Doksorubisin Retrobulbar enjeksiyon ve Önleme Birimi kalıcılık tarafından sürekli yayın Aprotinin farelerde Nefrotik sendromda indüksiyon
Summary
Burada, 129S1/SvImJ farelerde deneysel Nefrotik sendromda indüksiyon doksorubisin hızlı retrobulbar enjeksiyonu ile açıklayın. Ayrıca Nefrotik fareler sürekli yayın granül içeren aprotinin idrar serin proteaz aktivitesi inhibe ve sodyum saklama önlemek için tedavi ediyoruz.
Abstract
Nefrotik sendrom proteinuric böbrek hastalığı en uç tezahürü ve ödem sodyum retansiyonu ve hiperlipidemi nedeniyle ağır Proteinüri ve hipoalbüminemi ile karakterize. Bu sendrom Patofizyoloji çalışmaya, podocyte zarar doksorubisin gibi toksik maddelerin enjeksiyonu modelleri geliştirilmiştir kemirgen dayalı. Farelerde, sadece birkaç suş bu model için açıktır. Wildtype 129S1/SvImJ fareler, doksorubisin retrobulbar sinüs için hızlı intravenöz enjeksiyonla yönetim özellikleri insan hastalık sodyum retansiyonu ve ödem de dahil olmak üzere tüm belirtiler deneysel Nefrotik Sendromu neden olmaktadır. Proteinüri başlangıcı sonra fareler sergi epitel sodyum kanalı (ENaC) ve sodyum saklama harekete geçirmek yol açar idrar serin proteaz aktivitesi arttı. Farmakolojik idrar serin proteaz sürekli yayın aprotinin tedaviyle tarafından inhibisyonu ENaC harekete geçirmek abrogates ve sodyum saklama engeller. Bu model proteasuria, YaniPatofizyoloji çalışmaya idealdir., onun γ alt birim proteolizis tarafından ENaC harekete geçirmek neden aktif serin proteaz atılımı. Bu ENaC harekete geçirmek ve sodyum saklama proteinuric böbrek hastalığında birincil mekanizması olarak kabul edilebilir.
Introduction
Nefrotik sendrom ağır Proteinüri, hipoalbüminemi, ödem ve hiperlipidemi ile karakterizedir ve proteinuric böbrek hastalığı en uç tezahürü kabul edilebilir. Kemirgen, deneysel Nefrotik sendrom tarafından anthracyclines veya podocyte hasara yol açar ve insan minimal değişiklik hastalığı ve Fokal segmental glomerulosclerosis (FSGS)1benzer puromisindir tek enjeksiyon bağlı olmak. Frenk ve arktarafından 1955 yılında ilk açıklamasını sonra. 2, Sıçanlarda puromisindir nükleozit nefroz (PAN) çok sayıda çalışmalar3,4,5,6Nefrotik sendromda patofizyolojisi araştırmak için standart bir model haline gelmiştir. Farelerde, karşılık gelen modeli Antrasiklin doksorubisin7tarafından indüklenen. Ancak, genetik olarak en az iki genetik loci8tarafından belirlenir güçlü bir zorlanma-bağımlılık vardır. Buna ek olarak, proteinuric yanıt ve nefrotik sendrom9,10tabii farklılıklar vardır. 129S1/SvImJ fare ve doksorubisin hızlı intravenöz enjeksiyon yolu ile retrobulbar sinüs kullanılarak, Proteinüri yanıt Nefrotik sendromu, özellikle cilt saklama ile karakterize tipik özelliklerini ikna etmek yeterli olan değerleri ulaşmak asit ve idrar neredeyse sodyum ücretsiz7. Deneysel Nefrotik sendrom sodyum saklama etkinleştirme distal tübül epitel sodyum kanalının (ENaC) sonucu aberrantly süzülmüş serin proteaz proteolizis bir onun γ-alt birimi4 neden plasmin gibi tarafından olduğu tahmin ,11,12. Son zamanlarda, bu kavram proteolitik ENaC harekete geçirmek ve sodyum saklama ENaC engelleyici amiloride13eşit derecede etkili serin proteaz inhibitörü aprotinin tedaviyle tarafından korunan Nefrotik farelerde kanıtlanmış oldu. Distal tübül için sürekli teslim edilmesini sağlamak için aprotinin subkutan implante sürekli yayın topakları yönetiliyordu. Gelecekteki çalışmaları insan durum paralel düşünülmektedir Nefrotik Sendromu proteolitik ENaC harekete geçirmek için sorumludur serin proteaz tanımlamak için gereklidir. Bu amaçla, Nefrotik sendrom doksorubisin kaynaklı vahşi tipi fareler kullanılan veya genetik fareler için genişletilmiş değerli bir modeldir. Avantajları ilacın düşük maliyet, düşük karmaşıklık yönetimi ve iyi tekrarlanabilirlik14içerir.
Bu makalede, biz doksorubisin retrobulbar sinüs için hızlı intravenöz enjeksiyon ve implantasyon sürekli yayın pellet aprotinin idrar serin proteaz inhibe içeren tarafından deneysel Nefrotik sendromda indüksiyon göstermek chromogenic bir tahlil ile ölçülen aktivite.
Protocol
Representative Results
Discussion
Burada, doksorubisin enjeksiyon retrobulbar sinüs enjeksiyon yolu ile Proteinüri, sodyum retansiyonu, hypoalbumenia ve hiperlipidemi ile 129S1/SvImJ farelerde deneysel Nefrotik sendrom indükler göstermektedir. Ancak, bu model kullanırken dikkate alınması gereken iki önemli sorun vardır. İlk olarak, model indüksiyon kesinlikle doz bağımlı ve sapmalar doksorubisin doz 0.3 µg/g küçük fareler15yanıt etkiler. İle 14 µg/g gibi daha düşük bir dozda enjekte edildiğinde bw veya aş…
Disclosures
The authors have nothing to disclose.
Acknowledgements
Bu çalışmada bir hibe (DFG, AR 1092/2-1) Alman Araştırma Vakfı tarafından desteklenmiştir.
Materials
| supplies | |||
| BD Micro FINE + U-40 (0.30 mm x 8 mm) | BD Deutschland GmbH, Heidelberg, Germany | PZN: 07468060 | syring |
| ETHILON*II (5/0, 16 mm, 3/8c, 45 cm) | Johnson&Johnson Medical GmbH, Ethicon Deutschland, Norderstedt, Germany) | EH7823H | suture |
| Name | Company | Catalog Number | Comments |
| reagents | |||
| aprotinin (6000 KIU/mg) | LOXO, Heidelberg, Germany | CAS 9087-70-1 | |
| Bepanthen, Augen- und Nasensalbe | Bayer Vital GmbH, Leverkusen, Germany | PZN: 1578681 | ointment |
| Chromogenix S-2251 | HAEMOCHROM DIAGNOSTICA GmbH, Essen, Germany | 82 0332 39 | chromogenic substrate |
| doxorubicin (2.0 µg/µL) | Cell Pharm, Bad Vilbel, Germany | CAS 25316-40-9 | doxorubicin |
| isofluran CP (1 mL/mL) | CP-Pharma, Burgdorf, Germany | CAS 26675-46-7 | isofluran |
| pellets with matrix-driven sustained release (custom-made) | Innovative Research of America, Sarasota, FL | X-999 | pellet |
| Name | Company | Catalog Number | Comments |
| equipment | |||
| ELx808 Absorbance Mikroplate Reader | BioTek, Bad Friedrichshall, Germany | ELx808 | microplate reader |
| MICROSTERIL – 436 | B.M.S., Trescore Balneario, Italy | GAL/436 | sterilizer |
| Hybridization oven/shaker | GE Healthcare UK Limited, Amersham LIFE SCIENCE, Little Chalfont, UK | RPN 2511 | heat chamber |
| Thermo MAT Pro 10 W, 15×25 cm, Lucky Reptile | Import Export Peter Hoch GmbH, Waldkirch, Germany | 61201 | mouse warming device |
References
- Lee, V. W., Harris, D. C. Adriamycin nephropathy: a model of focal segmental glomerulosclerosis. Nephrology (Carlton). 16 (1), 30-38 (2011).
- Frenk, S., Antonowicz, I., Craig, J. M., Metcoff, J. Experimental nephrotic syndrome induced in rats by aminonucleoside; renal lesions and body electrolyte composition. Proc Soc Exp Biol Med. 89 (3), 424-427 (1955).
- Ichikawa, I., et al. Role for intrarenal mechanisms in the impaired salt excretion of experimental nephrotic syndrome. J Clin Invest. 71, (1983).
- Deschenes, G., Wittner, M., Stefano, A., Jounier, S., Doucet, A. Collecting duct is a site of sodium retention in PAN nephrosis: a rationale for amiloride therapy. J Am Soc Nephrol. 12 (3), 598-601 (2001).
- Lourdel, S., et al. Hyperaldosteronemia and activation of the epithelial sodium channel are not required for sodium retention in puromycin-induced nephrosis. J Am Soc Nephrol. 16 (12), 3642-3650 (2005).
- Seigneux, S., Kim, S. W., Hemmingsen, S. C., Frokiaer, J., Nielsen, S. Increased expression but not targeting of ENaC in adrenalectomized rats with PAN-induced nephrotic syndrome. Am J Physiol Renal Physiol. 291 (1), F208-F217 (2006).
- Artunc, F., et al. Serum- and glucocorticoid-inducible kinase 1 in doxorubicin-induced nephrotic syndrome. Am J Physiol Renal Physiol. 295 (6), F1624-F1634 (2008).
- Zheng, Z., et al. A Mendelian locus on chromosome 16 determines susceptibility to doxorubicin nephropathy in the mouse. Proc Natl Acad Sci U S A. 102 (7), 2502-2507 (2005).
- Kimura, M., et al. Interstrain differences in murine daunomycin-induced nephrosis. Nephron. 63 (2), 193-198 (1993).
- Wang, Y., Wang, Y. P., Tay, Y. C., Harris, D. C. Progressive adriamycin nephropathy in mice: sequence of histologic and immunohistochemical events. Kidney Int. 58 (4), 1797-1804 (2000).
- Svenningsen, P., et al. Plasmin in nephrotic urine activates the epithelial sodium channel. Journal of the American Society of Nephrology : JASN. 20 (2), 299-310 (2009).
- Passero, C. J., Hughey, R. P., Kleyman, T. R. New role for plasmin in sodium homeostasis. Curr Opin Nephrol Hypertens. 19 (1), 13-19 (2010).
- Bohnert, B. N., et al. Aprotinin prevents proteolytic epithelial sodium channel (ENaC) activation and volume retention in nephrotic syndrome. Kidney Int. 93 (1), 159-172 (2018).
- Pippin, J. W., et al. Inducible rodent models of acquired podocyte diseases. Am J Physiol Renal Physiol. 296 (2), F213-F229 (2009).
- Bohnert, B. N., et al. Impact of phosphorus restriction and vitamin D-substitution on secondary hyperparathyroidism in a proteinuric mouse model. Kidney Blood Press Res. 40 (2), 153-165 (2015).
- Morton, D. B., Griffiths, P. H. Guidelines on the recognition of pain, distress and discomfort in experimental animals and an hypothesis for assessment. Vet Rec. 116 (16), 431-436 (1985).
- Beath, S. M., et al. Plasma aprotinin concentrations during cardiac surgery: full- versus half-dose regimens. Anesth Analg. 91 (2), 257-264 (2000).
- Kanter, P. M., et al. Preclinical toxicology study of liposome encapsulated doxorubicin (TLC D-99): comparison with doxorubicin and empty liposomes in mice and dogs. In Vivo. 7 (1), 85-95 (1993).
- Ma, L. J., Fogo, A. B. Model of robust induction of glomerulosclerosis in mice: importance of genetic background. Kidney Int. 64 (1), 350-355 (2003).
- Kren, S., Hostetter, T. H. The course of the remnant kidney model in mice. Kidney Int. 56 (1), 333-337 (1999).
- Mizuno-Horikawa, Y., Mizuno, S., Tamura, S., Kurosawa, T. Advanced glomerulosclerosis is reversible in nephrotic mice. Biochem Biophys Res Commun. 284 (3), 707-713 (2001).
- Friberger, P. Chromogenic peptide substrates. Their use for the assay of factors in the fibrinolytic and the plasma kallikrein-kinin systems. Scand J Clin Lab Invest Suppl. 162, 1-298 (1982).
- Haerteis, S., et al. Plasma kallikrein activates the epithelial sodium channel in vitro but is not essential for volume retention in nephrotic mice. Acta Physiologica. , (2018).
- Schork, A., et al. Association of Plasminuria with Overhydration in Patients with CKD. Clin J Am Soc Nephrol. 11 (5), 761-769 (2016).
