Повторная интубация оротрахии у мышей
Summary
Целью данной статьи является описание утонченного метода интубации лабораторной мыши. Метод является неинвазивным и, следовательно, идеально подходит для исследований, которые требуют последовательного мониторинга дыхательной функции и / или зависания лечения в легких.
Abstract
Литература описывает несколько методов интубации мыши, которые либо требуют визуализации glottis через полость рта или разрез в брюшной шее для прямого подтверждения размещения канюли в трахее. Относительная трудность или травма тканей, вызванная предметом такими процедурами, может быть препятствием для способности следователя проводить продольные исследования. Эта статья иллюстрирует технику, в которой физические манипуляции с мышью после использования депиляции для удаления волос из брюшной шеи позволяет транскожную визуализацию трахеи для оротрахальной интубации, независимо от степени кожи Пигментации. Этот метод безобиден для предмета и легко достигается с ограниченным пониманием анатомии мурин. Этот изысканный подход облегчает повторную интубацию, которая может быть необходима для мониторинга прогрессирования заболевания или зависания лечения. Использование этого метода может привести к сокращению количества животных и технических навыков, необходимых для измерения функции легких в мышиных моделях респираторных заболеваний.
Introduction
Лабораторная мышь является общей моделью животных для респираторных заболеваний человека. Таким образом, существует несколько опубликованных методов интубации мыши с целью как зависания процедур, так и измерения дыхательной механики. Большинство описанных процедур требуют визуализации glottis через полость рта со специализированным оборудованием, таким как ларингоскоп или волоконно-оптический источник света1,2,3,,4,,55,6,7. Однако, это может быть трудно, когда требуется относительно большая канюля, так как она может скрыть мнение исследователя. Limjunyawong et al.8 обратились к этой проблеме с помощью метода интубации, при котором небольшой кожный разрез делается вдоль средней линии брюшной шеи, позволяющей визуализировать трахею. После процедуры разрез закрывается клеем ткани.
Для исследований, требующих частых повторных интубации, последовательное обрезка и закрытие этого участка требует дебридирования кожи края и травмы тканей брюшной шеи. Цель юрисподхода к визуализации транскожной трахеи к устной интубации заключается в предоставлении усовершенствованной, неинвазивной техники, специально подходящей для повторных исследований интубации, а также одиночных интубации у мышей.
Protocol
Representative Results
Discussion
Интубация с использованием транскожной методики визуализации трахеи предлагает изысканный подход к стандартному методу разреза кожи. При особом внимании к нескольким ключевым шагам интубация может быть легко и быстро достигнута. Зверь должен быть помещен прямо в подошве лежачих на и…
Declarações
The authors have nothing to disclose.
Acknowledgements
Авторы благодарят Люсию Розас, Лорен Дулиттл, Лизу Джозеф и Линдси Фергюсон за техническую помощь и университетскую лабораторию животных ресурсов за поддержку по уходу за животными. Эта работа финансируется NIH T35OD010977 и R01-HL102469.
Materials
| 18Gx1 1/4" intravenous catheter, Safelet | Fisher Scientific | #14-841-14 | Cannula for intubation |
| 70% ethanol, 10L | Fisher Scientific | 25467025 | Cleaning cannula |
| Abrasive paper (sandpaper) | Porter-Cable | 74001201 | Cannula preparation |
| AnaSed (xylazine sterile solution) injection (100 mg/ml) | Akorn Animal Health | NDC# 59399-111-50 | Anesthesia |
| Blue labeling tape (0.5 in x 14 yds) | Fisher Scientific | 15966 | Restraint on intubation platform |
| Braided silk suture without needle, nonsterile, (3-0) | Henry Schein | Item #1007842 | Intubation platform |
| Deltaphase Isothermal Pad | Braintree Scientific | 39DP | Mouse thermoregulation and recovery |
| Deltaphase Operating Board | Braintree Scientific | 39OP | Mouse recovery (prior to extubation) |
| Distilled water | ThermoFisher | 15230253 | Cleaning mouse following depilation |
| Eye Scissors, angled, sharp/sharp | Harvard Apparatus | 72-8437 | Cannula preparation |
| FlexiVent (FX Module 2) | Scireq | N/A | Record lung function data (not required to perform procedure, used in this study to validate procedure) |
| Gauze sponges | Fisher scientific | 13-761-52 | Hair removal |
| Heavy-Duty 3" 3-Ring View Binders | Staples | 24690CT | Intubation platform |
| Instat Software | Graphpad | N/A | Statistical analysis software |
| Insulin syringe (0.5 cc, U100) | Fisher Scientific | 329461 | Anesthesia administration |
| Ketamine HCl Injection, USP (100 mg/ml) | Llyod Laoratories | List No. 4871 | Anesthesia |
| Lung inflation bulb | Harvard Apparatus | 72-9083 | Confirm cannula placement |
| Micro Forceps, Curved, Smooth | Harvard Apparatus | 72-0445 | Retract tongue and create tension on neck for cannula visualization |
| Nair (hair removal lotion), 9 oz bottle | Church & Dwight | 42010440 | Hair removal |
| Sterile saline (0.9%), 10 ml | Fisher Scientific | NC9054335 | Anesthesia, cleaning skin following hair removal |
Referências
- Spoelstra, E. N., et al. A novel and simple method for endotracheal intubation of mice. Laboratory Animals. 41 (1), 128-135 (2007).
- Rivera, B., Miller, S. R., Brown, E. M., Price, R. E. A Novel Method for Endotracheal Intubation of Mice and Rats Used in Imaging Studies. Contemporary Topics in Laboratory Animal Science. 44 (2), 52-55 (2005).
- Sparrowe, J., Jimenez, M., Rullas, J., Martinez, A. E., Ferrer, S. Refined Intratracheal Intubation Technique in the Mouse, Complete Protocol Description for Lower Airway Models. Global Journal of Animal Scientific Research. 3 (2), 363-369 (2015).
- Deyo, D. J., Wei, J. A Novel Method of Intubation and Ventilation in Mice. Anesthesia & Analgesia. 88 (2), 179 (1999).
- Vergari, A., et al. A new method of orotracheal intubation in mice. European Review for Medical and Pharmacological Sciences. 8 (3), 103-106 (2004).
- Brown, R. H., Walters, D. M., Greenberg, R. S., Mitzner, W. A method of endotracheal intubation and pulmonary functional assessment for repeated studies in mice. Journal of Applied Physiology. 87 (6), 2362-2365 (1999).
- Das, S., MacDonald, K., Chang, H. S., Mitzner, W. A Simple Method of Mouse Lung Intubation. Journal of Visualized Experiments. (73), e50318 (2013).
- Limjunyawong, N., Mock, J., Mitzner, W. Instillation and Fixation Methods Useful in Mouse Lung Cancer Research. Journal of Visualized Experiments. (102), e52964 (2015).
- Qin, W., Baran, U., Wang, W. Lymphatic response to depilation-induced inflammation assessed with label-free optical lymphangiography. Lasers in Surgery and Medicine. 47 (8), 669-676 (2015).
- McGovern, T. K., Robichaud, A., Fereydoonzad, L., Schuessler, T. F., Martin, J. G. Evaluation of Respiratory System Mechanics in Mice using the Forced Oscillation Technique. Journal of Visualized Experiments. (75), e50107 (2013).
