Summary

Subclavian ader punctie als een alternatieve methode van bloed monster collectie bij ratten

Published: November 18, 2018
doi:

Summary

Hier presenteren we een protocol voor het verzamelen van bloedmonsters van de rat subclavian ader.

Abstract

Bloedinzameling met genoeg bloed volume is essentieel in dierproeven. Bloedinzameling van de ader van de staart van ratten is populair en minder stressvol vergeleken met andere meer agressieve methoden zoals retro-orbitaal plexus monster collectie. Echter wordt deze bloed collectie methode soms beperkt door een onbevredigende slagingspercentage. Hier introduceren we een methode voor bloedinzameling via de subclavian ader punctie. De subclavian ader ligt net onder het sleutelbeen en deze ader is groot genoeg om te voldoen aan de eisen van het volume van bloed collectie. Onze resultaten tonen aan dat deze methode veilig en die van toepassing zijn voor bloedmonsters van de collectie met het bloed van de vereiste volume is. Bloedinzameling via de subclavian ader punctie kan dienen als een alternatieve bloed collectie methode in het geval van mislukte staart veneuze bloedmonsters bij ratten.

Introduction

Bloedinzameling is essentieel in het dierlijke onderzoek. De aders van de doelgroep voor bloedinzameling omvatten de retro-orbitaal plexus, de halsslagader, de saphenous ader, staart bloedvaten en de halsslagader1,2,3,4. Soms kon bloed worden verkregen van de abdominale aorta, vena cava of zelfs het hart5,6,7. Bij dergelijke gelegenheden, de dieren moeten worden opgeofferd en kunnen niet worden gebruikt voor verdere observatie; Dus, deze methoden worden gebruikt minder in dagelijkse experimenteel werk. Bloedinzameling van de ader van de staart van ratten is populair en minder stressvol ten opzichte van de hierboven genoemde methoden8.

Echter is bloedinzameling van de ader van de staart soms beperkt door een onbevredigende slagingspercentage. Af en toe, is het ook moeilijk om genoeg bloed-volume door deze methode. Zoals de subclavian ader groot genoeg is en net onder het sleutelbeen bot ligt, kunnen subclavian ader punctie een alternatieve methode voor het bloed bemonstering als routine bloed vergaringsmethoden mislukt zijn. Hier introduceren we een methode van bloed collectie door middel van subclavian ader punctie bij ratten.

Protocol

Deze studie werd goedgekeurd door de centrale Zuid-Universiteit ethisch comité voor onderzoek van het dier uit het tweede Xiangya ziekenhuis (Changsha, China). Het manuscript werd voorbereid volgens aankomen (dier onderzoek: rapportage van In Vivo experimenten) richtsnoeren9. 1. materiaal en dier voorbereiding Voorbereiden van benodigde materialen: epileren agent, 75% ethanol, plakband, bloed collectie buis, 2,5 mL spuit verbonden met naald (24 G, 0.6 mm x 25…

Representative Results

Een totaal van 20 SD ratten (mannelijke n = 10, vrouwelijke n = 10) hier werden gebruikt. Bloed collectionwas uitgevoerd door ervaren ondernemers, die hebben meer dan 20 bloed bemonsteringen uitgevoerd vanaf de subclavian ader bij ratten, en de exploitanten van de beginner, die hebben geen subclavian ader punctie ervaring in ratten of andere dieren. Voor activiteiten keek beginners ten minste 3 procedures gedaan door bekwame operatoren. <p class="jove_content" fo:keep-together.within…

Discussion

Hier introduceren we een alternatieve methode om bloed te onttrekken aan de subclavian ader en we laten zien dat deze methode is van toepassing, haalbaar en veilig voor bloedmonsters bij ratten. Deze methode is afgeleid van de pacemaker-implantatie van de voorsprong voor patiënten11lekke subclavian ader. De subclavian ader ligt gewoon posterior en caudal aan het sleutelbeen en is een voortzetting van de axillaire ader. Het loopt van de buitenste rand van de eerste rib naar de mediale rand van voo…

Declarações

The authors have nothing to disclose.

Acknowledgements

Geen verklaard.

Materials

rats Hunan SJA Laboratory Animal Co., Ltd (Changsha, Hunan Province, China) 
stastical software SPSS Statistics 17
epilating agent France Yi Sha Cosmetics Co.,Ltd(Guangzhou, Guangdong Province ,China)
2.5 mL syringe Shandong Weigao Group Medical Polymer Co.,Ltd(Weihai,Shandong Province ,China)
hair shaver Shanghai FLYCO Electric Co., Ltd(Shanghai,China)
adhesive tape 3M Deutschland GmbH(EdisonstraBe 6,59157 Kamen, Germany)
Pentobarbital sodium Merck
75% ethanol Department of Pharmacy,The Second Xiangya Hospital of Central South Univesity
blood collection tube Hubei Jinxing Technology&Development Co.,Ltd (Wuhan Hubei Province,China) (2ml)
electronic scale Dongguan Shengheng Electronics Co.,Ltd (Dongguan,Guangdng Province,China)
canvas gloves for anethesia
hepain Nanjing Xinbai Pharmaceutical  Co.,Limited (Nanjing, Jiangsu Province, China) (2mL, 12500 IU)
physical saline Hunan Kelun Pharmaceutical Co., Ltd(Yueyang ,Hunan Province,China) (100ml)

Referências

  1. Parasuraman, S., Raveendran, R., Kesavan, R. Blood sample collection in small laboratory animals. Journal of Pharmacology, Pharmacotherapeutics. 1 (2), 87-93 (2010).
  2. Korfmacher, W., et al. Utility of capillary microsampling for rat pharmacokinetic studies: Comparison of tail-vein bleed to jugular vein cannula sampling. Journal of Pharmacological and Toxicological Methods. 76, 7-14 (2015).
  3. Feng, J., et al. Catheterization of the carotid artery and jugular vein to perform hemodynamic measures, infusions and blood sampling in a conscious rat model. Journal of Visualized Experiments. (95), (2015).
  4. Wickremsinhe, E. R., Renninger, M., Paulman, A., Pritt, M., Schultze, A. E. Impact of Repeated Tail Clip and Saphenous Vein Phlebotomy on Rats Used in Toxicology Studies. Toxicologic Pathology. 44 (7), 1013-1020 (2016).
  5. Takahashi, M., Makino, S., Kikkawa, T., Osumi, N. Preparation of rat serum suitable for mammalian whole embryo culture. Journal of Visualized Experiments. (90), e51969 (2014).
  6. Cochran, B. J., et al. Determining Glucose Metabolism Kinetics Using 18F-FDG Micro-PET/CT. Journal of Visualized Experiments. (123), (2017).
  7. Beeton, C., Garcia, A., Chandy, K. G. Drawing blood from rats through the saphenous vein and by cardiac puncture. Journal of Visualized Experiments. (7), 266 (2007).
  8. Zou, W., et al. Repeated Blood Collection from Tail Vein of Non-Anesthetized Rats with a Vacuum Blood Collection System. Journal of Visualized Experiments. (130), (2017).
  9. Kilkenny, C., Altman, D. G. Improving bioscience research reporting: ARRIVE-ing at a solution. Lab Animal. 44 (4), 377-378 (2010).
  10. National Institute of Health. . Guide for the Care and Use of Laboratory Animals. , (2011).
  11. Antonelli, D., Feldman, A., Freedberg, N. A., Turgeman, Y. Axillary vein puncture without contrast venography for pacemaker and defibrillator leads implantation. Pacing and Clinical Electrophysiology. 36 (9), 1107-1110 (2013).
  12. Luis, A. L., et al. Microscopic magnetic resonance imaging of the thoracic venous system in rats with congenital diaphragmatic hernia. Pediatric Surgery International. 27 (2), 175-180 (2011).
  13. Tsukamoto, A., Serizawa, K., Sato, R., Yamazaki, J., Inomata, T. Vital signs monitoring during injectable and inhalant anesthesia in mice. Experimental Animals. 64 (1), 57-64 (2015).

Play Video

Citar este artigo
Yang, H., Zou, P., Chen, J., Shi, G., Wu, C., Wang, M., Zhou, Q., Zhou, S. Subclavian Vein Puncture As an Alternative Method of Blood Sample Collection in Rats. J. Vis. Exp. (141), e58499, doi:10.3791/58499 (2018).

View Video