Anestesia e Intubação de Filhotes de Camundongos Pré-Adolescentes para Cirurgia Cardiotorácica

Jianxin Wu; Amy M. Nicks; Justin J. Skowno; Michael P. Feneley; Robert M. Graham; Siiri E. Iismaa

doi:10.3791/64004

É necessária uma assinatura do JoVE para visualizar este conteúdo. Faça login ou inicie seu teste gratuito.

Artigo de método

Anestesia e Intubação de Filhotes de Camundongos Pré-Adolescentes para Cirurgia Cardiotorácica

2.7K visualizações

⸱

DOI:

10.3791/64004

⸱

2 de junho de 2022

Jianxin Wu^*¹ , Amy M. Nicks¹^,² , Justin J. Skowno³^,⁴ , Michael P. Feneley¹^,² , Robert M. Graham¹^,² , Siiri E. Iismaa^*¹^,²

¹Molecular Cardiology and Biophysics Division, Victor Chang Cardiac Research Institute, ²St Vincent’s Clinical School, University of New South Wales Sydney, ³Department of Anaesthesia, The Children’s Hospital at Westmead, ⁴School of Child and Adolescent Health, University of Sydney

^* These authors contributed equally

Neste artigo

Resumo

Modelos cirúrgicos cardiotorácicos em camundongos com >7 dias de idade requerem intubação, mas isso é um desafio para filhotes de camundongos pré-adolescentes (8-14 dias de idade) e há pouca informação sobre regimes anestésicos para intubação. Aqui, apresentamos esquemas posológicos de cetamina/xilazina/atropina em filhotes de camundongos C57BL/6J de 10 dias de idade que permitem a intubação endotraqueal, minimizando a mortalidade animal.

Resumo

Os modelos cirúrgicos murinos desempenham um papel importante na pesquisa pré-clínica. Insights mecanicistas sobre a regeneração miocárdica após lesão cardíaca podem ser obtidos a partir de modelos de cirurgia cardiotorácica em camundongos de 0 a 14 dias de idade, cujos cardiomiócitos, ao contrário dos adultos, retêm a capacidade proliferativa. Filhotes de camundongos com até 7 dias de idade são efetivamente imobilizados por hipotermia e não necessitam de intubação para cirurgia cardiotorácica. Filhotes de camundongos pré-adolescentes (8-14 dias de idade), no entanto, requerem intubação, mas isso é um desafio e há pouca informação sobre anestesia para facilitar a intubação. Aqui, apresentamos esquemas posológicos de cetamina/xilazina/atropina em filhotes de camundongos C57BL/6J de 10 dias de idade que permitem a intubação endotraqueal, minimizando a mortalidade animal. A titulação empírica dos regimes posológicos de cetamina/xilazina/atropina para o peso corporal indicou que a resposta à anestesia de filhotes de camundongos de diferentes pesos foi não linear, em que doses de 20/4/0,12 mg/kg, 30/4/0,12 mg/kg e 50/6/0,18 mg/kg facilitaram a intubação de filhotes pesando entre 3,15-4,49 g (n = 22), 4,50-5,49 g (n = 20) e 5,50-8,10 g (n = 20), respectivamente. Filhotes de menor peso corporal necessitaram de mais tentativas de intubação do que filhotes mais pesados (p < 0,001). A sobrevida pós-intubação correlacionou-se com o peso corporal (59%, 70% e 80% para os grupos de baixo, médio e alto peso, respectivamente, R² = 0,995). Para a cirurgia de infarto do miocárdio após a intubação, um plano cirúrgico de anestesia foi induzido com isoflurano a 4,5% em oxigênio a 100% e mantido com isoflurano a 2% em oxigênio a 100%. A sobrevida pós-operatória foi semelhante para os três grupos de peso em 92%, 86% e 88% (p = 0,91). Juntamente com refinamentos nas práticas de manejo de animais para intubação e cirurgia, e minimizando a canibalização pela barragem pós-cirurgia, a sobrevida global de todo o procedimento (intubação mais cirurgia) correlacionou-se com o peso corporal (55%, 60% e 70% para os grupos de baixo, médio e alto peso, respectivamente, R² = 0,978). Dada a dificuldade encontrada com a intubação de filhotes de 10 dias de idade e a alta mortalidade associada, recomendamos que a cirurgia cardiotorácica em filhotes de 10 dias de idade seja restrita a filhotes com peso mínimo de 5,5 g.

Introdução

Os modelos murinos são ferramentas inestimáveis na pesquisa cardiotorácica pré-clínica, em particular devido à facilidade com que as linhagens de camundongos geneticamente modificadas podem ser geradas, e também à facilidade com que os camundongos podem ser manipulados cirurgicamente para fornecer modelos de doenças patológicas que permitam, por exemplo, o estudo da regeneração miocárdica após lesão cardíaca¹ . A esse respeito, é interessante que, ao contrário de camundongos adultos em que os cardiomiócitos se retiraram do ciclo celular, os corações neonatais de camundongos de 0 a 2 dias de idade se reparam com cicatrizes mínimas após ressecção....