هنا يمكننا وصف بروتوكول لإنتاج حصاد الإبر التي يمكن استخدامها لجمع الأنسجة كاملة-سمك الجلد دون التسبب بالجهات المانحة للموقع تندب. يمكن الجمع بين الإبر مع نظام لجمع بسيطة لتحقيق حصاد كبيرة الحجم.
ويصف هذه المخطوطة في عملية الإنتاج لجهاز مختبر، المصنوعة من المكونات الجاهزة، التي يمكن استخدامها لجمع ميكروكولومنس أنسجة الجلد كامل-سمك. الحجم الصغير ميكروكولومنس تسمح الجهات المانحة المواقع للشفاء بسرعة دون التسبب في موقع المانحة تندب، بينما الحصاد الكامل-سمك الأنسجة يتيح إدماج جميع مكونات الخلوية وخارج الخلية الأنسجة الجلد، بما في ذلك تلك المرتبطة مع أعمق مناطق الجلد وهياكل الجلد أدنيكسال، التي لم يمكن استنساخها بنجاح باستخدام الأنسجة التقليدية هندسة التقنيات. يمكن أن تطبق ميكروكولومنس مباشرة في الجروح الجلدية لتعزيز الشفاء، أو يمكن استخدامها كمصدر لخلية/الأنسجة الذاتي للنهج هندسة الأنسجة الأخرى. تصنع الإبر الحصاد عن طريق تعديل معيار إبر الإبر، ويمكن استخدامها وحدها لحصاد كميات صغيرة من الأنسجة أو مقترنة بنظام جمع شفط بسيطة (أيضا مصنوعة من اللوازم المختبرية المتاحة عموما) ارتفاع حجم الحصاد لتيسير الدراسات في النماذج الحيوانية الكبيرة.
ترقيع الجلد الذاتي هو الدعامة الأساسية لإصلاح الجرح، بل أنه مقيد بندرة موقع الجهات المانحة والاعتلال، مما أدى إلى بذل جهود متضافرة في العقود الأخيرة لتطوير خيارات علاجية جديدة لتحل محل التقليدية ترقيع الجلد1،2 . ونحن مؤخرا بوضع طريقة بديلة لحصاد الجلد تسخير فوائد ترقيع الجلد كامل-سمك مع التقليل من الاعتلال موقع الجهات المانحة. بجمع كامل-سمك الجلد في شكل الصغيرة (~0.5 مم) “ميكروكولومنس”، مواقع الجهات المانحة قادرة على شفاء سريعاً ودون تندب في الظروف العادية (للاستثناءات المحتملة، راجع المقطع المناقشة أدناه)3. ميكروكولومنس يمكن تطبيقها مباشرة في أسرة الجرح للتعجيل بإغلاق الجرح، والحد من انكماش3، واستعادة مجموعة متنوعة من أنواع الخلايا البشرة والجلد والهياكل الوظيفية أدنيكسال4، التي تعاني من نقص في ترقيع الجلد سبليت-سمك التقليدية أو بدائل الجلد المحورة وراثيا الحالية5. القدرة ميكروكولومنس لتعزيز الشفاء ومواقعهم المانحة للشفاء دون تندب لها سواء بشكل مستقل صودق قبل6،مجموعات البحث الأخرى7.
ونحن قد سبق أن وضعت نظام حصاد مختبر لتمكين مجموعة ميكروكولومنس في الجدول8؛ ومع ذلك، يتكون هذا النظام من العديد من المكونات المخصصة التي لا تتوفر على نطاق واسع. هنا، نحن تصف بالتفصيل هذه العملية لإنتاج حصاد الإبر، فضلا عن نظم جمع بسيطة، مصنوعة من معظمهم من المكونات الجاهزة، التي يمكن استخدامها لتحقيق حصاد كبيرة الحجم. جهاز الموصوفة في هذه المخطوطة مناسب في المختبر وعمل الحيوان، ولكن ليس للاستخدام في البشر. جهاز سريرية مع إزالة إدارة الأغذية والعقاقير لتطبيق هذا الأسلوب في البشر هو متاح تجارياً ولكن لن تناقش بالتفصيل هنا.
الأساليب الموصوفة هنا تهدف إلى تمكين جمع ميكروكولومنس الأنسجة بكميات كافية في فيفو كبير الدراسات الحيوانية، استخدام أدوات مصنوعة من اللوازم المختبرية المتاحة تجارياً. وقد استخدمت هذا الجهاز سابقا في حصاد الأنسجة من جلد الإنسان قصت4،9 ، فضلا عن جلد ال?…
The authors have nothing to disclose.
كان يؤيد هذا العمل جزئيا بالجيش والبحرية، والمعاهد الوطنية للصحة، والقوة الجوية، خامسا والشؤون الصحية لدعم هذا الجهد الثاني أفيرم، تحت “رقم جائزة” W81XWH-13-2-0054. “الولايات المتحدة الجيش الطبية اكتساب النشاط البحثي”، 820 تشاندلر الشارع، فورت ديتريك، MD 21702-5014 هو مكتب اقتناء مانحة الامتياز والقائمة. الآراء والتفسيرات والاستنتاجات والتوصيات هي آراء المؤلف ولا تقرها وزارة الدفاع بالضرورة.
Diamond wheel | Dremel | 545 | |
Hypodermic needle (19G) | Fisher Scientific | 14-840-98 | Other needle sizes could be used, depending on experimental needs |
Stome wheel | Dremel | 540 | |
Syringe (20mL with luer lock) | Fisher Scientific | 22-124-967 | |
Suction adapter | Tulip Medical | PA20BD | Optional, for high volume harvesting |
Suction canister | Fisher Scientific | 19-898-212 | Optional, for high volume harvesting. Sterilize before use. |
Suction tubing | Medline | DYND50216H | Optional, for high volume harvesting |