这是一个描述如何分离并培养颈上神经节(SCG)的新生幼鼠的主要交感神经元的协议。
颈上神经节(SCG)在大鼠小,有光泽,杏仁状结构,其中包含交感神经元。这些神经元提供的头部和颈部区域的交感神经支配,它们构成了一个良好的特点和人口相对同质化(4)。交感神经元是依赖于神经生长因子(NGF)的存活,分化和轴突生长和广泛的传播,神经生长因子的空房情况,有利于他们的文化和实验操作(2,3,6)。基于这些原因,培养的交感神经元,已被用于各种各样的研究,包括神经元的发育和分化,编程和病理细胞死亡的机制和信号转导(1,2,5,6)。解剖SCG从新生大鼠和培养交感神经元是不是很复杂,可以掌握相当迅速。在这篇文章中,我们将详细描述了如何剖析,从新生幼鼠在SCG并使用它们来建立培养的交感神经元。文章还将介绍预备步骤和各种试剂和实现这一目标所需要的设备。
我们用我们的文化SD大鼠。
需要时间和护理,清洗时的神经节。取出所有碎片,血管和脂肪。在确保文化,是多还是少均匀,无多余的细胞类型,这一步很重要。 uridine/5-FDU此外,将在很大程度上消除污染的文化任何剩余的非神经细胞(有丝分裂),或至少抑制其增殖。
此外,在解离步骤,耐心,花时间来单独的神经元,使他们没有发现在大的团块,一旦被接种到板块。大团块细胞不会产生良好的实?…
The authors have nothing to disclose.
新西兰想感谢她的实验室成员Subhas比斯瓦斯,安德鲁Sproul,和瑞安威利特培训,在解剖和收获交感神经元。由NIH – NINDS赠款支持。