डॉक्सोरूबिसिन के Retrobulbar इंजेक्शन द्वारा चूहों में नेफ्रोटिक सिंड्रोम की प्रेरण और निरंतर रिलीज Aprotinin द्वारा मात्रा प्रतिधारण की रोकथाम
Summary
यहां, हम डॉक्सोरूबिसिन के रैपिड retrobulbar इंजेक्शन द्वारा 129S1/SvImJ चूहों में प्रयोगात्मक नेफ्रोटिक सिंड्रोम की प्रेरण का वर्णन । हम भी निरंतर जारी छर्रों aprotinin युक्त मूत्र serine को रोकना गतिविधि और सोडियम प्रतिधारण को रोकने के साथ नेफ्रोटिक चूहों का इलाज ।
Abstract
नेफ्रोटिक सिंड्रोम proteinuric गुर्दे की बीमारी का सबसे चरम अभिव्यक्ति है और भारी proteinuria, hypoalbuminemia, और सोडियम प्रतिधारण और hyperlipidemia के कारण सूजन की विशेषता है । इस सिंड्रोम के pathophysiology का अध्ययन करने के लिए, डॉक्सोरूबिसिन जैसे विषाक्त पदार्थों के इंजेक्शन के आधार पर कुतर मॉडलों को विकसित किया गया है जिससे podocyte क्षति होती है । चूहों में, केवल कुछ उपभेदों इस मॉडल के लिए अतिसंवेदनशील होते हैं । wildtype 129S1/SvImJ चूहों में, retrobulbar साइनस करने के लिए तेजी से नसों इंजेक्शन द्वारा डॉक्सोरूबिसिन के प्रशासन प्रयोगात्मक नेफ्रोटिक सिंड्रोम कि सुविधाओं सोडियम प्रतिधारण और शोफ सहित मानव रोग के सभी लक्षण । proteinuria की शुरुआत के बाद, चूहों उपकला सोडियम चैनल (ENaC) और सोडियम प्रतिधारण के सक्रियण की ओर जाता है कि मूत्र serine की चिढ़ा गतिविधि में वृद्धि प्रदर्शित करता है. निरंतर रिलीज aprotinin abrogates ENaC सक्रियण के साथ उपचार के द्वारा मूत्र serine के औषधीय निषेध और सोडियम प्रतिधारण रोकता है । यह मॉडल proteasuria के pathophysiology का अध्ययन करने के लिए आदर्श है, यानी, सक्रिय serine के उत्सर्जन कि अपनी प्रोटियोलिसिस-उप इकाई के γ द्वारा सक्रियण ENaC कारण है । यह proteinuric गुर्दे की बीमारी में ENaC सक्रियण और सोडियम प्रतिधारण की प्राथमिक तंत्र के रूप में माना जा सकता है ।
Introduction
नेफ्रोटिक सिंड्रोम भारी proteinuria, hypoalbuminemia, शोफ और hyperlipidemia की विशेषता है, और proteinuric गुर्दे की बीमारी का सबसे चरम अभिव्यक्ति के रूप में माना जा सकता है । कुतर में, प्रयोगात्मक नेफ्रोटिक सिंड्रोम anthracyclines या puromycin के एकल इंजेक्शन द्वारा प्रेरित किया जा सकता है जो podocyte नुकसान की ओर जाता है और मानव न्यूनतम परिवर्तन रोग और फोकल फॉल्ट glomerulosclerosis (FSGS)1जैसा दिखता है । Frenk एट अलद्वारा १९५५ में अपनी पहली विवरण के बाद । चूहों में 2, puromycin nucleoside nephrosis (पैन) कई अध्ययनों में नेफ्रोटिक सिंड्रोम के pathophysiology की जांच करने के लिए एक मानक मॉडल बन गया है3,4,5,6. चूहों में, इसी मॉडल anthracycline डॉक्सोरूबिसिन द्वारा प्रेरित किया जा सकता है7. हालांकि, वहां है एक मजबूत तनाव निर्भरता है कि आनुवंशिक रूप से निर्धारित किया जाता है कम से कम दो आनुवंशिक loci8। इसके अलावा, proteinuric प्रतिक्रिया और नेफ्रोटिक सिंड्रोम9,10के पाठ्यक्रम में मतभेद हैं । 129S1/SvImJ चूहों और retrobulbar साइनस के माध्यम से डॉक्सोरूबिसिन के तेजी से नसों में इंजेक्शन का उपयोग करना, proteinuria प्रतिक्रियाओं नेफ्रोटिक सिंड्रोम की विशिष्ट सुविधाओं को प्रेरित करने के लिए पर्याप्त हैं कि मूल्यों तक पहुँचने, विशेष रूप से मात्रा प्रतिधारण द्वारा विशेषता जलोदर और लगभग सोडियम मुक्त मूत्र7। प्रयोगात्मक नेफ्रोटिक सिंड्रोम में सोडियम प्रतिधारण aberrantly अपनी serine-उपइकाई 4 के कारण plasmin के रूप में प्रोटियोलिसिस फ़िल्टर्ड γ के रूप में इस तरह के बाहर tubule में उपकला सोडियम चैनल (ENaC) के सक्रियकरण का परिणाम होना माना गया है ,11,12. हाल ही में, इस अवधारणा नेफ्रोटिक चूहों जो proteolytic ENaC अवरोधक aprotinin के रूप में समान रूप से प्रभावी था serine के साथ उपचार द्वारा सक्रियण और सोडियम प्रतिधारण से सुरक्षित थे में सिद्ध किया गया था ENaC ब्लॉकर amiloride13। बाहर tubule के लिए सतत वितरण सुनिश्चित करने के लिए, aprotinin के माध्यम से प्रशासित किया गया था के द्वारा संचालित निरंतर रिलीज छर्रों । भविष्य के अध्ययन के लिए serine है कि नेफ्रोटिक सिंड्रोम जो मानव स्थिति समानांतर सोचा है में proteolytic ENaC सक्रियण के लिए जिंमेदार है की पहचान की आवश्यकता है । इस प्रयोजन के लिए, डॉक्सोरूबिसिन प्रेरित नेफ्रोटिक सिंड्रोम एक मूल्यवान मॉडल है कि जंगली प्रकार चूहों में इस्तेमाल किया जा सकता है या आनुवंशिक रूप से इंजीनियर चूहों के लिए विस्तारित है । इसके फायदों में दवा की कम लागत, प्रबंधन की कम जटिलता और गुड reproducibility14शामिल हैं ।
इस अनुच्छेद में, हम डॉक्सोरूबिसिन के retrobulbar साइनस और निरंतर रिलीज छर्रों युक्त aprotinin मूत्र serine को बाधित करने के आरोपण के लिए तेजी से नसों में इंजेक्शन द्वारा प्रयोगात्मक नेफ्रोटिक सिंड्रोम की प्रेरण प्रदर्शित गतिविधि के रूप में एक chromogenic परख के साथ मापा ।
Protocol
Representative Results
Discussion
यहाँ, हम retrobulbar साइनस इंजेक्शन के माध्यम से डॉक्सोरूबिसिन इंजेक्शन SvImJ, सोडियम प्रतिधारण, proteinuria और hypoalbumenia के साथ 129S1/hyperlipidemia चूहों में प्रयोगात्मक नेफ्रोटिक सिंड्रोम लाती है कि प्रदर्शित करता है । हालांकि, इस मॉ…
Disclosures
The authors have nothing to disclose.
Acknowledgements
यह अध्ययन जर्मन रिसर्च फाउंडेशन (DFG, AR 1092/2-1) से अनुदान द्वारा समर्थित था ।
Materials
| supplies | |||
| BD Micro FINE + U-40 (0.30 mm x 8 mm) | BD Deutschland GmbH, Heidelberg, Germany | PZN: 07468060 | syring |
| ETHILON*II (5/0, 16 mm, 3/8c, 45 cm) | Johnson&Johnson Medical GmbH, Ethicon Deutschland, Norderstedt, Germany) | EH7823H | suture |
| Name | Company | Catalog Number | Comments |
| reagents | |||
| aprotinin (6000 KIU/mg) | LOXO, Heidelberg, Germany | CAS 9087-70-1 | |
| Bepanthen, Augen- und Nasensalbe | Bayer Vital GmbH, Leverkusen, Germany | PZN: 1578681 | ointment |
| Chromogenix S-2251 | HAEMOCHROM DIAGNOSTICA GmbH, Essen, Germany | 82 0332 39 | chromogenic substrate |
| doxorubicin (2.0 µg/µL) | Cell Pharm, Bad Vilbel, Germany | CAS 25316-40-9 | doxorubicin |
| isofluran CP (1 mL/mL) | CP-Pharma, Burgdorf, Germany | CAS 26675-46-7 | isofluran |
| pellets with matrix-driven sustained release (custom-made) | Innovative Research of America, Sarasota, FL | X-999 | pellet |
| Name | Company | Catalog Number | Comments |
| equipment | |||
| ELx808 Absorbance Mikroplate Reader | BioTek, Bad Friedrichshall, Germany | ELx808 | microplate reader |
| MICROSTERIL – 436 | B.M.S., Trescore Balneario, Italy | GAL/436 | sterilizer |
| Hybridization oven/shaker | GE Healthcare UK Limited, Amersham LIFE SCIENCE, Little Chalfont, UK | RPN 2511 | heat chamber |
| Thermo MAT Pro 10 W, 15×25 cm, Lucky Reptile | Import Export Peter Hoch GmbH, Waldkirch, Germany | 61201 | mouse warming device |
References
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