Um modelo modificado de rato de dois rins um clipe de regulação de renin em estenose da artéria renal

Resumo

Um modelo modificado de 2 rim 1 (2K1C) O modelo de rato Goldblatt foi desenvolvido usando tubos de poliuretano para iniciar a estenose da artéria renal, induzindo um aumento na expressão de renin e lesão renal. Aqui, descrevemos um procedimento detalhado de preparação e colocação da braçadeira na artéria renal para gerar um modelo de mouse 2K1C reprodutível e consistente.

Resumo

A estenose da artéria renal é uma condição comum em pacientes com doença vascular coronariana ou periférica onde o sistema de aldosterona renin angiotensin (RAAS) é superativado. Nesse contexto, há um estreitamento das artérias renais que estimulam o aumento da expressão e liberação de renin, a protease que limita a taxa no RAAS. O aumento resultante da expressão de renin é um conhecido condutor da hipertensão renovascular, frequentemente associada a lesões renais e danos nos órgãos finais. Assim, há um grande interesse em desenvolver novos tratamentos para essa condição. O mecanismo molecular e celular do controle de renin na estenose da artéria renal não é totalmente compreendido e merece uma investigação mais aprofundada. Para induzir estenose da artéria renal em camundongos, foi desenvolvido um modelo de rato Goldblatt modificado de 2 rins 1 (2K1C). O rim direito foi estenoso em camundongos do tipo selvagem e camundongos operados por vergonha foram usados como controle. Após estenose da artéria renal, determinamos expressão de renin e lesão renal. Os rins foram colhidos, e cortices frescos foram usados para determinar a expressão proteica e mRNA de renin. Este modelo animal é reprodutível e pode ser usado para estudar respostas fiofoficológicas, vias moleculares e celulares envolvidas na hipertensão renovascular e lesão renal.

Introdução

A estenose da artéria renal (RAStenosis) é um problema intratável que afeta cerca de 6% das pessoas com mais de 65 anos e em até 40% das pessoas com doença vascular coronariana ou periférica ^1,2. Os tratamentos atuais para a doença são limitados; portanto, há uma necessidade crítica de desenvolver novas terapias para tratar hipertensão renovascular ou hipertensão resistente induzida por RAStenosis. O sistema de aldosterona de angiotensina renin (RAAS) é o caminho-chave envolvido na patogênese da hipertensão induzida por RAStenose ou hipertensão renovascular ^3,4

Protocolo

Os camundongos foram alojados e atendidos na Divisão de Cuidados com Animais do Centro Médico da Universidade Vanderbilt (VUMC) seguindo as diretrizes do National Institutes of Health (NIH) e o Guia para o Cuidado e Uso de Animais de Laboratório, Departamento de Saúde e Serviços Humanos dos EUA. Todos os procedimentos em animais foram aprovados pelo Comitê Institucional de Cuidados e Uso de Animais da VUMC antes do início dos experimentos.

1. Preparação e dissecção animal

1. Ligue o germinador e a bomba de água da almofada de aquecimento cerca de 30 minutos antes de iniciar a cirurgia.
2. Corte tubo de poliuretano de 0,5 mm de....

Resultados

A constrição da artéria renal aumenta a expressão de renin no rim estenoso enquanto reprime a expressão no rim contralateral. O dois rim um clipe (2K1C) ou modelo Goldblatt de estenose induz aumento da expressão renin e lesão renal. Este é reconhecido como o melhor modelo representativo de estenose unilateral da artéria renal em humanos.

A expressão de renin e prorenina (precursora da renin) foram medidas utilizando-se imunoblotting. Os dados mostram que a expressão de renin e prorenina aument.......

Discussão

A estenose da artéria renal é uma importante causa de hipertensão secundária ou resistente, e lesão renal ^1,29. O modelo goldblatt de dois rins (2K1C) foi empregado para estudar a hipertensão renovascular induzida por RAStenosis 1,17,18,19. Vários estudos anteriores utilizando vários modelos de animais mostraram que a estenose na artéri.......

Materiais

Lista de materiais utilizados neste artigo

Nome	Empresa	Número de catálogo	Comentários
Diet Gel	Clear H2O	Diet-Gel 76A	Dieta de recuperação cirúrgica
EMC Almofada dura aquecida	Hallowell	000A2788B	Almofadas de aquecimento foram usadas para manter os ratos aquecidos
Sutura de Nylon	Ethilon Ethicon	662G	4-0 (métrica 1.5), Esta sutura foi usada para fechar o peritônio e a pele
Sutura de Nylon	Ethilon Ethicon	2815 G	8-0 (0,4 métrica), Esta sutura foi usada para fechar o manguito para amarrar e contrair a artéria
Germinator 500	Braintree Scientific Inc.	GER 5287	Esterilize ferramentas cirúrgicas entre cirurgias
Cetoprofeno	Zoetis	Ketofen	Analgésico
Poliuretano	Braintree Scientific Inc.	MRE-025	Este tubo foi usado para iniciar a estenose
Cotonetes anti-sépticos de iodopovidona	Medline	MDS093901	Foi aplicado após depilação e cirurgia na pele
Reflex 7 Clip Applier	Roboz Surgical Instrument Co	204-1000	Este aplicador de clipe foi usado para aplicar o clipe no caso de uma ou mais suturas saírem
Cortinas de toalha estéreis	Dynarex	4410	Foi usado como lençol para ratos durante a cirurgia
Pomada antibiótica tripla	Medi-First	22312
Bomba de água	Stryker	T/pump Professionals	Usado para aquecer e circular água na almofada dura de aquecimento para manter os ratos aquecidos durante e pós-cirurgia