktion abschließen. Beschallen Sie die Lösung bei 60-80 ° C und 160 W für 1 h bis MWCNT an der Unterseite der F…

Representative Results

Transmission Electron Microscopy (TEM) Bilder bestätigen die Bildung der Ag-MWCNTs (Abb. 1A und 1 b). Ihre gelungene Synthese wurde durch die Veränderung der Oberflächenladung bestätigt. Die Größe der Ag Partikel lagern sich auf der MWCNTs wurde ermittelt (Abbildung 1). Die mittlere Teilchengröße war ca. 3,83 nm. Das XRD-Muster der als synthetisiert Ag-MWCNTs ist in Abbildung 1</stro…

Discussion

Hier berichten wir über eine einfache Methode zur Herstellung von MWCNTs mit hinterlegten Ag Nanopartikel. Diese silberhaltigen Nanomaterial zeigt erhebliche antibakterielle Aktivität und minimalen Potenzial für unkontrollierte Aufnahme von Silber-Nanopartikeln in den Körper. Wir zeigen, dass 30 µg/mL der synthetisierten Ag-MWCNTs ist eine wirksame antibakterielle Aktivität gegen Methylobacterium spp. mit vernachlässigbar Zytotoxizität für Leber Säugerzellen. Obwohl zusätzliche Verbesserungen und biol…

Declarações

The authors have nothing to disclose.

Acknowledgements

Diese Studie wurde unterstützt durch Chung-Ang University Research Grants (2016) und durch das Nano-Material Technology Development Program durch die National Research Foundation von Korea(NRF) gefördert durch das Ministerium für Wissenschaft und IKT (Nr. 2017M3A7B8061942).

Materials

0.1 N silver nitrate SIGMA-ALDRICH 1090811000
Carbon nanotube, multi-walled Tokyo Chemical Industry Co., LTD 308068-56-6
R2A agar MBcell MB-R1129
R2A broth MBcell MB-R2230
Methylobacterium spp. KCTC 12618 from Korea Collection for Type Cultures Daejeon Korea 12618, Daejon, Korea
LIVE/DEAD Cell imaging Kit ThermoFisher SCIENTIFIC R37601
AML12 from Chungnam University, Dajeon, Korea
human PBMC ATCC PCS-800-011
TEM JEOL JEM-2100F
XRD Rigaku D/MAX 2500 Cu K photon source (40kV, 100mA)
JuLI Br NanoEnTek JULI-BRSC 

Referências

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Citar este artigo
Seo, Y., Park, C., Son, J., Lee, K., Hwang, J., Jo, Y., Lee, D., Khan, M. S., Chavan, S. G., Choi, Y., Kim, D., Gilad, A. A., Choi, J. Synthesis of Multi-walled Carbon Nanotubes Modified with Silver Nanoparticles and Evaluation of Their Antibacterial Activities and Cytotoxic Properties. J. Vis. Exp. (135), e57384, doi:10.3791/57384 (2018).

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