कार्डियोथोरेसिक सर्जरी के लिए प्रीएडोलसेंट माउस पिल्ले का संज्ञाहरण और इंटुबैशन
Summary
>7 दिन के चूहों में कार्डियोथोरेसिक सर्जिकल मॉडल को इंटुबैशन की आवश्यकता होती है, लेकिन यह पूर्व-किशोर (8-14-दिन) माउस पिल्ले के लिए चुनौतीपूर्ण है और इंटुबैशन के लिए एनेस्थेटिक आहार पर बहुत कम जानकारी है। यहां, हम 10 दिन के सी 57बीएल / 6 जे माउस पिल्ले में केटामाइन / ज़ाइलाज़िन / एट्रोपिन की खुराक आहार प्रस्तुत करते हैं जो पशु मृत्यु दर को कम करते हुए एंडोट्रेकियल इंटुबैशन की अनुमति देते हैं।
Abstract
म्यूरिन सर्जिकल मॉडल प्रीक्लिनिकल अनुसंधान में एक महत्वपूर्ण भूमिका निभाते हैं। कार्डियक चोट के बाद मायोकार्डियल पुनर्जनन में यांत्रिक अंतर्दृष्टि 0-14 दिन के चूहों में कार्डियोथोरेसिक सर्जरी मॉडल से प्राप्त की जा सकती है, जिनमें से कार्डियोमायोसाइट्स, वयस्कों के विपरीत, प्रोलिफेरेटिव क्षमता बनाए रखते हैं। 7 दिन तक के माउस पिल्ले प्रभावी रूप से हाइपोथर्मिया द्वारा स्थिर होते हैं और कार्डियोथोरेसिक सर्जरी के लिए इंटुबैशन की आवश्यकता नहीं होती है। प्रीएडोलसेंट (8-14-दिन पुराने) माउस पिल्ले, हालांकि, इंटुबैशन की आवश्यकता होती है, लेकिन यह चुनौतीपूर्ण है और इंटुबैशन की सुविधा के लिए संज्ञाहरण के बारे में बहुत कम जानकारी है। यहां, हम 10 दिन के सी 57बीएल / 6 जे माउस पिल्ले में केटामाइन / ज़ाइलाज़िन / एट्रोपिन की खुराक आहार प्रस्तुत करते हैं जो पशु मृत्यु दर को कम करते हुए एंडोट्रेकियल इंटुबैशन की अनुमति देते हैं। शरीर के वजन के लिए केटामाइन/ ज़ाइलज़िन / एट्रोपिन खुराक आहार के अनुभवजन्य अनुमापन ने संकेत दिया कि विभिन्न वजन के माउस पिल्ले के संज्ञाहरण की प्रतिक्रिया गैर-रैखिक थी, जिससे 20/4/0.12 मिलीग्राम / किग्रा, 30/4/0.12 मिलीग्राम / किग्रा, और 50/6/0.18 मिलीग्राम / किग्रा की खुराक ने 3.15-4.49 ग्राम (एन = 22) के बीच वजन वाले पिल्लों के इंटुबैशन की सुविधा प्रदान की। क्रमशः। कम शरीर के वजन वाले पिल्लों को भारी पिल्ले (पी < 0.001) की तुलना में अधिक इंटुबैशन प्रयासों की आवश्यकता होती है। उत्तरजीविता पोस्ट-इंटुबैशन शरीर के वजन के साथ सहसंबद्ध है (क्रमशः कम, मध्य और उच्च वजन वाले समूहों के लिए 59%, 70%, और 80%, आर2 = 0.995)। इंटुबैशन के बाद मायोकार्डियल रोधगलन सर्जरी के लिए, संज्ञाहरण के एक सर्जिकल विमान को 100% ऑक्सीजन में 4.5% आइसोफ्लुरेन के साथ प्रेरित किया गया था और 100% ऑक्सीजन में 2% आइसोफ्लुरेन के साथ बनाए रखा गया था। सर्जरी के बाद उत्तरजीविता तीन वजन समूहों के लिए 92%, 86% और 88% (पी = 0.91) पर समान थी। इंटुबैशन और सर्जरी के लिए पशु हैंडलिंग प्रथाओं में परिष्करण के साथ, और सर्जरी के बाद बांध द्वारा नरभक्षण को कम करने के साथ, पूरी प्रक्रिया (इंटुबैशन प्लस सर्जरी) के लिए समग्र अस्तित्व शरीर के वजन (55%, 60%, और 70% क्रमशः कम, मध्य और उच्च वजन वाले समूहों के लिए, आर2 = 0.978) के साथ सहसंबद्ध है। 10-दिन के पिल्लों के इंटुबैशन के साथ आने वाली कठिनाई और संबंधित उच्च मृत्यु दर को देखते हुए, हम 10-दिन के पिल्ले में कार्डियोथोरेसिक सर्जरी को कम से कम 5.5 ग्राम वजन वाले पिल्लों तक सीमित करने की सलाह देते हैं।
Introduction
म्यूरिन मॉडल प्रीक्लिनिकल कार्डियोथोरेसिक अनुसंधान में अमूल्य उपकरण हैं, विशेष रूप से जिस आसानी से आनुवंशिक रूप से इंजीनियर माउस लाइनें उत्पन्न की जा सकती हैं, और यह भी आसानी से चूहों को पैथोलॉजिकल रोग मॉडल प्रदान करने के लिए शल्य चिकित्सा से हेरफेर किया जा सकता है, उदाहरण के लिए, हृदय की चोट के बाद मायोकार्डियल पुनर्जनन का अध्ययन1 . इस संबंध में, यह दिलचस्प है कि, वयस्क चूहों के विपरीत, जिसमें कार्डियोमायोसाइट्स कोशिका चक्र से पीछे हट गए हैं, 0-2 दिन के नवजात माउस दिल एपिकल रिसेक्शन या मायोकार्डियल रोधगलन 2,3,4 के प्रेरण के बाद न्यूनतम निशान के साथ मरम्मत करते हैं। इसके विपरीत, 7-दिन के नवजात दिल 2,3 के निशान की उच्च घटनाओं के साथ पूरी तरह से पुनर्जीवित होते हैं। चूंकि बाएं वेंट्रिकल के शीर्ष में कार्डियोमायोसाइट्स जन्म के बाद 2 सप्ताह तक प्रोलिफेरेटिव क्षमता बनाए रखते हैं, इसलिए 0-14 दिन के चूहों में हृदय की चोट के बाद पुनर्जनन के यांत्रिक अध्ययन घायलवयस्क हृदय के उत्थान के लिए चिकित्सीय लक्ष्यों की पहचान करने के लिए सूचनात्मक हो सकते हैं।
कार्डियक चोट के माउस मॉडल के विकास में संज्ञाहरण के तहत सर्जिकल हेरफेर शामिल है। इसके लिए आवश्यक है कि वक्ष को हृदय तक पहुंचने के लिए खोला जाए, जो आम तौर पर इंटुबैशन और यांत्रिक वेंटिलेशन को अनिवार्य करता है। माउस तनाव, शरीर का वजन और उम्र एनेस्थेटिक्स के प्रति संवेदनशीलता को प्रभावित करते हैं। वयस्क चूहों को एजेंटों की एक विस्तृत श्रृंखला के साथ एनेस्थेटाइज किया जा सकता है, इंटुबैशन के लिए एक आम आहार 100/13/0.5 मिलीग्राम / किग्रा 6,7 पर केटामाइन / ज़ाइलेज़िन / एट्रोपिन है। नवजात चूहों (0-7 दिन पुराने) में एक केंद्रीकृत दर्द रिफ्लेक्स की कमी होती है, और उन्हें बर्फ पर प्रभावी ढंग से स्थिर किया जा सकता है औरइंटुबैशन 6,8,9 के बिना सर्जरी के अधीन किया जा सकता है। प्रीएडोलसेंट (8-14-दिन पुराना) माउस पिल्ले को हाइपोथर्मिया 9,10 के साथ एनेस्थेटाइज्ड नहीं किया जा सकता है; कार्डियोथोरेसिक सर्जरी के लिए उन्हें इंटुबैशन की आवश्यकता होती है। 14 दिन से कम उम्र के किशोरावस्था के चूहों में कार्डियोथोरेसिक सर्जरी पर कोई पिछला अध्ययन नहीं है। हमारे अनुभव में, 14 दिनों से कम उम्र के आइसोफ्लुरेन-एनेस्थेटाइज्ड प्रीएडोलसेंट चूहों का इंटुबैशन मुश्किल है। 7 दिनों से अधिक उम्र के चूहों के लिए अनुशंसित इंजेक्शन एनेस्थेटिक आहार 50-150 मिलीग्राम / किग्रा केटामाइन और 5-10 मिलीग्राम / किग्रा ज़ाइलाज़िन10 है। किशोरावस्था से पहले के चूहे अभी भी न्यूरोलॉजिकल रूप से विकसित हो रहे हैं और दवाओं और दवा चयापचय के लिए उनकी प्रतिक्रियाएंवयस्क जानवरों से बहुत अलग हैं। यह तरल पदार्थ, इलेक्ट्रोलाइट और एसिड-बेस असंतुलन के साथ-साथ हाइपोग्लाइसीमिया और हाइपोथर्मिया के जोखिम को बढ़ाता है, न केवल उनकी उच्च चयापचय दर के कारण, जो तेजी से उनके सीमित ऊर्जा भंडार को कम करता है, बल्कि उनके थर्मोरेगुलेटरी अपरिपक्वता 6,11,12 के कारण भी होता है। इस प्रकार, एनेस्थेटिक आहार पर बहुत कम जानकारी है जो दोनों इंटुबैशन की सुविधा प्रदान करते हैं और पूर्वकिशोर चूहों के अस्तित्व को अधिकतम करते हैं।
यहां हमने 10 दिन पुराने सी57बीएल/6जे माउस पिल्लों में 3-8 ग्राम तक वजन वाले केटामाइन/जाइलाज़िन/एट्रोपिन की खुराक का अनुभवपूर्वक परीक्षण किया है, ताकि एनेस्थीसिया का एक विमान प्राप्त किया जा सके, जो पशु मृत्यु दर को कम करते हुए बाद में कार्डियोथोरेसिक सर्जरी के लिए एंडोट्राचेल इंटुबैशन की अनुमति देने के लिए पर्याप्त है। हमने इंटुबैशन, सर्जरी और पोस्ट-सर्जिकल मातृ नरभक्षण से मृत्यु दर को कम करने के लिए पशु हैंडलिंग प्रथाओं को भी परिष्कृत किया।
Protocol
Representative Results
Discussion
वर्तमान में, कार्डियोथोरेसिक सर्जरी के लिए 10 दिन के चूहों के संज्ञाहरण और इंटुबैशन के लिए कोई अच्छी तरह से प्रलेखित तरीके नहीं हैं। इसके लिए, हमने शरीर के वजन के लिए केटामाइन / ज़ाइलाज़िन / एट्रोपिन खुरा…
Declarações
The authors have nothing to disclose.
Acknowledgements
इस काम को एनएचएमआरसी प्रोग्राम ग्रांट [आईडी 1074386], कार्डियोवैस्कुलर रिसर्च ग्रांट [आरएमजी] में उत्कृष्टता के लेडुक ट्रान्साटलांटिक नेटवर्क और आरटी हॉल ट्रस्ट [आरएमजी एंड एसईआई] से अनुदान द्वारा समर्थित किया गया था।
Materials
| Atipamezole (Antisedan) | Provet (NSW) Pty Ltd | ATIP I | |
| Atropine 600 mcg/mL | Clifford Hallam Healthcare Pty Ptd | 1957699 PFIZER-0143386 | |
| Betadine | Livingstone International | BU0520 | |
| Buprenorphine (Temgesic) | Provet (NSW) Pty Ltd | TEMG I | |
| Fiber-optic light | Leica | 3011350 | CLS 150X |
| GraphPad Prism | GraphPad Software, LLC | Version 9.1.2 | |
| Intubation platform | – | – | Any sturdy box (e.g. plastic tip box) with approximate dimensions 12 (L) x 8.5 x (W) x 7.5 cm (H) |
| Isoflurane | Provet (NSW) Pty Ltd | ISOF 07 | |
| Ketamine 100 mg/mL | Provet (NSW) Pty Ltd | KETAI1 | |
| Plastic intravenous cannula 24-gauge Polywin Safety | BD Insyte | CE0086 | 19 mm length of plastic tubing (0.7 mm outer diameter) attached to a 21mm plastic female luer lock adaptor; total volume of annula 130 μL |
| Single lumen polyethylene tube | Critchley Electrical Products Pty Ltd Auburn NSW | Outer diameter 0.61 mm, inner diameter 0.28 mm | |
| Small forceps | F.S.T. | NO 11051-10 | |
| Surgical microscope (camera optional) | Leica | M651 (Leica IC80 HD camera) | 10x and 16x objective |
| Suture 7-0 prolene | Ethicon | 8708H | |
| Suture 9-0 polypropylene monofilament | Ethicon | 2813 | |
| V-1 Tabletop with Active Scavenging isoflurane anesthesia systm | VetEquip | 901820 | |
| Vented 2-Liter plexiglass induction chamber | VetQuip Pty Ltd | 942102 | 25 cm (L) x 13 cm (W) x 11 cm (H) |
| Warming lamp | Brilant Lighting | 99223 | |
| Xylazine | Provet (NSW) Pty Ltd | XYLA Z 2 |
Referências
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